(1)*与肉瘤的鉴别:在网状纤维染色下可清楚显示出肉瘤每一个细胞周围有网状纤维围绕,或似为团状或巢状的瘤组织,但团巢内仍有破碎的网状纤维,*显示为明显巢或索状,巢内无网状纤维。
(2)骨基质与浓缩的分泌物、血浆或水肿液的鉴别:骨基质内有网状纤维,而后者无。
(3)炎症细胞与*细胞的鉴别:在支气管活检中有时挤压较重,一些深染的细胞挤压成团,难以判断是受挤压的炎症细胞。这种病例染网状纤维有利于鉴别,炎症细胞不成巢,小细胞*可有巢状或索状结构。 切片中,载玻片是用来放被测标本的,而盖玻片是盖在被测标本之上的。四川PAS染色原理
线粒体染色剂:
配方一、詹钠斯绿B(Janu’s green酒精饱和溶液)
取125毫升詹钠斯绿B,加入到625毫升无水酒精中,搅拌,即成烟鲁绿B酒精饱和染液。
(1)取詹钠斯绿酒精饱和染液按1: 30000比例加蒸馏水稀释,用来染原生动物线粒体。
(2)取詹钠斯绿酒精饱和液,按1: 1000比例加蒸馏水稀释,用来染新鲜蛙血线粒体。
配方二、詹钠斯绿B中性红染液
先配制詹钠斯绿B和中性红酒精包和液。詹钠斯绿酒精饱和液见配方一。中性红酒精饱和液配制方法:
取125毫升中性红,加入到50毫升无水酒精中,搅拌。
在10毫升生理盐水(两栖类生理盐水浓度为0.65%;哺乳类生理盐水浓度为0.9%)中,加入詹钠斯绿B酒精饱和液0.7~1毫升,中性红酒精饱和液2毫升,混合。詹钠斯绿B稀释液是***染液。 黑龙江PAS染色试剂砂罗铬花青法:髓鞘呈鲜蓝色,细胞核呈深蓝色,胶原纤维呈粉红色。
实验室常用人工染料(2)甲基蓝:
甲基蓝是弱酸性染料,能溶于水和酒精。甲基蓝在动植物的制片技术方面应用极广。他跟伊红合用能染神经细胞,也是细菌制片中不可缺少的染料。它的水溶液是原生动物的***染色剂。甲基蓝极易氧化,因此用他染色后不能长久保存。
固绿:
固绿是酸性染料,能溶于水(溶解度为4%)和酒精(海解度为90)0图绿是“种染合有势质的纤维素细胞组织的染色剂,四轻奥物租和植租物组织应用极广。他和苏木精、看红并列为植物组织学上三中**常用的染料。
番红染液的运用特点:
番红通常具有红色成团的化学成像结构(有时被描述为二甲基番红)。同时也有三甲基番红,其在下环的邻位有多加一个甲基。这两个化合物在生物染色应用的表现基本上是相同的,所以大部分番红的制造商并无法区分这两者。商业用番红的配制经常会包含这两种类型的混合。
番红也在分析化学中被用作氧化还原指示剂。
番红是个在一分子中含有两个氮原子的化合物,其为对称的2,8-二甲基-3,7-二氨基吩嗪。可以借由连接一分子氧化的对位-二氨和两分子的一级氨取得。
这是透过对位-氨基偶氮与一级氨的浓缩以及对位-亚硝基二烷基苯胺和二级碱基,例如二苯基间苯二胺,之间的反应。它们为呈现出特有绿色金属光泽的结晶固体;在水中立即被溶解并能染成蓝色或紫色。
同时也是可形成稳定的一元酸盐类的强碱。它们的酒精溶液会显现出红黄色的萤光。酚藏红在自由态时十分不稳定;它的氯化物会形成绿色的板块。其很容易就重氮化,而重氮化的盐类与酒精煮沸后会产生阿朴藏红或引杜林染料,C18H12N3。 缓冲亚甲蓝法:将尼氏体及核仁和背景双重染色;尼氏体及核仁蓝色,背景红色或粉红色。
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特殊染色法为了显示与确定组织或细胞中的正常结构或病理过程中出现的异常物质、病变及病原体等,需要分别选用相应的显示这些成分的染色方法进行染色。包括:胶原纤维染色(Masson等)、网状纤维染色、弹力纤维染色、肌肉组织染色(磷钨酸苏木素)、脂肪染色(苏丹Ⅲ)、糖原染色(PAS)、粘液染色(PAS)等。
相关染液:苏丹Ⅲ、Ⅳ,甲苯胺蓝。
病理诊断:***硬化性疾病的观察。 硝酸银染色法:将胃幽门螺杆菌染色;胃幽门螺杆菌棕黑或黑色,背景淡黄色。重庆双色染色效果
Gram甲紫染色法:将纤维蛋白染色;纤维蛋白蓝黑色;背景红色。四川PAS染色原理
常规HE染色步骤:
A.二甲苯(Ⅰ)15min
B.二甲苯(Ⅱ)15min
C.二甲苯:无水乙醇=1:12min
D.100%乙醇(Ⅰ)5min
E.100%乙醇(Ⅱ)5min
F.80%乙醇5min
G.蒸馏水5min
H.苏木**染色5min
I.水洗10min或流水冲洗5min
J.1%盐酸乙醇30s
K.水洗30s
L.蒸馏水过洗5s
M.0.5%伊红液染色1-3min
N.蒸馏水稍洗30s
O.80%乙醇稍洗30s
P.95%乙醇(Ⅰ)1min
Q.95%乙醇(Ⅱ)1min
R.无水乙醇(Ⅰ)3min
S.无水乙醇(Ⅱ)3min
T.二甲苯(Ⅰ)3min
U.二甲苯(Ⅱ)3min
V.中性树胶封固 四川PAS染色原理
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