植物细胞壁染色剂:配方一、纤维素细胞壁染液(Ⅰ)取固绿,溶于100毫升95%酒精中,即成。该液能染色纤维素细胞壁,还用于动植物中作浆质染色剂。配方二、纤维素细胞壁染液(Ⅱ)氯化锌20克碘化钾碘先把氯化锌溶于少量蒸馏水中,再加入,即成碘-氯化锌溶液。该染液能把细胞壁染成紫色,胞质染成淡黄色,胞核染成棕色。配方三、纤维素细胞壁染液(Ⅲ)甲液:取1克碘和,溶于100毫升蒸馏水中,即成1%碘液。乙液:取7份硫酸和3份蒸馏水相混,即成665%硫酸溶液。染色时,在材料上滴加甲液,再加一滴乙液,纤维素细胞壁就染成黄色。配方四、木质化细胞壁染液(Ⅰ)硫酸化苯胺(或盐酸化苯胺)1份蒸馏水70份95%酒精30份、硫酸30份将上述各组分相混,将细胞材料放入混合液里染色,可是木质化细胞壁呈鲜黄或姜黄色。配方五、木质化细胞壁染液(Ⅱ)取间**4~5克,溶于100毫升95%酒精中,即成间**-酒**。先在材料.上滴上1滴浓盐酸,然后滴上间**一酒**1滴,木质化的细胞壁就染上樱红或紫红色。配方六、木质化细胞壁染液(Ⅲ)取1克番红,溶于99毫升蒸馏水中,即成1%番红溶液。 缓冲亚甲蓝法:将尼氏体及核仁和背景双重染色;尼氏体及核仁蓝色,背景红色或粉红色。上海流式染色评价
显示胶原纤维、网状纤维和弹力纤维的三联染色法的染色步骤:
(1)中性甲醛液固定组织,石蜡切片,常规脱蜡至水。
(2)高锰酸钾硫酸液氧化3min后,自来水浸洗后,用2%草酸漂白2min.
(3)5%硫酸铁铵1min.
(4)Gomori氨性银改良液染1min.
(5)蒸馏水洗2次,用15%甲醛液还原1min.
(6)蒸馏水洗2次,氯化金30s,蒸馏水洗1次。
(7)70%乙醇浸一次,再浸入维多利亚蓝液中染30min-1h.
(8)95%乙醇分化1min左右。
(9)浸入蒸馏水中1min后,用丽春红S染色液染色2min.
(10)直接用无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。
3.结果
胶原纤维呈红色,网状纤维呈黑色,弹力纤维呈绿色,肌肉和红细胞呈淡黄色。
4.注意事项
氨性银液滴染时,要用干净吸管,防止银液污染而发生沉淀。氨性银液作用后的切片不能倾倒,应将蒸馏水冲洗切片上的银液,这样就不会使银液表面的银挥发.
颗粒而沉积在组织上。 天津甲苯胺蓝染色原理罗丹明染色法:铜沉积物-砖红色,核-蓝色,胆汁-绿色。
HE染色结果的判断细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色,软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色,粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色,胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色,弹力纤维呈亮粉红色,红血球呈橘红色,蛋白性液体呈粉红色。
着***况与组织或细胞的种类有关,也随其生活周期及病理变化而改变。例如,细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱,当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时,伊红着色由浅变深。
HE染色评定标准:
(1)切片完整,厚度4-6微米,厚薄均匀,无皱褶无刀痕;
(2)染色核浆分明,红蓝适度,透明洁净,封裱美观。
冷冻切片HE染色步骤:(1)冰冻切片固定10~30s
(2)稍水洗1~2s
(3)苏木**染色(60℃)30~60s
(4)流水洗去苏木**5~10s
(5)1%盐酸乙醇1~3s
(6)稍水洗1~2s
(7)促蓝液返蓝5~10s
(8)流水冲洗15~30s
(9)0.5%曙红液染色30~60s
(10)蒸馏水稍洗1~2s
(11)80%乙醇1~2s
(12)95%乙醇1~2s
(13)无水乙醇1~2s
(14)石炭酸二甲苯2~3s
(15)二甲苯(Ⅰ)2~3s
(16)二甲苯(Ⅱ)2~3s
(17)中性树胶封固
注:第(14)步如果不用石炭酸二甲苯,可改用无水乙醇。
染色结果:细胞核蓝色,胞质、肌纤维、胶原纤维和红细胞呈深浅不一的红色。
注意事项:
切片脱水透明,切片经HE染色后,要彻底脱水透明,才能用中性树胶封盖。如果脱水不彻底,封片后呈白色雾状,镜下观察模糊不清,且容易褪色。切片1-2级无水乙醇脱水,也可使用石炭酸二甲苯进行脱水。石炭酸有较强脱水能力,但长时间可使切片脱色,因此要经过多次二甲苯以使石碳酸完全除去。 镀银染色是神经元和神经纤维的主要染色法。
网状纤维染色:网状纤维是非常细而短的纤维,大量堆积时则形成致密的网状,故有网状纤维之称。疏松组织中网状纤维比较少,它多分布在结缔组织与其它组织交界处,如在上皮组织与结缔组织交界处的基膜内,***周围以及造血***,内分泌腺的腺细胞团索和外分泌腺的腺末房周围等处均有丰富的网状纤维。
网状纤维的变化,反映了疾病的发生和发展的不同过程,对疾病的诊断有极大意义。网状纤维的多少、粗细紧密、疏松或断裂,都是病理检验的重要指标,尤其是在临床病理诊断中,可根据其存在和分布来鉴别*与肉瘤。所以网状纤维的组织化学染色,在临床病理诊断上占着相当重要的位置。 地依红染色法:将弹力纤维、结缔组织,细胞核双重染色;弹力纤维呈深棕色,结缔组织浅棕色,细胞核蓝色。天津多色染色试剂
普鲁士蓝法 反应显示三价铁染色结果:含铁血黄素蓝色,其他浅红色。上海流式染色评价
染色体染色剂:配方一、醋酸-洋红染液
取45ml冰醋酸,加蒸馏水55ml,煮沸后徐徐加入洋红1g,搅拌均匀后加入1颗铁锈钉,煮沸10min,冷却后过滤,贮存在棕色瓶内。
配方二、醋酸-地衣红染液
取45ml醋酸,跟55ml蒸馏水相混,加热,徐徐加入地衣红粉末1~2g,搅拌溶解后,缓缓煮沸2小时,冷却后过滤,贮存在棕色瓶里。
配方三、龙胆紫染液
取1g龙胆紫,用少量蒸馏水溶解后,加蒸馏水,稀释到100ml,保存在棕色瓶内。
配方四、甲苯胺蓝染液
取0.5g甲苯胺蓝,溶解在100ml蒸馏水中,即成0.5%甲苯胺蓝水溶液。 上海流式染色评价
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