安捷伦高效液相色谱仪_高效液相色谱仪使用步骤一、高效液相色谱仪使用步骤常规操作(1).过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜。(2).对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。(3).打开HPLC工作站(包括计算机软件和色谱仪),连接好流动相管道,连接检测系统。(4).进入HPLC控制界面主菜单,点击manual,进入手动菜单。(5).有一段时间没用,或者换了新的流动相,需要先冲洗泵和进样阀。冲洗泵,直接在泵的出水口,用针头抽取。冲洗进样阀,需要在manual菜单下,先点击purge,再点击start,冲洗时速度不要超过10ml/min。(6).调节流量,初次使用新的流动相,可以先试一下压力,流速越大,压力越大,一般不要超过2000。点击injure,选用合适的流速,点击on,走基线,观察基线的情况。(7).设计走样方法。点击file,选取selectusersandmethods,可以选取现有的各种走样方法。若需建立一个新的方法,点击newmethod。选取需要的配件,包括进样阀,泵,检测器等,根据需要而不同。选完后,点击protocol。一个完整的走样方法需要包括:a.进样前的稳流,一般2-5分钟;b.基线归零;c.进样阀的loading-inject转换;d.走样时间,随不同的样品而不同。(8).进样和进样后操作。无脉冲、稳定而混合均匀的梯度可确保获得更高的灵敏度和更可靠的结果。重庆岛津液相色谱仪操作
在“序列”菜单中选择“序列模板另存为”,为新建序列命名。.运行序列:色谱柱安装完成后,在“仪器”菜单中选择“系统开启”或单击界面右侧绿色的“打开”快捷键,平衡色谱柱,等基线平稳,在“仪器”菜单中选择“运行序列”。停止采集数据选择“仪器”菜单中“停止运行/进样/序列”。3.数据分析方法编辑:.打开“仪器1脱机”。从“视图”菜单中,单击“数据分析”进入数据分析界面。.从“文件”菜单选择“调用信号”,选中您的数据文件,单击“确定”。.做谱图优化,从“图形”菜单中选择“信号选项”选项,根据自身需要选择合适项,如:从范围中选择自定义量程设置合适的时间范围和响应范围,或调整,反复进行,直到图的比例合适为止。.积分:从“积分”菜单中选择“积分事件”,设置合适积分参数“斜率灵敏度”,“峰宽”,“**小峰面积”,“**小峰高”等项。点击“积分”菜单中“积分”,则数据被积分。如积分结果不理想,则修改相应的积分参数,直到满意为止。单击左边“√”图标,将积分参数存入方法。.打印报告:从“报告”菜单中选择“设定报告”选项。选择需要的报告类型。从“报告”菜单中选择“打印报告”,则报告结果将被打印出来。4.关机:.关机前。重庆岛津液相色谱仪操作安捷伦液相色谱-芯片/质谱技术主要应用蛋白质组学研究和药物标靶研究等领域。
LC-P100高压恒流泵采用双柱塞并联泵结构,双泵头交替输液。在同样输液量的情况下,它的输出脉动要比串联泵低得多,而活塞杆和密封圈寿命要比常规串联泵长一倍。二、LC—UV100型紫外检测器LC-UV100紫外检测器采用了平行的双锥孔流通池,样品池和参照池完全处于对等的条件。锥孔设计的流通池,可以在同样的池体积情况下,提高通过池孔的光能量,明显降低了仪器的静态噪音和信号漂移。光路系统采用了精密定位结构,所以精度高、偏移小。氘灯座和光路系统采用热隔离安装技术,降低了仪器的稳定时间,并且使氘灯的发热对光路系统的影响降到**低。控制电路采用多微处理器结构,分别管理信号采集、数据处理、系统控制和通信。LC-UV100紫外检测器在做等度分析时,可以方便地通过全汉字的液晶屏与七个功能键,设置紫外光波长、滤波常数、输出量程、运行时间等参数。并且可以实现开关氘灯、光谱扫描、启动分析程序等功能。该仪器的另一大特点是:LC-UV100紫外检测器独特地使用了数字信号直接输出的线路结构。相比以往的紫外检测器色谱信号大多数采用模拟信号输出或者是内部数字信号处理后,再转换成模拟信号输出到色谱数据处理装置,然后再经过模数转换。
