蜂毒肽分子量小,免疫原性低,不易产生过敏反应;因其是破坏细胞膜而导致细胞的死亡,因此它不用进入细胞,在细胞外即可显示出其破坏**细胞毒性。澳大利亚联邦科学与工业研究组织(CSIRo)DERiven博士领导的分子生物学研究小组制造的以蜂毒肽为"弹头"的抗*** 。蜂***可***肝*细胞的生长、增殖,并且减少增殖细胞中和抗原附性细胞的表达,影响细胞周期的比率。
抗凝、纤溶作用:通过***凝血活酶和凝血酶原***物生成,以及***血小板的聚集,可以消除血栓形成前的状态,临床可用于***和血栓形成的防治。蜂毒肽通过破坏红细胞膜的通透性,具有直接溶血作用。
蜂毒的提取极为不易且蜜蜂的排毒量非常低。哪里收购蜂毒批发基地
王秋波等通过人工合成含特异性酶切位点的AB两条寡核苦酸片段,在Klenow酶作用下形成目的基因,用限制型内切酶HindⅢ,XmnⅠ同时酶切目的基因和表达载体Pmal-p2质粒,在T4连接酶的作用下构建两者的重组体,通过α-互补筛选出附性克隆,并通过特异性酶切和测序分析进行鉴定,获得重组蜂毒肽的原核表达克隆。
2003年,刘岭等通过MTT法对SMMC-7721、BEL-7402和Hep-3B三种肝*细胞系进行研究,考察蜂毒肽*****的量效关系,结果显示:在8~64μg/mL剂量时,蜂毒肽的抑瘤率直线上升,在体外表现***的抗瘤效果。 药厂收购蜂毒蜂毒中富含的蜂毒肽也能破坏红细胞膜的通透性。
1、蜂蜇法
活蜂蛰刺法是**常见的蛰刺方法,卓蜜蜂尾部对准穴位或痛点于皮肤接触,蜜蜂自然会弯曲尾部伸出蛰针刺入皮肤,蛰针上端的毒囊继续收缩,使蛰刺深入并自动将蜂毒注入。待蜇针不再收缩,全部蜂毒均以注入皮肤为止。一般留针时间10-20分钟。活蜂蛰刺恰好是皮内蛰刺,皮肤内分布有大量的感觉神经末梢,其触觉、痛觉敏感,活蜂蛰刺剧痛。
2、蜂针疗法
蜂针疗法是蜂蜇疗法与中国的传统针灸相结合,以蜜蜂的蜇针代替针灸中使用的钢针。方法是:按病人来诊时间,用ZW-82型子午流注计算仪求出该时辰应选的穴位或经络,然后用镊子夹蜜蜂在选定的穴位蜇刺。由于蜂针疗法对原始的蜂蜇疗法更精细,效果更好,所以蜂针疗法很快由中国传入日本、**、马来西亚等国。
1972年,Habermant报道1μmol/L的蜂毒肽就能阻止**细胞增殖但却不***正常细胞的生长与克隆率。
1983年,Vlasak等用mRNA-DNA逆转录的方法,利用质粒pBR322构建了蜂王毒腺的cDNA文库,用蜂王毒腺总mRNA制作探针从此文库中分离得到了蜂毒肽的cDNA,再进一步将其克隆到质粒pUC18上进行DNA序列分析,由DNA的序列分析结果推测出的蜂毒肽序列与实际测得的完全相同。
1996年,Arora通过对正常大鼠肝细胞与大鼠肝*细胞抗缺氧损伤能力的实验对比,证实蜂毒肽***磷脂酶A2(***2)能够解除肝*细胞对缺氧的抵抗。DUnn等将来自于鼠抗人骨髓瘤细胞和淋巴瘤细胞表面特异蛋白的抗体SCFV基因同蜂毒肽基因相融合,构建了能杀**细胞的抗***基因,大肠杆菌中融合基因并表达,精制的抗***显示了体外杀死**细胞的效能。 Kindas等从处女蜂王的毒腺中提取得到了总mRNA,发现蜂毒肽mRNA含大约400个碱基对和1个短的polyA尾。 Haase实验表明蜂毒肽可以***细胞脂酶,包括磷脂酶C(PLC)、磷脂酶D(PLD)、磷脂酶A2(***2)及甘油三酯酶等。 蜂毒中富含的蜂毒肽对产生神经兴奋的碱型受体有阻滞作用。
蜂毒肽的分子生物学机制
至今为止,对于蜂***的***及溶血机理仍然很不确定,以往研究认为,抗细菌素类是通过穿孔模型形成膜空洞机制引起***的。但深入研究发现,有些抗细菌素与细胞膜的作用方式与穿孔模型有明显
不同,后来便提出了一种新的作用模式--地毯模式。目前,抗细菌素侵膜机理占主导地位的观点仍然是穿孔模型和地毯模式机理。根据蜂***的这种侵膜机制,赵亚华等通过实验有目的地改造了蜂***的氨基酸的一级结构序列以及所要表达的蜂***基因。尽量使蜂***在与细菌细脑膜相互作用时,主要采取地毯模式侵膜而引起***,同时,由于带电荷数与分子构象的改变,**降低了它与血细胞膜两亲性作用的几率,从而达到***溶血性的目的。改造后的蜂***的溶血性与标准样品的溶血活性相比,有较大幅度降低,大约降低了14.3 倍。 蜂毒的主要成分是肽类且含量约占蜂毒干物质70~80%。哪里收购蜂毒哪家便宜
蜂毒是蜜蜂和马蜂等蜂类毒腺分泌的液体。哪里收购蜂毒批发基地
DUnn等将来自于鼠抗人骨髓瘤细胞和淋巴瘤细胞表面特异蛋白的抗体SCFV基因同蜂毒肽基因相融合,构建了能杀**细胞的抗***基因,大肠杆菌中融合基因并表达,精制的抗***显示了体外杀死**细胞的效能。 Kindas等从处女蜂王的毒腺中提取得到了总mRNA,发现蜂毒肽mRNA含大约400个碱基对和1个短的polyA尾。 Haase实验表明蜂毒肽可以***细胞脂酶,包括磷脂酶C(PLC)、磷脂酶D(PLD)、磷脂酶A2(***2)及甘油三酯酶等。
1991年,张青文开始提取了蜂王毒腺的RNA,用于棉铃虫卵中的转译,成功地合成了Promelittin,并对提取的mRNA成分进行了研究,结果发现总RNA在除去rRNA后就可得到高纯度的蜂毒肽mRNA。
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