A.选择性检测器:组分性质1、紫外可见吸收检测器(UVD)2、荧光检测器(FD)
B.通用型检测器:总体性质3、 蒸发光散射检测器(E***)4、电化学检测器(ED)5、示差折光检测器(RID)
检测器可通过许多可用的液相色谱软件包进行编程和控制。浙江蒸发光散射检测器G4260哪里好
色谱检测器介绍:检测器是利用样品的某一物理或化学性质与流动相有差异的原理,当样品随流动相从色谱柱流出经过检测器时,会导致流动相背景值发生变化,通过将变化的光学或其他信号转换成电信号,从而在色谱图上以色谱峰的形式记录下来。液相色谱中常用到的检测器有紫外-可见光检测器,荧光检测器,示差折光检测器,蒸发光散射检测器,质谱检测器等。1.紫外-可见光检测器(UV-VIS),用来检测带有发色基团的化合物,这些化合物往往带有不饱和键或未共用电子对。2.荧光检测器(FLD),有些化合物被紫外光照射后会发出比紫外光波长更长的光,即荧光,其灵敏度比UV更高。3.示差折光检测器(RID),是通过连续测定色谱柱流出液折射率的变化而对样品浓度进行检测的。通用型检测器,对没有紫外吸收的物质(如高分子化合物、糖类、脂肪烷烃等)。在制备色谱中也常用到,因为其不会改变通过其检测的样品性质。由于介质的折光率会随温度升高为降低,因此RI的信号响应对环境温度很敏感;流动相的比例变化也会影响折光率,因此RI只能走等度洗脱。4.蒸发光散射检测器(E***),是基于溶质的光散射性质的检测器,色谱柱流出液导入雾化器,被载气雾化成小液滴,液滴通过加热漂移管时。 海南蒸发光散射检测器G4260检修***台蒸发光散射检测器是由澳大利亚的Union Carbide研究实验室的科学家研制开发的。
漂移管中将溶剂蒸发,余下的不挥发性溶质颗粒在光散射检测池中得到检测。步骤1:雾化经;HPLC分离的柱洗脱液进入雾化器,在此与稳定的雾化气体(一般为氮气)混合形成气溶胶。气溶胶由均匀分布的液滴组成,液滴大小取决于分析中采用的气体流量。气体流量越低形成的液滴越大,液滴越大则散射的光越多,从而提高了分析灵敏度,但是越大的液滴在漂移管中越难蒸发。每种方法均存在产生比较好信号噪音比率的比较好化气体流量。流动相流速越低要求适当雾化的气体流量也越低。用内径为,能**降低流动相流速,因而提**析的灵敏度。步骤2:蒸发;气溶胶中挥发性成分在加热的不锈钢漂移管中蒸发。为特定应用设置适当的漂移管温度,取决于流动相组成和流速,以及样品的挥发性。高有机含量流动相比高含水量流动相要求蒸发的漂移管温度低。流动相流速越低比流动相流速越高要求蒸发的漂移管温度越低。半挥发性样品要求采用较低的漂移管温度,以获得比较好灵敏度。比较好温度需要通过观察各温度时的信号噪音比率来确定。步骤3:检测;悬浮于流动相蒸汽中的样品颗粒从漂移管进入到光散射检测池。在检测池中,样品颗粒散射激光光源发出的光而蒸发的流动相不散射。散射光被硅光电二极管检测。
4.2.4连接色谱柱,旋开“排气阀”,“purg”键排气至管路无气泡,点击“pump”键停止排气,“排气阀”旋紧,点击“pump”键使泵运行,点击“func”功能键由低至高设定流速。
4.2.5接通电脑和E***检测器,然后设定实验分析所需的条件(温度和气体流速)“MODE”键为仪器运行模式;“METHOD”键显示和改变仪器方法;“EVAP”键显示和改变蒸发温度(0-120℃);“NEB”键显示和改变雾化温度(0-90℃);“GAS”键显示和改变雾化气流速(0.80-3.25SLM)或者加载合适的方法;将工作模式切换为“RUN”,仪器平衡完毕后会显示“READY”。
4.3进样
4.3.1色谱柱连接到E***检测器上且系统已达到平衡。
4.3.2进样点击检测器“ZERO”键调零,工作站中“零点校正”按钮校正基线零点,再按一下查看基线。
4.3.3用试样溶液清洗注射器,并排除气泡后抽取适量即可以注入进样阀,扳下进样阀,工作站采集数据。 1260蒸发光散射检测器通过内置本地用户界面和安捷伦液相色谱化学工作站或安捷伦 EZChrom 软件即可进行操作。
优势:
1) 可检测挥发性低于流动相的任何样品;
2) 流动相低温雾化和蒸发,对热不稳定和挥发性化合物亦有较高灵敏度;
3) ***的梯度和溶剂兼容性,无溶剂峰干扰;
4) 辅助载气提高了检测灵敏度,保持检测池内的
清洁,避免污染;
5) 高精度雾化和蒸发温度控制,保证高精度检测;
6) 可与任何HPLC系统连接。
E***与几种常用的检测器之间的对比
缺点:
1.和高效液相色谱连接时需要信号转换,如:和安捷伦液相相配时需要一个数模转换器(35900E)
2.价格昂贵
3.使用不便,需要配置高压氮气或空气,且实验中产生废气有害。
1260蒸发光散射检测器具有高灵敏度、高效、高重现性的先进技术。浙江蒸发光散射检测器G4260哪里好
蒸发光散射检测器使用不便,需要配置高压氮气或空气,且实验中产生废气有害。浙江蒸发光散射检测器G4260哪里好
样品制备对照品制备:取桔梗皂苷D对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1ml含,即得。供试品制备:取本品粉末(过二号筛)约2g,精密称定,精密加入50%甲醇50ml,称定重量,超声处理(功率250W,频率40kHz)30分钟,放冷,再称定重量,用50%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液25ml,置水浴上蒸干,残渣加水20ml,微热使溶解,用水饱和的正丁醇振摇提取3次,每次20ml,合并正丁醇液,用氨试液50ml洗涤,弃去氨液,再用正丁醇饱和的水50ml洗涤,弃去水液,正丁醇液蒸干,残渣加甲醇3ml使溶解,加硅胶,置水浴上蒸干,加于硅胶柱[100~120目,10g,内径为2cm,用三氯甲烧-甲醇(9:1)混合溶液湿法装柱]上,以三氯甲烷-甲醇(9:1)混合溶液50ml洗脱,弃去洗脱液,再用三氯甲烷-甲醇-水(60:20:3)混合溶液100ml洗脱,弃去洗脱液,继用三氯甲烷-甲醇-水(60:29:6)混合溶液100ml洗脱,收集洗脱液,蒸干,残渣加甲醇溶解,转移至5ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,即得。桔梗主含皂苷类成分,易溶于不同浓度的甲醇、乙醇、水饱和的正丁醇等溶剂提取效率受到提取试剂影响较大,因此,提取过程中需关注溶剂比例及浓度。超声提取对提取效率的影响较大。 浙江蒸发光散射检测器G4260哪里好