用95%水冲洗柱子和系统,流量,再用**有机溶剂冲,然后关泵,(适于反相色谱柱)。[正相色谱柱用适当的溶剂冲洗].退出化学工作站,及其它窗口,关闭计算机。.关闭全部电源,稳压器等。5.注意事项:.氘灯是易耗品,应**后开灯,不分析样品即关灯;.开机时,打开冲洗阀,**水,泵流量3ml/min,若此时显示压力>10bar,则应更换排气阀内过滤白头。.流动相使用前必须过滤,不要使用多日存放的蒸馏水(易长菌)。配制10%异丙醇,以每5分钟进行,用缓冲盐时必须开启seal-wash。提高HPLC的灵敏度……配置60mm光程安捷伦**大光强卡套式流通池后,1260Infinity二极管阵列检测器峰到峰之间的噪音水平达到了μAU/cm(ASTM)。这是对HPLC检测灵敏度的**大改进,也体现了安捷伦液相色谱仪的不断创新和对LC技术的突出贡献。其**是采用可重复使用的聚合物液相色谱芯片取代传统的液相色谱柱。
2、水相流动相需经常更换(一般不超过2天),防止长菌变质;3、使用双泵时,A、B、C、D四相中,若所用流动相中有含盐流动相,则A、D(进液口位于混合器下方)放置含盐流动相,B、C(进液口位于混合器上方)放置不含盐流动相;A、B、C、D四个储液器中其中一个为棕色瓶,用于存放水相流动相。样品:1、采用过滤或离心方法处理样品,确保样品中不含固体颗粒;2、用流动相或比流动相弱(若为反相柱,则极性比流动相大;若为正相柱,则极性比流动相小)的溶剂制备样品溶液,尽量用流动相制备样品液;手动进样时,进样量尽量小,使用定量管定量时,进样体积应为定量管的3~5倍;色谱柱:1、使用前仔细阅读色谱柱附带的说明书,注意适用范围,如pH值范围、流动相类型等;2、使用符合要求的流动相;3、使用保护柱;4、如所用流动相为含盐流动相,反相色谱柱使用后,先用水或低浓度甲醇水(如5%甲醇水溶液),再用甲醇冲洗。5、色谱柱在不使用时,应用甲醇冲洗,取下后紧密封闭两端保存;6、不要高压冲洗柱子;7、不要在高温下长时间使用硅胶键合相色谱柱。1260 Infinity 高性能自动进样器的性能指标 。天津液相色谱仪诚信推荐
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5)、使用过程中要经常观察仪器工作状态,及时正确处理各种突发事件。2、先以所用流动相冲洗系统一定时间(如所用流动相为含盐流动相,必须先用水冲洗20分钟以上再换上含盐流动相),正式进样分析**0min左右开启D灯或W灯,以延长灯的使用寿命;3、建立色谱操作方法,注意保存为自己命名的Method,勿覆盖或删除他人的方法及实验结果;4、使用手动进样器进样时,在进样前和进样后都需用洗针液洗净进样针筒,洗针液一般选择与样品液一致的溶剂,进样前必须用样品液清洗进样针筒3遍以上,并排除针筒中的气泡;5、溶剂瓶中的沙芯过滤头容易破碎,在更换流动相时注意保护,当发现过滤头变脏或长菌时,不可用超声洗涤,可用5%稀硝酸溶液浸泡后再洗涤;6、实验结束后,一般先用水或低浓度甲醇水溶液冲洗整个管路30分钟以上,再用甲醇冲洗。冲洗过程中关闭D灯、W灯;7、关机时,先关闭泵、检测器等,再关闭工作站,然后关机,**后自下而上关闭色谱仪各组件,关闭洗泵溶液的开关;8、使用者须认真履行仪器使用登记制度,不要擅自拆卸仪器。流动相:1、流动相应选用色谱纯试剂、高纯水或双蒸水,酸碱液及缓冲液需经过滤后使用,过滤时注意区分水系膜和油系膜的使用范围。重庆岛津液相色谱仪操作
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