河南单色染色上机

实验室常用人工染料（5）中性红：

中性红是弱碱性染料，呈红色粉末状，能溶于水(溶解度4%)和酒精(溶解度1.8%)。它的碱性溶液中呈现黄色，在强碱性溶液中呈蓝色，而在弱酸性溶液中呈红色，所以能用作指示剂。中性红无毒，常做***染色的染料，用来染原生动物和显示动植物组织中活细胞的内含物等。陈久的中性红水溶液，用作显示尼尔体的常用染料。

番红：

番红是碱性染料，能溶于水和酒精。番红是细胞学和动植物组织学生常用的染料，能染细胞核、染色体和植物蛋白质，示维管束植物木质化、木栓化和角质化的组织，还能染孢子囊。 甲基紫染色法：将淀粉样物，细胞核双重染色；淀粉样物红色或紫红色。细胞核蓝色。河南单色染色上机

实验室常用人工染料（3）苏丹II：

苏丹II是弱酸性染料，呈红色粉末状，易溶于脂肪和酒精(溶解度为0.15%)。 苏丹I是脂肪染色剂。

伊红：

这类染料种类很多。常用的伊红Y，是酸性染料，呈红色带蓝的小结晶或棕色粉末状，溶于水(15摄氏度是溶解度达44%)和酒精(溶于无水酒精的溶解度为2%)。伊红在动物制片中广泛应用，是很好的细胞质染料，常用作苏木精的衬染剂。

碱性品(复)红：

碱性品红是碱性染料,呈暗红色粉末或结晶状，能溶于水(溶解度1%)和酒精(溶解度8%)。碱性品红在生物学制片中用途很广，可用来染色胶原纤维、弹性纤维、嗜复红性颗粒和***组织的核质。在生物学制片中用来染维管束植物的木质化壁，又作为原球藻、轮藻的整体染色。在细菌学制片中，长用来鉴别结核杆菌。在尔根氏反应中用作组织化学试剂，已核查脱氧核糖核酸。 上海PAS染色上机缓冲亚甲蓝法：将尼氏体及核仁和背景双重染色；尼氏体及核仁蓝色，背景红色或粉红色。

弹力纤维染色：弹力纤维是结缔组织发生形成较晚的一种纤维，在创伤修复中一般在4—5周才有较明显的弹力纤维形成。弹力纤维艰固、较小而弹性较大，容易伸展，在结缔组织起弹性作用。弹力纤维由弹性蛋白组成，新鲜时呈黄色又称黄纤维。弹力纤维纤维分枝连成网，折光性强，含量多时在HE染片上呈折光性强的粉红色，量少的不显色。故量多时与胶原纤维不易区别，量少则不能观察。弹力纤维染色主要用于观察弹力纤维有无增生、肿胀、断裂、破碎及萎缩或缺如等病变。

细菌染色剂配方一、齐氏(Zieh1)石炭酸品红染液

甲液：取石炭酸5克,溶解在95毫升蒸馏水中。

乙液：取03克碱性品红，放入研钵中研磨，逐渐加入10毫升95%酒精，继续淹役，使它溶解。

将甲液和乙液混合后，摇匀，过滤，装瓶，备用。

配方二、罗氏(loffler's)美蓝染液

甲液：取S克美蓝，溶于100毫升95%6酒精中,制成美蓝一酒精饱和液。

乙液：取氢氧化钾0.01克(或1%氢氧化钾溶液1毫升)，溶液也可用于放线菌染色，0.1%浓度可用于酵母菌染色。

配方三、革兰氏(Gram's)染液

用此液染色因先用甲液染色，再加乙液固定，丙液处理，***用丁液复染。四种液体的配方如下：

甲液：结晶紫液

(1)结晶紫2克95%酒精20升

(2)草酸铵0.8克蒸馏水80毫升

使用前将(1)、(2)液轻摇混匀，静置48小时后使用。

乙液：碘液

碘1克碘化钾2克蒸馏水300毫升

将碘化钾溶于少量蒸馏水中，然后加入碘，待碘全部溶解后，加水稀释至300毫升。

丙液：95%酒精溶液

丁液：番红花红液

2.5%番红花红酒精溶液10毫升蒸馏水100毫升。 维多利亚蓝法：将HBsAg阳性，细胞核双重染色；HBsAg阳性呈蓝绿色，细胞核红色。

    Masson染色法试剂：Regaud氏苏木精：苏木精1g，95%酒精10ml，甘油10ml，蒸馏水80ml将苏木精加入蒸馏水内加温溶解,冷却后加入酒精和甘油,放数日后即可应用Masson丽春红酸性复红液：丽春红，酸性复红，蒸馏水99ml，冰醋酸1ml：冰醋酸ml，蒸馏水100ml1%磷钼酸水溶液：磷钼酸1g，蒸馏水100ml苯胺蓝水溶液：苯胺蓝2g，蒸馏水98ml，冰醋酸2ml1%光绿水溶液：光绿1g，蒸馏水100ml步骤：1．石蜡切片脱蜡至水2．铬化处理或去汞盐沉淀（甲醛固定的组织此步可略）3．依次自来水和蒸馏水洗4．用Regaud苏木精染液或Weigert苏木**染核5-10min5．充分水洗,如过染可盐酸酒精分化6．蒸馏水洗7．用Masson丽春红酸性复红液5-10min8．2%冰醋酸水溶液浸洗片刻9．1%磷钼酸水溶液分化3-5min10．不经水洗,直接用苯胺蓝或光绿液染5min11．以12．95%酒精、无水酒精、二甲苯透明、中性树胶封固结果：胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色（如光绿液染色为绿色），胞浆、肌肉、纤维素、神经胶质呈红色，胞核黑蓝色。注意事项：1．组织固定起着很重要的作用，根据不同的固定液可延长或缩短染色时间2．磷钼酸水溶液对丽春红、酸性复红有分化作用，分化时镜下控制，肌纤维和纤维素呈红色，胶原纤维呈淡粉红色即可。 衰老的细胞由于代谢缓慢或停止，不能使美蓝还原，所以呈蓝色或者淡蓝色。阿利新蓝染色上机

油红O脂肪法是显示组织内脂肪的染色方法，染料在脂肪内能高度溶解，可特异性的使组织内的中性脂肪着色。河南单色染色上机

HE染色原理（1）易于被碱性或酸性染料着色的性质称为嗜碱性（basophilia）和嗜酸性（acidophilia）；而对碱性染料和酸性染料亲和力都比较弱的现象称为中性（neutrophilia）。

构成组织内蛋白质的氨基酸的种类很多，它们有不同的等电点。在普通染色法中，染色液的酸碱度为ph6左右，细胞内的酸性物质如细胞核的染色质、腺细胞和神经细胞内的粗面内质网及透明软骨基质等均被碱性染料染色，这些物质称为嗜碱性。而细胞质中的其它蛋白质如红细胞中的血红蛋白、嗜酸粒细胞的颗粒及胶原纤维和肌纤维等被酸性染料染色，这些物质称为嗜酸型。如果改变染色液的酸碱度，ph值升高时，则原来被酸性染料染色的物质可变为嗜碱性；ph值降低时，原来被碱性染料染色的物质则可变为嗜酸性。所以说染色液的ph值可以影响染色的反应。河南单色染色上机

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