质谱检测器(MSD)也是一种通用型检测器,在灵敏度、选择性、通用性及化合物的分子量和结构信息的提供等方面都有突出的优点。但它的昂贵操作费用和复杂性在一定程度上限制了它的推广应用。理解了这些检测器的原理可以帮助我们在实验中更好地选择和使用检测器,更高效率地完成检测任务。检测器的作用是将色谱柱流出物中样品组成和含量的变化转化为可供检测的信号,从而定性定量分析待测组分。对于大部分液相色谱操作人员来说,基本都掌握了仪器分析原理和操作方法,但对于仪器内部各部件的类型和适用条件不是非常熟悉,往往是有什么用什么,一概而定,尤其是检测器,不同的检测器其使用范围有所不同,如果不熟悉检测器而一昧按照既定的实验方法,可能会引起不必要的误差甚至是实验失败。因此需要掌握不同检测器的原理。液相色谱常用的检测器包括紫外检测器、荧光检测器、示差折光检测器、蒸发光散射检测器、化学发光检测器、质谱检测器等。 Agilent 1260 Infinity II蒸发光散射检测器G4260A G4260B。安徽品质蒸发光散射检测器G4260
RID是一种通用检测器,对所有样品都有响应。
1原理示差检测器是基于连续测定样品流路和参比流路之间折射率的变化来测定样品含量的。光从一种介质进入另一种介质时,由于两种物质的折射率不同就会产生折射。只要样品组分与流动相的折光指数不同,就可被检测,二者相差愈大,灵敏度愈高,在一定浓度范围内检测器的输出与溶质浓度成正比。
2优缺点优点是通用,没有不能检测的。
比较大缺点:灵敏度低,一般来说有关物质检测不能用它,RID一般用于含量测定;另一个缺点由它的原理决定,只能等度,所以多组分的分离存在问题。还有平衡时间过长,对环境要求高(尤其是室温的波动)也是让操作人员困扰的因素。 常见蒸发光散射检测器G4260口碑好对半挥发性物质和热敏性化合物同样具有较好的灵敏度。
样品制备对照品制备:取桔梗皂苷D对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1ml含,即得。供试品制备:取本品粉末(过二号筛)约2g,精密称定,精密加入50%甲醇50ml,称定重量,超声处理(功率250W,频率40kHz)30分钟,放冷,再称定重量,用50%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液25ml,置水浴上蒸干,残渣加水20ml,微热使溶解,用水饱和的正丁醇振摇提取3次,每次20ml,合并正丁醇液,用氨试液50ml洗涤,弃去氨液,再用正丁醇饱和的水50ml洗涤,弃去水液,正丁醇液蒸干,残渣加甲醇3ml使溶解,加硅胶,置水浴上蒸干,加于硅胶柱[100~120目,10g,内径为2cm,用三氯甲烧-甲醇(9:1)混合溶液湿法装柱]上,以三氯甲烷-甲醇(9:1)混合溶液50ml洗脱,弃去洗脱液,再用三氯甲烷-甲醇-水(60:20:3)混合溶液100ml洗脱,弃去洗脱液,继用三氯甲烷-甲醇-水(60:29:6)混合溶液100ml洗脱,收集洗脱液,蒸干,残渣加甲醇溶解,转移至5ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,即得。桔梗主含皂苷类成分,易溶于不同浓度的甲醇、乙醇、水饱和的正丁醇等溶剂提取效率受到提取试剂影响较大,因此,提取过程中需关注溶剂比例及浓度。超声提取对提取效率的影响较大。
电喷雾检测器CAD一种新型的通用检测器,赛默飞公司出品,目前处于**保护期间。灵敏度优于E***。1原理步骤一:检测器将分析物转化成溶质颗粒。颗粒的大小随着被分析物的含量而增加。步骤二:溶质颗粒与带正电荷的氮气颗粒相撞,电荷随之转移到颗粒上–溶质颗粒越大,带电越多。步骤三:溶质颗粒把它们的电荷转移给收集器,通过高灵敏度的静电检测计测出溶质颗粒的带电量,由此产生的信号电流与溶质的含量成正比。2优缺点优点同E***,但是灵敏度更高。赛默飞的宣传中将其推崇的神乎其神,但是它也有但是。缺点也同E***,线性较差,但优于E***。在全量程范围内都是非线性响应,但CAD的重现性更好且在小浓度范围内响应基本呈线性。CAD虽然将原理改为使颗粒带电检测收集的电信号,使得浓度与响应者在一定范围内直接呈线性关系。但是颗粒的形成过程是一个非物质本身属性决定的过程,也就意味着响应是不稳定的。不同于紫外检测器,紫外吸收是物质本身的属性,不会更改,拥有良好的重现性。 蒸发光散射检测器采用低温蒸发模式,维持了颗粒的均匀性。
蒸发光散射检测器(EvaporativeLight-scatteringDetector)是通用型检测器,可以检测没有紫外吸收的有机物质,如人参皂苷、黄芪甲苷等。蒸发光散射检测器(Evaporative light Scattering Detector, E***)已经开发生产数十年,但是对于许多色谱工作者来说,它仍是一个新产品。***台E***是由澳大利亚的Union Carbide研究实验室的科学家研制开发的,并在八十年代初转化为商品,八十年代以激光为光源的第二代E***面世。此后,通过不断设计提高了E***的操作性能。现在E***越来越多的作为通用型检测器用于高效液相色谱、超临界色谱(SFC)和逆流色谱中。E***比较大的优越性在于能检测不含发色团的化合物,如:碳水化合物、脂类、聚合物、未衍生脂肪酸和氨基酸、表面活性剂、药物,并在没有标准品和化合物结构参数未知的情况下检测未知化合物 。无需考虑基线漂移,基线积分非常简单,且重现性优异。新型蒸发光散射检测器G4260处理方法
独特的蒸发器设计与其专有的气流程序。安徽品质蒸发光散射检测器G4260
蒸发光散射检测器的使用与维护
蒸发光散射检测器运行流程图
1、检测器应安装在一个平稳的表面,需稳定电源,应远离气温变化大的地方,远离强磁场。
2、放置E***检测器的位置附近应有通风橱或其它通风设备(或者靠近窗户) 。
3、使用纯净,干燥的气体,比较好是氮气,输出压力稳定且可调节 (压力5bar)。
4、仪器轻拿轻放,避免不必要的搬运。
5、必须使用HPLC 级流动相溶剂 ,含有缓冲溶液的流动相必须过滤以防止基线噪声过大。
6、气体干燥剂彻底变色前就需要更新。
7、废液必须每天倾倒,废液管不能没入废液液面以下。
8、废气管末端置于通风设备内或窗外,管路整体头高尾低。
9、检测器清洁,雾化气体使用惰性气体!
10、建议正常使用期间每月一次; 安徽品质蒸发光散射检测器G4260