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染色基本参数
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  • 动物
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  • 动物
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  • 3个月
染色企业商机

番红、固绿对植物组织染色,是染色什么部位?

固绿是一种染含有浆质的纤维素细胞组织的染色剂,在染细胞和植物组织上应用极广。

番红在一些染色的实验计划表中用作复染剂,将所有的细胞核染成红色。

可溶解于水和乙醇。通常配成1%水溶液染植物的木质部,也可以按照以下配方配成苯胺番红液对组织进行块染:番红5g,95%乙醇50mL,苯胺20mL,蒸馏水450mL。

番红能够对植物的木质化、栓质化和角质化部分进行染色,对细胞核中染色质、染色体和花粉外壁等都可染成鲜艳的红色。染色时间一般为2~24h,常与固绿等进行合作染色。 PAS染色原理:过碘酸能使细胞内多糖乙二醇基氧化成二醛,再与Schiff氏液无色品红结合呈红色定位于胞浆上。吉林masson染色效果

常规HE染色步骤:

A.二甲苯(Ⅰ)15min

B.二甲苯(Ⅱ)15min

C.二甲苯:无水乙醇=1:12min

D.100%乙醇(Ⅰ)5min

E.100%乙醇(Ⅱ)5min

F.80%乙醇5min

G.蒸馏水5min

H.苏木**染色5min

I.水洗10min或流水冲洗5min

J.1%盐酸乙醇30s

K.水洗30s

L.蒸馏水过洗5s

M.0.5%伊红液染色1-3min

N.蒸馏水稍洗30s

O.80%乙醇稍洗30s

P.95%乙醇(Ⅰ)1min

Q.95%乙醇(Ⅱ)1min

R.无水乙醇(Ⅰ)3min

S.无水乙醇(Ⅱ)3min

T.二甲苯(Ⅰ)3min

U.二甲苯(Ⅱ)3min

V.中性树胶封固 湖南甲苯胺蓝染色评价高碘酸无色品红法:将脂褐素染色;脂褐素呈深紫色颗粒,粘液也呈深紫色。

HE染色原理(2)脱氧核糖核酸(DNA)两条链上的磷酸基向外,带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。伊红Y是一种化学合成的酸性染料,在水中离解成带负电荷的阴离子,与蛋白质的氨基正电荷的阳离子结合使胞浆染色,细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织、嗜伊红颗粒等被染成不同程度的红色或粉红色,与蓝色的细胞核形成鲜明对比。伊红是细胞浆的良好染料。

由于组织或细胞的不同成分对苏木精的亲和力不同及染色性质不一样。经苏木精染色后,细胞核及钙盐粘液等呈蓝色,可用盐酸酒精分化和弱碱性溶液显蓝,如处理适宜,可使细胞核着清楚的深蓝色,胞浆等其它成分脱色。再利用胞浆染料伊红染胞浆,使胞浆的各种不同成分又呈现出深浅不同的粉红色。故各种组织或细胞成分与病变的一般形态结构特点均可显示出来。

    植物细胞壁染色剂:配方一、纤维素细胞壁染液(Ⅰ)取固绿,溶于100毫升95%酒精中,即成。该液能染色纤维素细胞壁,还用于动植物中作浆质染色剂。配方二、纤维素细胞壁染液(Ⅱ)氯化锌20克碘化钾碘先把氯化锌溶于少量蒸馏水中,再加入,即成碘-氯化锌溶液。该染液能把细胞壁染成紫色,胞质染成淡黄色,胞核染成棕色。配方三、纤维素细胞壁染液(Ⅲ)甲液:取1克碘和,溶于100毫升蒸馏水中,即成1%碘液。乙液:取7份硫酸和3份蒸馏水相混,即成665%硫酸溶液。染色时,在材料上滴加甲液,再加一滴乙液,纤维素细胞壁就染成黄色。配方四、木质化细胞壁染液(Ⅰ)硫酸化苯胺(或盐酸化苯胺)1份蒸馏水70份95%酒精30份、硫酸30份将上述各组分相混,将细胞材料放入混合液里染色,可是木质化细胞壁呈鲜黄或姜黄色。配方五、木质化细胞壁染液(Ⅱ)取间**4~5克,溶于100毫升95%酒精中,即成间**-酒**。先在材料.上滴上1滴浓盐酸,然后滴上间**一酒**1滴,木质化的细胞壁就染上樱红或紫红色。配方六、木质化细胞壁染液(Ⅲ)取1克番红,溶于99毫升蒸馏水中,即成1%番红溶液。 油红O脂肪法是显示组织内脂肪的染色方法,染料在脂肪内能高度溶解,可特异性的使组织内的中性脂肪着色。

HE染色原理(1)易于被碱性或酸性染料着色的性质称为嗜碱性(basophilia)和嗜酸性(acidophilia);而对碱性染料和酸性染料亲和力都比较弱的现象称为中性(neutrophilia)。

构成组织内蛋白质的氨基酸的种类很多,它们有不同的等电点。在普通染色法中,染色液的酸碱度为ph6左右,细胞内的酸性物质如细胞核的染色质、腺细胞和神经细胞内的粗面内质网及透明软骨基质等均被碱性染料染色,这些物质称为嗜碱性。而细胞质中的其它蛋白质如红细胞中的血红蛋白、嗜酸粒细胞的颗粒及胶原纤维和肌纤维等被酸性染料染色,这些物质称为嗜酸型。如果改变染色液的酸碱度,ph值升高时,则原来被酸性染料染色的物质可变为嗜碱性;ph值降低时,原来被碱性染料染色的物质则可变为嗜酸性。所以说染色液的ph值可以影响染色的反应。HE染色中文名:苏木精——伊红染色法,外文名:hematoxylin-eosin staining,简称:HE染色法。吉林阿利新蓝染色上机

罗丹明染色法:铜沉积物-砖红色,核-蓝色,胆汁-绿色。吉林masson染色效果

席夫(Schiff's)试剂:

称取0.5克碱性品红,加到100 毫升煮沸的蒸馏水中,再微微加热5分钟,不断搅拌,使它溶解。在溶液冷却到50摄氏度时过滤,滤液中加入10毫升1N盐酸。再冷却到25摄氏度时加入0.5克偏重(亚硫酸钠)或无(水亚硫酸氢钠)。把溶液装入棕色试剂瓶内,摇荡后,塞紧瓶塞,放在黑暗中24小时。在溶液颜色退到淡黄色时,加入0.5克活性炭,用力摇荡1分钟,过滤后把滤液贮在棕色试剂瓶内,塞紧瓶塞,滤液应该是无色的。在使用时勿让溶液长时间暴露在空气中和见光(瓶外用黑纸或暗盒遮光)。

如溶液变成红色,即失去染色能力。碱性品红是较强的核染色剂,在孚尔根氏(Feulgen's)反应中作为组织化学试剂,以检查DNA。 吉林masson染色效果

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