植物相关常用染色方法(1):(1)淀粉类:淀粉是植物的主要贮藏物质,它们在各种不同的植物细胞中形成各种形状小同的颗粒。由于碘与淀粉作用可形成碘化淀粉而呈蓝色反应,用碘-碘化钾溶液来测试淀粉粒已成为**常用的方法。
(2)蛋白质类:植物细胞中的蛋白质是构成原生质体的主要成分,也可成为后含物贮存于细胞内,可能是无定形的,也可能成为结晶体或成为糊粉粒。
①较普遍的方法是用碘化钾染色,显微镜下观察可看到被染成黄色的圆球状小颗粒,即为储藏蛋白质的糊粉粒。
②**-溴酚蓝法是检测糊粉粒的**普通方法:在切片上滴加**-溴酚蓝试剂(**10g,溴酚蓝1mg,蒸馏水100ml)1滴,过5分钟后,用0.5%的醋酸冲洗,除去切片上多余的染料,再放在培养皿中水洗5分后用甘油封藏,细胞中如有糊粉粒则被染成鲜蓝色。
③曙红-酒精-苦味酸法也是显示糊粉粒的较好方法:在切片上滴上曙红-酒精-苦味酸试剂(配方曙红1g,溶于苦味酸的95%酒精饱和溶液50ml),镜检,当糊粉粒的基质现出蓝色时,加上数滴纯酒精,此时糊粉粒中球蛋白无色而结晶现出黄绿色,吸去多余酒精,用丁香油透明,加拿大树胶封固,**终蛋白质结晶应为黄色,球蛋白为粉红色,基质为暗红色。 漂白法:将黑色素及嗜银细胞,胶原纤维双重染色;黑色素及嗜银细胞颗粒黑色,胶原纤维红色,背景淡黄。山东荧光染色步骤
网状纤维染色的应用:(1)*与肉瘤的鉴别:在网状纤维染色下可清楚显示出肉瘤每一个细胞周围有网状纤维围绕,或似为团状或巢状的瘤组织,但团巢内仍有破碎的网状纤维,*显示为明显巢或索状,巢内无网状纤维。
(2)骨基质与浓缩的分泌物、血浆或水肿液的鉴别:骨基质内有网状纤维,而后者无。
(3)炎症细胞与*细胞的鉴别:在支气管活检中有时挤压较重,一些深染的细胞挤压成团,难以判断是受挤压的炎症细胞。这种病例染网状纤维有利于鉴别,炎症细胞不成巢,小细胞*可有巢状或索状结构。 河南HE染色方法Gram碱性复红结晶紫法将革兰氏阴性菌,革兰氏阳性菌双重染色;革兰阳性细菌蓝色,阴性红色,细胞核红色。
四川扬克斯特科技为您介绍HE染色法:苏木精—伊红染色法(hematoxylin-eosinstaining),简称HE染色法,石蜡切片技术里常用的染色法之一。苏木精染液为碱性,伊红为酸性染料。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中**基本、使用*****的技术方法。
相关染液:苏木素,伊红
常用测量:面积测量,肠绒毛测量
病理诊断:病理描述,病理评分
染色效果:主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色,细胞质和细胞外基质中的成分着红色。
色素染色(含铁血黄素及黑色素):
含铁血黄素是由漏出于血管外的红细胞,被巨噬细胞吞噬后,分解血红蛋白产生的颗粒,HE染色为棕黄色,故称为含铁血黄素。因有时与福尔马林沉渣及黑色素等难相区别,故做含铁血黄素染色。
应用:
主要用于同其它色素鉴别,若为阳性,显示陈旧性出血。黑色素常见于皮肤色素细胞,恶性黑色素瘤常可产生黑色素。组织内大量存在时呈棕黑色,易于鉴别。但少量存在时便难与其它色素相鉴别,须作黑色素染色。
黑色素瘤的诊断与鉴别诊断:**细胞内色素是否为黑色素,染黑色素有助于确定黑色素性质及**的定性诊断。
血色病与黑便病:皮革内有色素沉着,黑色素阴性而含铁血黄素阳性者可能为前者。 高碘酸复红法:将***和红细胞双重染色;***紫红色,红细胞浅黄色。
神经原纤维呈细线状,存在于神经细胞体及树突中,它们形成一个稠密的网状,轴突中的原纤维也互相交织在一起,且伸延至轴突全长。在HE染色中呈粉红色,难与胶原纤维相区别,故须作神经纤维染色。
应用:
(1)有利于观察神经原纤维的损伤。
(2)神经系统**的鉴别与诊断:如神经母细胞瘤与未分化*的区别等。
细胞质染色剂配方一、伊红染液:伊红染液一般配用水溶液和酒精溶液两种。
(1)取1g伊红,溶于99毫升蒸馏水中,即成1%伊红水溶液(市售红墨水内含伊红成分,可以用红墨水稀释液来代替本溶液)。
(2)取1g伊红,溶于99毫升70%酒精中,即成1%伊红-酒精溶液。
配方二、甲基蓝染液
取1g甲基蓝,溶于29毫升70%酒精中,加入70毫升蒸馏水,即成1%甲基蓝染液。
配方三、亮绿染液
取0.5克亮绿,溶解在100毫升蒸馏水中,即成0.5%亮绿溶液。 砂罗铬花青法:髓鞘呈鲜蓝色,细胞核呈深蓝色,胶原纤维呈粉红色。北京荧光染色效果
因脂肪溶于酒精,故在HE染色中则被溶解掉,因此对某些疾病不能判断,所以必须进行脂肪染色。山东荧光染色步骤
在切片染色到封片之前的过程中,乙醇是一个特别常用的脱水脱二甲苯的试剂。在二甲苯中脱蜡不完全的切片组织进入到乙醇中能看到明显的蜡渣沉积会对试剂造成污染,也会影响***制成切片的效果,在操作过程中要特别注意。
二甲苯可以洗去切片组织上的蜡,蜡块是将组织包块后进行切片的必要物质;二甲苯也作为切片染色流程全部完成后,帮助透明让染色图像更加清晰的试剂。
染液的作用:让切片充分的着色,不同的染色方法所使用到的染液和染色时间也各不相同,一般按照自己对实验目的的需要来选用比较好的染色方法或多重染色方法。 山东荧光染色步骤
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