常规HE染色步骤:
A.二甲苯（Ⅰ）15min
B.二甲苯（Ⅱ）15min
C.二甲苯：无水乙醇=1:12min
D.100%乙醇（Ⅰ）5min
E.100%乙醇（Ⅱ）5min
F.80%乙醇5min
G.蒸馏水5min
H.苏木**染色5min
I.水洗10min或流水冲洗5min
J.1%盐酸乙醇30s
K.水洗30s
L.蒸馏水过洗5s
M.0.5%伊红液染色1-3min
N.蒸馏水稍洗30s
O.80%乙醇稍洗30s
P.95%乙醇（Ⅰ）1min
Q.95%乙醇（Ⅱ）1min
R.无水乙醇（Ⅰ）3min
S.无水乙醇（Ⅱ）3min
T.二甲苯（Ⅰ）3min
U.二甲苯（Ⅱ）3min
V.中性树胶封固 Lendrum MSB法：将纤维蛋白，细胞核，红细胞多重染色；纤维蛋白红色，陈旧纤维蛋白紫色，细胞核蓝色。浙江荧光染色评价
四川扬克斯特为您介绍多色染色法示例：
（1）一、Mallory三色染色法（染结缔组织）
1.试剂配制
(1)重铬酸钾液
重铬酸钾2.5g;醋酸5m1，蒸馏水95ml
(2)苯胺蓝桔黄G液苯胺蓝0.5g，桔黄G2g，磷钨酸1g，蒸馏水100m1
(3)酸性复红液酸性复红0.5g，蒸馏水100ml
2.染色步骤
(1)中性甲醛液固定组织，石蜡切片，常规脱蜡至水。
(2)重铬酸钾液10mino
(3)蒸馏水冲洗2min，蒸馏水2次。
(4)酸性复红液2min,蒸馏稍洗。
(5)苯胺蓝液20min,95%乙醇快速分化。
(6)直接用无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。
3.结果
胶原和网状纤维呈蓝色，软骨、粘液、淀粉样变物质呈淡蓝色:神经胶质纤维、
肌纤维和酸性颗粒呈红色，髓鞘和红色呈桔红色。
4.注意事项
(1)酸性复红液易溶解于水，肉眼观察切片上保留一定的红色。
(2)苯胺蓝液染色后，用95%乙醇分化时，须用显微镜观察掌握。
(3)对陈旧的固定标本，其染色效果较差，可增加染色时间。
(4)另张切片，可同时作胶原纤维对照染色而进行鉴别组织成分。 山西单色染色质量缓冲亚甲蓝法：将尼氏体及核仁和背景双重染色；尼氏体及核仁蓝色，背景红色或粉红色。
粘液染色：
粘液从组织源上分上皮细胞分泌性及结缔组织粘液性两种。粘液染色能有助于某些疾病的诊断。
应用：
（1）水肿与粘液变性：皮肤皮革水肿与粘液变性有时较难以从组织学上区别，染粘液有助于鉴别。
（2）硬皮病与硬肿病的鉴别：后者胶原纤维增生，纤维之间粘液阳性物质增多，有助于这两者之间的鉴别。
（3）粘液细胞*的诊断与鉴别：胃活检时，印戒细胞与黄瘤细胞或泡沫细胞不易鉴别，染粘液即可确定是否为印戒细胞。
（4）胃*分型：有人将胃*分为肠型及胃型，这种分型与流行病、年龄及预后有一定关系，利用AB/PBS染色，胃*细胞分泌中性粘液为胃型，分泌酸性粘液为肠型。
HE染色的试剂与仪器A：0.5~1%的伊红酒精溶液：
称取伊红Y0.5~1g，加少量蒸馏水溶解后，再滴加冰醋酸直至浆糊状。以滤纸过滤，将滤渣在烘箱中烤干后，以95%酒精（即工业酒精，如果不怕浪费，用无水乙醇配制也可）100毫升溶解。
B：苏木素染液配方：(配制3000ml，可按比列减少)
苏木精6g
无水乙醇100ml
硫酸铝钾150g
蒸馏水2000ml
碘酸钠1.2g
冰醋酸120ml
甘油900ml
配制方法：将苏木素溶于无水乙醇，再将硫酸铝钾溶于蒸馏水，溶解后将甘油倾入一起混合，***加入冰醋酸和碘酸钠。
C：1%盐酸酒精分化液：将1毫升浓盐酸加入99毫升70%酒精中即可。 油红O脂肪法是显示组织内脂肪的染色方法，染料在脂肪内能高度溶解，可特异性的使组织内的中性脂肪着色。
HE染色结果的判断细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色，软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色，粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色，胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色，弹力纤维呈亮粉红色，红血球呈橘红色，蛋白性液体呈粉红色。
着***况与组织或细胞的种类有关，也随其生活周期及病理变化而改变。例如，细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱，当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时，伊红着色由浅变深。
HE染色评定标准：
（1）切片完整，厚度4-6微米，厚薄均匀，无皱褶无刀痕；
（2）染色核浆分明，红蓝适度，透明洁净，封裱美观。 罗丹明染色法：铜沉积物-砖红色，核-蓝色，胆汁-绿色。浙江番红固绿染色原理
高碘酸复红法：将***和红细胞双重染色；***紫红色，红细胞浅黄色。浙江荧光染色评价
弹力纤维染色：弹力纤维是结缔组织发生形成较晚的一种纤维，在创伤修复中一般在4—5周才有较明显的弹力纤维形成。弹力纤维艰固、较小而弹性较大，容易伸展，在结缔组织起弹性作用。弹力纤维由弹性蛋白组成，新鲜时呈黄色又称黄纤维。弹力纤维纤维分枝连成网，折光性强，含量多时在HE染片上呈折光性强的粉红色，量少的不显色。故量多时与胶原纤维不易区别，量少则不能观察。弹力纤维染色主要用于观察弹力纤维有无增生、肿胀、断裂、破碎及萎缩或缺如等病变。浙江荧光染色评价
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