甘肃HE染色切片

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特殊染色法为了显示与确定组织或细胞中的正常结构或病理过程中出现的异常物质、病变及病原体等，需要分别选用相应的显示这些成分的染色方法进行染色。包括：胶原纤维染色（Masson等）、网状纤维染色、弹力纤维染色、肌肉组织染色（磷钨酸苏木素）、脂肪染色（苏丹Ⅲ）、糖原染色（PAS）、粘液染色（PAS）等。

相关染液：苏丹Ⅲ、Ⅳ，甲苯胺蓝。

病理诊断：***硬化性疾病的观察。 甲苯胺蓝法：将嗜铬细胞细胞质和细胞核染色；染色结果嗜铬细胞细胞质呈绿黄色，细胞核呈蓝色。甘肃HE染色切片

天狼星红的染色法原理是什么？

原理利用胶原分子与强酸性染料天狼星红结合一起后加强双折光现象，使不同颜色和形态的胶原纤维得以区分。

胶原纤维（collagenousfiber）在三种纤维中数量**多，新鲜时呈白色，有光泽，故又名白纤维。在HE染色切片中呈嗜酸性，粗细不等，直径0.5~10um，呈波浪形，有分支并交织呈网，胶原纤维的生化成分为I型胶原蛋白。

胶原蛋白（collagen）由纤维细胞分泌，于细胞外聚合成胶原原纤维，经少量黏合成胶原纤维。胶原纤维是三种纤维中分布*****的一种纤维，***分布于各脏器内，它在皮肤、巩膜和肌腱**为丰富。

胶原纤维在上述的两种方法中着染不同的颜色，如V.G着染红色，Masson氏着染蓝色或绿色。

这主要取决于染料对组织的渗透、吸附、沉淀和反应，而染料分子量的大小是关键，分子量小的分子移动迅速，行动快，对组织的渗透性较强，能穿透较为致密的组织。 重庆masson染色试剂普鲁士蓝法 反应显示三价铁染色结果：含铁血黄素蓝色，其他浅红色。

实验室常用人工染料（6）亚甲蓝或美蓝：

亚甲蓝或美蓝是碱性染料，呈蓝色粉末状，能溶于水(溶解度9.5%)和酒精(溶解度6%)。亚甲蓝是动物学和细胞学染色上十分重要的细胞核染料，其优点是染色不会过深。

甲基绿：

甲基绿是碱性染料。它是绿色粉末状，能溶于水(溶解度8%)和酒精(溶解度3%)。甲基绿是**有价值的细胞和染色剂，细胞学上常用来染染色质，跟酸性品红一起可作植物木质部的染色。

用这些染料配备而成的染液有很多，例如：吕氏(Loeffer)碱性美蓝染液，齐氏(ziehl)石炭酸复红染液等。

    Masson染色法试剂：Regaud氏苏木精：苏木精1g，95%酒精10ml，甘油10ml，蒸馏水80ml将苏木精加入蒸馏水内加温溶解,冷却后加入酒精和甘油,放数日后即可应用Masson丽春红酸性复红液：丽春红，酸性复红，蒸馏水99ml，冰醋酸1ml：冰醋酸ml，蒸馏水100ml1%磷钼酸水溶液：磷钼酸1g，蒸馏水100ml苯胺蓝水溶液：苯胺蓝2g，蒸馏水98ml，冰醋酸2ml1%光绿水溶液：光绿1g，蒸馏水100ml步骤：1．石蜡切片脱蜡至水2．铬化处理或去汞盐沉淀（甲醛固定的组织此步可略）3．依次自来水和蒸馏水洗4．用Regaud苏木精染液或Weigert苏木**染核5-10min5．充分水洗,如过染可盐酸酒精分化6．蒸馏水洗7．用Masson丽春红酸性复红液5-10min8．2%冰醋酸水溶液浸洗片刻9．1%磷钼酸水溶液分化3-5min10．不经水洗,直接用苯胺蓝或光绿液染5min11．以12．95%酒精、无水酒精、二甲苯透明、中性树胶封固结果：胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色（如光绿液染色为绿色），胞浆、肌肉、纤维素、神经胶质呈红色，胞核黑蓝色。注意事项：1．组织固定起着很重要的作用，根据不同的固定液可延长或缩短染色时间2．磷钼酸水溶液对丽春红、酸性复红有分化作用，分化时镜下控制，肌纤维和纤维素呈红色，胶原纤维呈淡粉红色即可。 Ziehl-Neelsen抗酸杆菌染色法：抗酸杆菌红色，背景灰蓝色。

席夫(Schiff's)试剂：

称取0.5克碱性品红，加到100 毫升煮沸的蒸馏水中，再微微加热5分钟，不断搅拌，使它溶解。在溶液冷却到50摄氏度时过滤，滤液中加入10毫升1N盐酸。再冷却到25摄氏度时加入0.5克偏重(亚硫酸钠)或无(水亚硫酸氢钠)。把溶液装入棕色试剂瓶内，摇荡后，塞紧瓶塞，放在黑暗中24小时。在溶液颜色退到淡黄色时，加入0.5克活性炭，用力摇荡1分钟，过滤后把滤液贮在棕色试剂瓶内，塞紧瓶塞，滤液应该是无色的。在使用时勿让溶液长时间暴露在空气中和见光(瓶外用黑纸或暗盒遮光)。

如溶液变成红色，即失去染色能力。碱性品红是较强的核染色剂，在孚尔根氏(Feulgen's)反应中作为组织化学试剂，以检查DNA。 六胺银染色法：将***和细胞核双重染色；***均着色，菌丝和孢子呈黑褐色，细胞核红色，背景淡绿色。黑龙江流式染色试剂

高碘酸复红法：将***和红细胞双重染色；***紫红色，红细胞浅黄色。甘肃HE染色切片

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