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  • 油红染色原理,染色
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染色基本参数
  • 品牌
  • 扬克斯
  • 型号
  • 适宜人群
  • 动物
  • 不适宜人群
  • 动物
  • 保质期
  • 3个月
染色企业商机

植物相关常用染色方法(2):油脂:在植物解剖学研究中,常用苏丹Ⅲ(或苏丹 IV) 溶液对脂肪性物质进行染色切片浸入上述溶液中 24h, 然后用 50% 的酒精洗涤,加上甘油后观察,油脂可被染成淡黄至红色,栓质和角质也同样被染色。如果细胞中存在硬脂或脂肪酸结晶时,染色十分缓慢,可稍加热。

单宁:单宁的化学结构比较复杂,它是一种多元酚的衍生物,大多呈胶体状态,存在于植物细胞的液泡中,或形成单独的液泡。将切片浸人 10% 的氯化铁水溶液中(或加-些碳酸钠),单宁物质则被染成蓝绿色。

橡胶:天然橡胶是异戊二烯的聚合物,植物组织中所含橡胶物质大多存在千乳汁管中,也有的存在于液泡中。对存在于乳汁管中的橡胶成分,可以用苏丹Ⅲ溶液染色材料应先用 10%铬酸 +70%酒精(使用前配制)固定 24h, 以使橡胶凝固,用刀片切去1-2mm, 而后徒手切片,于载玻片上加上苏丹Ⅲ或苏丹 Ⅳ溶液染色,乳汁管中的橡胶类物质被染成红色。 HE染色中文名:苏木精——伊红染色法,外文名:hematoxylin-eosin staining,简称:HE染色法。油红染色原理

实验室常用人工染料(6)亚甲蓝或美蓝:

亚甲蓝或美蓝是碱性染料,呈蓝色粉末状,能溶于水(溶解度9.5%)和酒精(溶解度6%)。亚甲蓝是动物学和细胞学染色上十分重要的细胞核染料,其优点是染色不会过深。

甲基绿:

甲基绿是碱性染料。它是绿色粉末状,能溶于水(溶解度8%)和酒精(溶解度3%)。甲基绿是**有价值的细胞和染色剂,细胞学上常用来染染色质,跟酸性品红一起可作植物木质部的染色。

用这些染料配备而成的染液有很多,例如:吕氏(Loeffer)碱性美蓝染液,齐氏(ziehl)石炭酸复红染液等。 甘肃流式染色效果三氯醋酸三氯化铁法:将胆色素和其他物质染色;胆色素绿色,其他呈复染的红色和黄色。

    植物细胞壁染色剂:配方一、纤维素细胞壁染液(Ⅰ)取固绿,溶于100毫升95%酒精中,即成。该液能染色纤维素细胞壁,还用于动植物中作浆质染色剂。配方二、纤维素细胞壁染液(Ⅱ)氯化锌20克碘化钾碘先把氯化锌溶于少量蒸馏水中,再加入,即成碘-氯化锌溶液。该染液能把细胞壁染成紫色,胞质染成淡黄色,胞核染成棕色。配方三、纤维素细胞壁染液(Ⅲ)甲液:取1克碘和,溶于100毫升蒸馏水中,即成1%碘液。乙液:取7份硫酸和3份蒸馏水相混,即成665%硫酸溶液。染色时,在材料上滴加甲液,再加一滴乙液,纤维素细胞壁就染成黄色。配方四、木质化细胞壁染液(Ⅰ)硫酸化苯胺(或盐酸化苯胺)1份蒸馏水70份95%酒精30份、硫酸30份将上述各组分相混,将细胞材料放入混合液里染色,可是木质化细胞壁呈鲜黄或姜黄色。配方五、木质化细胞壁染液(Ⅱ)取间**4~5克,溶于100毫升95%酒精中,即成间**-酒**。先在材料.上滴上1滴浓盐酸,然后滴上间**一酒**1滴,木质化的细胞壁就染上樱红或紫红色。配方六、木质化细胞壁染液(Ⅲ)取1克番红,溶于99毫升蒸馏水中,即成1%番红溶液。

甲苯胺蓝染色法 :1. 甲苯胺蓝液

甲苯胺蓝0.5g蒸馏水定容至100ml

2. 冰醋酸液

冰醋酸0.5ml蒸馏水定容至100ml

染色步骤:

