显示胶原纤维、网状纤维和弹力纤维的三联染色法的染色步骤:
(1)中性甲醛液固定组织,石蜡切片,常规脱蜡至水。
(2)高锰酸钾硫酸液氧化3min后,自来水浸洗后,用2%草酸漂白2min.
(3)5%硫酸铁铵1min.
(4)Gomori氨性银改良液染1min.
(5)蒸馏水洗2次,用15%甲醛液还原1min.
(6)蒸馏水洗2次,氯化金30s,蒸馏水洗1次。
(7)70%乙醇浸一次,再浸入维多利亚蓝液中染30min-1h.
(8)95%乙醇分化1min左右。
(9)浸入蒸馏水中1min后,用丽春红S染色液染色2min.
(10)直接用无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。
3.结果
胶原纤维呈红色,网状纤维呈黑色,弹力纤维呈绿色,肌肉和红细胞呈淡黄色。
4.注意事项
氨性银液滴染时,要用干净吸管,防止银液污染而发生沉淀。氨性银液作用后的切片不能倾倒,应将蒸馏水冲洗切片上的银液,这样就不会使银液表面的银挥发.
颗粒而沉积在组织上。 苏丹Ⅲ染色法:将脂肪和细胞核染色,遇脂肪变橘黄色,细胞核呈蓝色。河南荧光染色质量
糖类染色:
糖类从组织化学技术角度来分,可分为多糖、中性粘液物质、酸性粘液物质、粘蛋白及粘脂质。多糖主要指糖原,它是一种胶样液态存在于肝细胞、骨骼肌、心肌等处。因糖原在肝脏及心肌疾患及某些**的病变中分布和量都有一定改变,故糖原的染色在临床病理诊断上具有重要意义。
(1)肝及心肌糖原沉着症的诊断:糖原染色显示在肝或心肌细胞内有大量糖原存在即可确诊。
(2)糖尿病性肾小球硬化症或血管病的诊断。
(3)高雪氏病与尼曼——匹克氏病的鉴别:前者为阳性、后者为阴性,做此染色较易鉴别。
(4)骨内骨外尤文氏肉瘤的诊断:此瘤80%细胞内有较多糖原,糖原染色为阳性,所以糖原染色为阳性(大多数细胞)可以协助诊断。
(5)腺泡状软组织肉瘤与化感瘤:前者棒状小体糖原染色为阳性。
(6)间皮瘤或滑膜肉瘤与其它*的鉴别:前者分泌含透明质酸的粘液,糖原染色为阳性,但透明质酸酶消化后即呈阴性反应,如有此染色特点,即可有助于诊断滑膜肉瘤或间皮瘤而不是*。 甘肃油红染色方法三氯醋酸三氯化铁法:将胆色素和其他物质染色;胆色素绿色,其他呈复染的红色和黄色。
细菌特殊染色剂配方一、芽孢染液用此配方染色是用甲液染色后,用乙液复染。
甲液:取5克孔雀绿,加入少量蒸馏水,使它溶解后,用蒸馏水稀释到100毫升,即成孔雀绿染液。
乙液:取番红花红0.5克,加入少量蒸馏水,使它溶解后,用蒸馏水稀释到100毫升,集成番红花红复染液。
配方二、荚膜染液此配方先用甲液染色,后用乙液复染。
甲液:取结晶紫0.1克,溶于少量蒸馏水后,加水稀释到100毫升,再加入0.25毫升冰醋酸一结晶紫染液。
乙液:取硫酸铜(31.3克),溶于少量蒸馏水后,加水稀释到100毫升,即成20%硫酸铜脱色剂。
配方三、鞭毛染液
甲液
饱和明矾溶液2毫升5%石炭酸溶液5毫升
20%丹宁酸溶液2毫升
乙液
碱性品红11克95%酒精100毫升
使用前取甲液9毫升和乙液1毫升相混,过滤即可。
常规HE染色步骤:
A.二甲苯(Ⅰ)15min
B.二甲苯(Ⅱ)15min
C.二甲苯:无水乙醇=1:12min
