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染色基本参数
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  • 动物
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  • 动物
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染色企业商机

天狼星红的染色法原理是什么?

原理利用胶原分子与强酸性染料天狼星红结合一起后加强双折光现象,使不同颜色和形态的胶原纤维得以区分。

胶原纤维(collagenousfiber)在三种纤维中数量**多,新鲜时呈白色,有光泽,故又名白纤维。在HE染色切片中呈嗜酸性,粗细不等,直径0.5~10um,呈波浪形,有分支并交织呈网,胶原纤维的生化成分为I型胶原蛋白。

胶原蛋白(collagen)由纤维细胞分泌,于细胞外聚合成胶原原纤维,经少量黏合成胶原纤维。胶原纤维是三种纤维中分布*****的一种纤维,***分布于各脏器内,它在皮肤、巩膜和肌腱**为丰富。

胶原纤维在上述的两种方法中着染不同的颜色,如V.G着染红色,Masson氏着染蓝色或绿色。

这主要取决于染料对组织的渗透、吸附、沉淀和反应,而染料分子量的大小是关键,分子量小的分子移动迅速,行动快,对组织的渗透性较强,能穿透较为致密的组织。 PAS染色原理:过碘酸能使细胞内多糖乙二醇基氧化成二醛,再与Schiff氏液无色品红结合呈红色定位于胞浆上。北京油红染色效果

四川扬克斯特为您介绍多色染色法示例:

(1)一、Mallory三色染色法(染结缔组织)

1.试剂配制

(1)重铬酸钾液

重铬酸钾2.5g;醋酸5m1,蒸馏水95ml

(2)苯胺蓝桔黄G液苯胺蓝0.5g,桔黄G2g,磷钨酸1g,蒸馏水100m1

(3)酸性复红液酸性复红0.5g,蒸馏水100ml

2.染色步骤

(1)中性甲醛液固定组织,石蜡切片,常规脱蜡至水。

(2)重铬酸钾液10mino

(3)蒸馏水冲洗2min,蒸馏水2次。

(4)酸性复红液2min,蒸馏稍洗。

(5)苯胺蓝液20min,95%乙醇快速分化。

(6)直接用无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。

3.结果

胶原和网状纤维呈蓝色,软骨、粘液、淀粉样变物质呈淡蓝色:神经胶质纤维、

肌纤维和酸性颗粒呈红色,髓鞘和红色呈桔红色。

4.注意事项

(1)酸性复红液易溶解于水,肉眼观察切片上保留一定的红色。

(2)苯胺蓝液染色后,用95%乙醇分化时,须用显微镜观察掌握。

(3)对陈旧的固定标本,其染色效果较差,可增加染色时间。

(4)另张切片,可同时作胶原纤维对照染色而进行鉴别组织成分。 江苏单色染色效果高碘酸无色品红法:将脂褐素染色;脂褐素呈深紫色颗粒,粘液也呈深紫色。

吸虫染色剂

梅耶氏(Mayer' s )明矾-洋红染液

取铵明矾(硫酸铝铵) 5克,溶于95毫升蒸馏水中,再加入0.5克洋红酸,加热溶解,冷却后过滤。在滤液中加入少量防腐剂,如麝香草酚、樟脑粉、水杨酸钠、苯酚(石炭酸)等,以防生霉。

这种染液适合于染小型动物材料,如吸虫等寄生虫的整体,也能染高等植物的表皮和蕨类植物的原叶体。

***染色剂

配方一、中性红染液.

