四川扬克斯特为您介绍一抗的选择:检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择,为缩小抗体的选择范围选中合适的抗体,需要考虑如下几种因素:
1、分析试验应用的类型l
2、样本蛋白的结构性质l
3、样本的种属l
4、抗体宿主的种类l
5、抗体的标记和检测l
分析试验应用的类型一般抗体说明书都列出该抗体经试验验证过适用于何种分析类型,如:可以应用于WBIHCICCELASA分析等,如果抗体说明书没有提及的应用类型,并不意味着该抗体不适用于此种分析应用类型,而*是说明尚未经过此种分析试验验证,如果抗体不适用某些分析试验,则会在抗体说明书上标注出来不适于某分析试验。2.样本蛋白的结构性质了解样本蛋白的结构性质有助于选择**合适的抗体,至少两方面因素需要考虑待测样本蛋白的结构域:抗体是由各种不同免疫原免疫宿主而制备得来,其中的免疫原包括:全长蛋白、蛋白片断、多肽、全有机体(如:细菌)或细胞,抗体说明书一般都有免疫原的描述,如果打算检测的是蛋白片断或一种特殊的同型物或蛋白全长的某一区域,则必须选择用含此片段域的免疫原制备出的抗体。如果打算用FACS流式检测活细胞的表面蛋白,则需要选择含该表面蛋白的胞外域来免疫制备的抗体。 二抗应选用与使用的一抗抗体相同的物种来源。江苏水生动物抗体多少钱
样本的提取或处理过程:某些抗体要求样本经过某些特殊处理,例如:许多抗体只识别还原和变性的、表位已暴露不受二级四级结构阻碍的蛋白样本,另一方面,某些抗体*识别天然折叠状态的蛋白。当选择免疫组化的抗体时,应注意某些抗体只识别未固定的冷冻的组织,而另一些抗体则适用于无需抗原修复解交联步聚的甲醛固定石蜡包埋的组织,这些都会在抗体说明书上应用部分标示出来。样本的物种应选择物种相同或有交叉反应的抗体,抗体可能与不同物种的同种靶蛋白有交叉反应,因其氨基酸序列同源性较高,如果样本的种类未列入抗体说明书上的交叉反应种属表中,并不意味着该抗体不适用于检测该物种的蛋白,而只是表示该物种尚未用此抗体检测验证过,应通过序列比对的方法来预测交叉反应,可应用Expasy和NCBIBLAST来进行不同物种蛋白同源性比对。 陕西鸡抗体一抗抗体按理化性质和生物学功能,可将其分为IgM、IgG、IgA、IgE、IgD五类。
人源化抗体vs全人源抗体到底哪个更好?
常言道,不管黑猫白猫,能抓到老鼠的才是好猫。疗效好才是真的好。事实上,人源化和全人源单抗中都有不少非常成功的药品。不少患者会担心存在鼠源的抗体会不会容易导致过敏?或者长期使用之后发生抗药,疗效就迅速下降了?
首先需要说明的是,过敏的原因非常复杂,不是单纯通过有没有鼠源来判断的。单抗类药物为外源性蛋白,注射时都有发生过敏反应的可能。其次,人源化和全人源单抗都会产生抗药抗体。抗药抗体不*与抗体的分子结构及分子序列相关,还与药物的配方(辅料)、注射方法、纯度、稳定性等相关。抗药抗体的发生也很复杂,取决于当时的体内免疫水平。例如,在长期***中,全人源抗体阿达木单
抗自身抗体发生率可达到3-16%,而人源化抗体奥马珠单抗的自身抗体发生率却*为<0.1%。而后,不管人源化和全人源单抗,怎么选择,**应关注的还是长期疗效及药物的安全性。
什么是抗体的交叉反应性呢?看到有的抗体是小鼠来源的,但是跟人,大鼠,兔和猴子都有交叉反应性,什么是抗体的交叉反应性呢?这样的抗体可以用于人来源的细胞做westernblot实验吗?抗原分子表面存在着能与抗体相互作用的部位即抗原决定簇一种抗原物质可以有两个或更多的决定簇。研究表明,抗体是从抗原决定簇的立体结构而不是从抗原的***分子排列来“认识”抗原的。这样有时一种抗体可以与分子结构并不完全相同但具有类似抗原决定簇的不同抗原起反应,这称为交叉反应。如果你的抗体和其它种属有交叉反应,理论上可以用于人源的WB。中文名抗体,外文名antibody。
经过吸附处理的二抗:不同来源的免疫球蛋白含有相似的结构,抗一个物种的抗体可能与其他物种发生交叉反应,一次有些二抗经过了动物或人类lgG吸附处理,以减少非特异性背景。例如,如果是小鼠的组织或细胞,那么选择经小鼠血清或IgG吸附处理过的二抗可以减少非特异性结合。但是此种抗体识别表位的数量被很大减少。选择哪种形式的二抗,是整个IgG分子,F(ab’)2段,还是Fab片段?整个lgG分子:此种抗体适用于多数情况。F(ab’)2片段:该种抗体是由两个靠二硫键连接的用于结合抗原的Fab片段组成,这些抗体用在特定的情况中,如需要避免抗体与具有Fc受体的细胞结合的情况。Fab片段:它们只有一个结合位点,一般用来封闭内源性免疫球蛋白。 抗体分布:脊椎动物的血清等体液中;湖北thermo fisher抗体二抗
及不可见反应,能阻抑抗原与其完全结合的不完全抗体。江苏水生动物抗体多少钱
凡能产生抗体的高等动物(包括人类),当注入胸腺依赖性抗原(TD抗原)进行免疫时都有着相同产生抗体的规律,即存在初次免疫应答(primaryimmuneresponse)和再次免疫应答(secondaryimmuneresponse)。
初次免疫应答是指机体***次接触某种抗原物质引起特异性抗体产生的过程。其特点是潜伏期长(一周以上),产生的抗体滴度(效价)低、维持的时间短,产生的抗体以IgM为主。
再次免疫应答是指机体以后再次接触同样的抗原后所产生的抗体应答过程。其特点是产生抗体的潜伏期短、抗体滴度高,维持的时问长,产生的抗体以IgG为主。 江苏水生动物抗体多少钱
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