D.100%乙醇(Ⅰ)5min
E.100%乙醇(Ⅱ)5min
F.80%乙醇5min
G.蒸馏水5min
H.苏木**染色5min
I.水洗10min或流水冲洗5min
J.1%盐酸乙醇30s
K.水洗30s
L.蒸馏水过洗5s
M.0.5%伊红液染色1-3min
N.蒸馏水稍洗30s
O.80%乙醇稍洗30s
P.95%乙醇(Ⅰ)1min
Q.95%乙醇(Ⅱ)1min
R.无水乙醇(Ⅰ)3min
S.无水乙醇(Ⅱ)3min
T.二甲苯(Ⅰ)3min
U.二甲苯(Ⅱ)3min
V.中性树胶封固 Lendrum MSB法:将纤维蛋白,细胞核,红细胞多重染色;纤维蛋白红色,陈旧纤维蛋白紫色,细胞核蓝色。
四川扬克斯特为您介绍多色染色法示例:
(1)一、Mallory三色染色法(染结缔组织)
1.试剂配制
(1)重铬酸钾液
重铬酸钾2.5g;醋酸5m1,蒸馏水95ml
(2)苯胺蓝桔黄G液苯胺蓝0.5g,桔黄G2g,磷钨酸1g,蒸馏水100m1
(3)酸性复红液酸性复红0.5g,蒸馏水100ml
2.染色步骤
(1)中性甲醛液固定组织,石蜡切片,常规脱蜡至水。
(2)重铬酸钾液10mino
(3)蒸馏水冲洗2min,蒸馏水2次。
(4)酸性复红液2min,蒸馏稍洗。
(5)苯胺蓝液20min,95%乙醇快速分化。
(6)直接用无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。
3.结果
胶原和网状纤维呈蓝色,软骨、粘液、淀粉样变物质呈淡蓝色:神经胶质纤维、
肌纤维和酸性颗粒呈红色,髓鞘和红色呈桔红色。
4.注意事项
(1)酸性复红液易溶解于水,肉眼观察切片上保留一定的红色。
(2)苯胺蓝液染色后,用95%乙醇分化时,须用显微镜观察掌握。
(3)对陈旧的固定标本,其染色效果较差,可增加染色时间。
(4)另张切片,可同时作胶原纤维对照染色而进行鉴别组织成分。 罗丹明染色法:铜沉积物-砖红色,核-蓝色,胆汁-绿色。安徽HE染色结果
中文名:masson染色,释义:用两种或三种阴离子染料混合,作用:显示组织中纤维的染色方法。河南荧光染色质量
天狼星红的染色法原理是什么?
原理利用胶原分子与强酸性染料天狼星红结合一起后加强双折光现象,使不同颜色和形态的胶原纤维得以区分。
胶原纤维(collagenousfiber)在三种纤维中数量**多,新鲜时呈白色,有光泽,故又名白纤维。在HE染色切片中呈嗜酸性,粗细不等,直径0.5~10um,呈波浪形,有分支并交织呈网,胶原纤维的生化成分为I型胶原蛋白。
胶原蛋白(collagen)由纤维细胞分泌,于细胞外聚合成胶原原纤维,经少量黏合成胶原纤维。胶原纤维是三种纤维中分布*****的一种纤维,***分布于各脏器内,它在皮肤、巩膜和肌腱**为丰富。
胶原纤维在上述的两种方法中着染不同的颜色,如V.G着染红色,Masson氏着染蓝色或绿色。
这主要取决于染料对组织的渗透、吸附、沉淀和反应,而染料分子量的大小是关键,分子量小的分子移动迅速,行动快,对组织的渗透性较强,能穿透较为致密的组织。 河南荧光染色质量
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