先配成1%中性红水溶液(1克中性红溶于100毫升蒸馏水中)。取这种溶液1毫升,用0.6%生理盐水(或蒸馏水)稀释到50毫升,即成0.02%中性红水溶液,贮存在棕色瓶里,放在黑暗处。

本染液用来显示原生动物的食物泡以及动植物组织中活细胞的内含物等。

配方二、尼罗蓝(Nile Blue)染液

取0.1克尼罗蓝,溶解于1000~1500毫升蒸馏水中,即成尼罗蓝染液。

这种染液能把原生动物大核染成绿色,食物泡染成蓝色。

配方三、亚甲蓝染液

取0.1克亚甲蓝,溶解于1000毫升蒸馏水中,即成亚甲蓝染液。

这种染液用于原生动物的***染色。

网状纤维染色:网状纤维是非常细而短的纤维,大量堆积时则形成致密的网状,故有网状纤维之称。疏松组织中网状纤维比较少,它多分布在结缔组织与其它组织交界处,如在上皮组织与结缔组织交界处的基膜内,***周围以及造血***,内分泌腺的腺细胞团索和外分泌腺的腺末房周围等处均有丰富的网状纤维。

网状纤维的变化,反映了疾病的发生和发展的不同过程,对疾病的诊断有极大意义。网状纤维的多少、粗细紧密、疏松或断裂,都是病理检验的重要指标,尤其是在临床病理诊断中,可根据其存在和分布来鉴别*与肉瘤。所以网状纤维的组织化学染色,在临床病理诊断上占着相当重要的位置。 镀银染色:把固定后的组织或切片浸于银溶液中,再用还原剂处理,使之呈现深棕色或黑色。

实验室常用人工染料(5)中性红:

中性红是弱碱性染料,呈红色粉末状,能溶于水(溶解度4%)和酒精(溶解度1.8%)。它的碱性溶液中呈现黄色,在强碱性溶液中呈蓝色,而在弱酸性溶液中呈红色,所以能用作指示剂。中性红无毒,常做***染色的染料,用来染原生动物和显示动植物组织中活细胞的内含物等。陈久的中性红水溶液,用作显示尼尔体的常用染料。

番红:

番红是碱性染料,能溶于水和酒精。番红是细胞学和动植物组织学生常用的染料,能染细胞核、染色体和植物蛋白质,示维管束植物木质化、木栓化和角质化的组织,还能染孢子囊。 砂罗铬花青法:髓鞘呈鲜蓝色,细胞核呈深蓝色,胶原纤维呈粉红色。贵阳天狼星红染色试剂

普鲁士蓝法 反应显示三价铁染色结果:含铁血黄素蓝色,其他浅红色。北京油红染色效果

    Masson染色法试剂:Regaud氏苏木精:苏木精1g,95%酒精10ml,甘油10ml,蒸馏水80ml将苏木精加入蒸馏水内加温溶解,冷却后加入酒精和甘油,放数日后即可应用Masson丽春红酸性复红液:丽春红,酸性复红,蒸馏水99ml,冰醋酸1ml:冰醋酸ml,蒸馏水100ml1%磷钼酸水溶液:磷钼酸1g,蒸馏水100ml苯胺蓝水溶液:苯胺蓝2g,蒸馏水98ml,冰醋酸2ml1%光绿水溶液:光绿1g,蒸馏水100ml步骤:1.石蜡切片脱蜡至水2.铬化处理或去汞盐沉淀(甲醛固定的组织此步可略)3.依次自来水和蒸馏水洗4.用Regaud苏木精染液或Weigert苏木**染核5-10min5.充分水洗,如过染可盐酸酒精分化6.蒸馏水洗7.用Masson丽春红酸性复红液5-10min8.2%冰醋酸水溶液浸洗片刻9.1%磷钼酸水溶液分化3-5min10.不经水洗,直接用苯胺蓝或光绿液染5min11.以12.95%酒精、无水酒精、二甲苯透明、中性树胶封固结果:胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色(如光绿液染色为绿色),胞浆、肌肉、纤维素、神经胶质呈红色,胞核黑蓝色。注意事项:1.组织固定起着很重要的作用,根据不同的固定液可延长或缩短染色时间2.磷钼酸水溶液对丽春红、酸性复红有分化作用,分化时镜下控制,肌纤维和纤维素呈红色,胶原纤维呈淡粉红色即可。 北京油红染色效果

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