1.组织切片常规脱蜡至水

2.入甲苯胺蓝液30min

3.稍水洗

4.入冰醋酸液分化,直到胞核和颗粒清晰。

5.稍水洗,用冷风吹干

6.二甲苯透明,中性树胶封固

(二)

①切片脱腊至水。

②蒸馏水浸洗3次。

⑤0.1%甲苯胺蓝液浸染10min。

④水洗,洗去多余染液。

⑤各级酒精脱水。

⑥二甲苯透明,中性树胶封固。

试剂的配制

称取0.1g甲苯胺蓝,溶于100ml 0.1M 醋酸盐缓冲液中,置室温5天后,即可使用染液于室温下可保存3个月,若放于4℃水箱则可保存半年左右,但该液的染色效果在早期为比较好,若染液存放时间较长,则染色偏淡,应适应延长染色时间。 维多利亚蓝法:将HBsAg阳性,细胞核双重染色;HBsAg阳性呈蓝绿色,细胞核红色。

冷冻切片HE染色步骤:(1)冰冻切片固定10~30s

(2)稍水洗1~2s

(3)苏木**染色(60℃)30~60s

(4)流水洗去苏木**5~10s

(5)1%盐酸乙醇1~3s

(6)稍水洗1~2s

(7)促蓝液返蓝5~10s

(8)流水冲洗15~30s

(9)0.5%曙红液染色30~60s

(10)蒸馏水稍洗1~2s

(11)80%乙醇1~2s

(12)95%乙醇1~2s

(13)无水乙醇1~2s

(14)石炭酸二甲苯2~3s

(15)二甲苯(Ⅰ)2~3s

(16)二甲苯(Ⅱ)2~3s

(17)中性树胶封固

注:第(14)步如果不用石炭酸二甲苯,可改用无水乙醇。

染色结果:细胞核蓝色,胞质、肌纤维、胶原纤维和红细胞呈深浅不一的红色。

注意事项:

切片脱水透明,切片经HE染色后,要彻底脱水透明,才能用中性树胶封盖。如果脱水不彻底,封片后呈白色雾状,镜下观察模糊不清,且容易褪色。切片1-2级无水乙醇脱水,也可使用石炭酸二甲苯进行脱水。石炭酸有较强脱水能力,但长时间可使切片脱色,因此要经过多次二甲苯以使石碳酸完全除去。 Lendrum MSB法:将纤维蛋白,细胞核,红细胞多重染色;纤维蛋白红色,陈旧纤维蛋白紫色,细胞核蓝色。云南番红固绿染色试剂

硝酸银染色法:将胃幽门螺杆菌染色;胃幽门螺杆菌棕黑或黑色,背景淡黄色。油红染色原理

    甲基绿派洛宁法:1、试剂配制:(1)2%甲基绿水溶液:甲基绿(methylgreen)1g蒸馏水加至50ml用三氯甲烷抽提,方法详后。(2)5%派洛宁水溶液:派洛宁G(pyronineG)1g蒸馏水加至20ml(3)醋酸盐缓冲液(pH)醋酸液41ml醋酸钠液59ml(4)甲基绿派洛宁染液:2%甲基绿水溶液(经抽提)5ml5%派洛宁水溶液1ml蒸馏水12ml醋酸盐缓冲液(pH)18ml2、操作步骤:(1)新鲜组织固定于Carnoy氏液(4℃)3~6小时,经95%酒精和无水酒精脱水,二甲苯透明,石蜡包埋。(2)切片经二甲苯脱蜡至蒸馏水。(3)置入甲基绿派洛宁染液于室温染30~60分钟。(4)取出切片,不经水洗,用滤纸吸干多余染液。(5)用**迅速分化。(6)转入**二甲苯(1:1)稍洗。(7)二甲苯透明2~3次。(8)中性树胶封固。结果:存在于胞质和核仁内的核糖核酸呈红紫色,胞核染色质内的脱氧核糖核酸绿色或绿蓝色。3、对照方法:(1)取另一连续切片用核糖核酸酶1mg/1ml于37℃温箱内消化3小时,蒸馏水洗后置入甲基绿派洛宁染液内染色。(2)切片在10%高氯酸于4℃处理12~18小时,水洗后用1%碳酸钠液中和2分钟,流水冲洗5分钟,再用蒸馏水洗后置入甲基绿派洛宁染液内染色。经上述方法之一处理后的切片就为阴性。 油红染色原理

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