辽宁单色染色切片

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特殊染色法为了显示与确定组织或细胞中的正常结构或病理过程中出现的异常物质、病变及病原体等，需要分别选用相应的显示这些成分的染色方法进行染色。包括：胶原纤维染色（Masson等）、网状纤维染色、弹力纤维染色、肌肉组织染色（磷钨酸苏木素）、脂肪染色（苏丹Ⅲ）、糖原染色（PAS）、粘液染色（PAS）等。

相关染液：苏丹Ⅲ、Ⅳ，甲苯胺蓝。

病理诊断：***硬化性疾病的观察。 硝酸银法是一种金属置换法，将钙盐中的钙用银所置换，银盐在光作用下还原为黑色金属银；将钙盐染为黑色。辽宁单色染色切片

油红染色法油红作为脂肪染色剂，其染色步骤简便，染色结果肯定，脂肪染色切片效果优于苏丹IV。

试剂配制：

油红O：0.5g

异丙醇(含量98%)：100ml

此为油红饱和液，可长期保存备用。

染色步骤：

(1)冻切片

(2)蒸馏水充分洗涤。

(3)油红稀释液染10-15分钟，避光、密封。油红稀释液的配制：

(4)取油红饱和液6毫升，加蒸馏水4毫升，静置5-10分钟后过滤后使用。

(5)60%乙醇镜下分化至间质清晰。

(6)水洗

(7)Marry氏苏木素复染核。

(8)水洗

(9)甘油或甘油明胶封片。

结果：脂肪呈鲜红色，细胞核呈蓝色，间质无色。 吉林双色染色切片Gram碱性复红结晶紫法将革兰氏阴性菌，革兰氏阳性菌双重染色；革兰阳性细菌蓝色，阴性红色，细胞核红色。

席夫(Schiff's)试剂：

称取0.5克碱性品红，加到100 毫升煮沸的蒸馏水中，再微微加热5分钟，不断搅拌，使它溶解。在溶液冷却到50摄氏度时过滤，滤液中加入10毫升1N盐酸。再冷却到25摄氏度时加入0.5克偏重(亚硫酸钠)或无(水亚硫酸氢钠)。把溶液装入棕色试剂瓶内，摇荡后，塞紧瓶塞，放在黑暗中24小时。在溶液颜色退到淡黄色时，加入0.5克活性炭，用力摇荡1分钟，过滤后把滤液贮在棕色试剂瓶内，塞紧瓶塞，滤液应该是无色的。在使用时勿让溶液长时间暴露在空气中和见光(瓶外用黑纸或暗盒遮光)。

如溶液变成红色，即失去染色能力。碱性品红是较强的核染色剂，在孚尔根氏(Feulgen's)反应中作为组织化学试剂，以检查DNA。

实验室常用人工染料：（1）人工染料：即苯胺染料或煤焦油染料，种类很多，应用极广。它们的缺点是经日光照射容易褪色，苯胺蓝、亮绿、甲基绿等更易褪色。在制片中注意掌握酸碱度，并避免日光直射，也能经几年不褪色。

1、酸性品红

酸性品红是酸性染料，呈红色粉末状，能容于水，略溶于酒精(0.3%)。 他是良好的细胞制染色剂，在动物制片上应用很广，在植物制片上用来染皮层、髓部等薄壁细胞和纤维素壁。他跟甲基绿同染，能显示线粒体。

组织切片在染色前先浸在带酸性的水中，可增强它的染色力。酸性品红容易跟碱起作用，所以染色过度，易在自来水中褪色。

2、刚果红

刚果红是酸性染料，呈枣红色粉末状，能溶于水喝酒精，遇酸呈蓝色。他能作染料，也用作指示剂。他在植物制片中常作为苏木精或其他细胞染料的衬垫剂。他用来染细胞质时，能把胶制或纤维素染成红色。在动物组织制片中用来染神经轴、弹性纤维、胚胎材料等。刚果红可以跟苏木静作二重染色，也可用作类淀粉染色，由于他能溶于水和酒精，所以洗涤和脱水处理要迅速。 砂罗铬花青法：髓鞘呈鲜蓝色，细胞核呈深蓝色，胶原纤维呈粉红色。

（1）*与肉瘤的鉴别：在网状纤维染色下可清楚显示出肉瘤每一个细胞周围有网状纤维围绕，或似为团状或巢状的瘤组织，但团巢内仍有破碎的网状纤维，*显示为明显巢或索状，巢内无网状纤维。

（2）骨基质与浓缩的分泌物、血浆或水肿液的鉴别：骨基质内有网状纤维，而后者无。

（3）炎症细胞与*细胞的鉴别：在支气管活检中有时挤压较重，一些深染的细胞挤压成团，难以判断是受挤压的炎症细胞。这种病例染网状纤维有利于鉴别，炎症细胞不成巢，小细胞*可有巢状或索状结构。 苏丹Ⅲ染色法：将脂肪和细胞核染色，遇脂肪变橘黄色，细胞核呈蓝色。山西阿利新蓝染色切片

衰老的细胞由于代谢缓慢或停止，不能使美蓝还原，所以呈蓝色或者淡蓝色。辽宁单色染色切片

细菌染色剂配方一、齐氏(Zieh1)石炭酸品红染液

甲液：取石炭酸5克,溶解在95毫升蒸馏水中。

乙液：取03克碱性品红，放入研钵中研磨，逐渐加入10毫升95%酒精，继续淹役，使它溶解。

将甲液和乙液混合后，摇匀，过滤，装瓶，备用。

配方二、罗氏(loffler's)美蓝染液

甲液：取S克美蓝，溶于100毫升95%6酒精中,制成美蓝一酒精饱和液。

乙液：取氢氧化钾0.01克(或1%氢氧化钾溶液1毫升)，溶液也可用于放线菌染色，0.1%浓度可用于酵母菌染色。

配方三、革兰氏(Gram's)染液

用此液染色因先用甲液染色，再加乙液固定，丙液处理，***用丁液复染。四种液体的配方如下：

甲液：结晶紫液

(1)结晶紫2克95%酒精20升

(2)草酸铵0.8克蒸馏水80毫升

使用前将(1)、(2)液轻摇混匀，静置48小时后使用。

乙液：碘液

碘1克碘化钾2克蒸馏水300毫升

将碘化钾溶于少量蒸馏水中，然后加入碘，待碘全部溶解后，加水稀释至300毫升。

丙液：95%酒精溶液

丁液：番红花红液

2.5%番红花红酒精溶液10毫升蒸馏水100毫升。 辽宁单色染色切片

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