Amicon® Pro纯化超滤管简明操作指南
亲和纯化
用于纯化GST•Tag，His•Tag等重组表达蛋白及抗体，适合～0.5 mL裂解液操作
6次低速离心，总耗时~100分钟（含65分钟孵育时间）
1. 在Amicon® Pro上样池中加入200μL亲和纯化树脂（50%悬浊液）和1.5 mL漂洗缓冲液。
1,000×g离心1 min。
2. 加入0.5 mL样品并与树脂吸打混匀。孵育1 h，其间可温和搅动促进结合。
3. 1,000×g离心1 min 以去除未结合杂质。
4. 加入1.5 mL漂洗缓冲液，1,000×g离心1 min。 你知道超滤浓缩管的用途吗？静安区默克超滤浓缩管代理价
温和的高浓度样品浓缩、脱盐装置
Amicon® stirred cells 搅拌式超滤杯
Amicon® stirred cells 搅拌式超滤装置对于高浓度（达 **分子溶液快速浓缩和脱盐提供了的可行方法。做蛋白浓缩时，向超滤装置中导入气压，大于超滤膜截留分子量的溶质将被截留在容器内，水及小于超滤膜截留分子量的溶质（如盐分）会被过滤并排出。加压拌式设计防止浓缩的样品发生沉淀，比离心超滤温和，对于高浓度、易沉淀样品的进一步浓缩同时脱盐等应用是比较好选择。配套选择的超滤膜可以灭菌并经处理后反复使用，更为经济。 闵行区默克超滤浓缩管商家益启生物公司主要超滤浓缩管代理销售。
7次低速离心，总耗时~100分钟（含60分钟孵育时间）
1. 在Amicon® Pro上样池中加入200μL亲和纯化树脂（50%悬浊液）和1.5 mL漂洗缓冲液。
1,000×g离心1 min。
2. 加入0.5 mL样品并与树脂吸打混匀。孵育1 h，其间可温和搅动促进结合。
3. 1,000×g离心1 min 以去除未结合杂质。
4. 加入1.5 mL漂洗缓冲液，1,000×g离心1 min。
5. 上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管（可选用50k MWCO型号）。
6. 加入1 mL洗脱缓冲液与树脂混匀。4,000×g离心5 min。
7. 加入200μL 中和缓冲液。4,000×g离心15 min。
8. 加上**终需要的缓冲液1.5 mL。4,000×g离心15 min，置换缓冲液的同时进行浓缩。
9. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管，1,000×g离心回收纯化和浓缩好的蛋白。
截留
截留有时也称为排阻。水合程度、离子和空间位置效应会导致分子量相近
的分子表现非常不同的截留状态。许多生物大分子在不同的 pH 或离子强
度改变的情况下倾向于聚集或改变构象，因此其有效大小可能比 “天然”
分子大恨多，从而导致排阻增加。比如，有些蛋白质在某些缓冲液条件下
会发生多聚化，而另一些则发生解聚（如血红素蛋白）成亚基。这使选择
合适截留分子量的膜变得复杂。以默克密理博的经验，我们通常推荐选择
为目的分子大小一半的膜作为尝试的优先，再根据实际情况加以调整。 你知道上海超滤浓缩管代理销售哪家比较好吗？
特别推荐应用（提供实验报告作为参考）
Microcon®超滤管：
Microcon®PCR 级超滤管：
• 法医鉴定分析的DNA样品制备
• 生物大分子样品浓缩、脱盐及缓冲液置换
• 体外合成mRNA的纯化
• 以人mRNA或总RNA制备荧光DNA探针
• 游离标记物的去除
• 纳克级核酸的定量回收及大片段DNA完整性研究
• 替代乙醇沉淀，离心法高效浓缩基因组DNA
应用指南
典型应用
肽及生长因子浓缩
蛋白浓缩与脱盐
电泳等操作前的蛋白样品浓缩
HPLC前去除蛋白
组织培养抽提物和细胞裂解液中大分子成分的纯化
生物样本浓缩（抗原，抗体，酶等）
从含有SDS（或无SDS）的缓冲液中浓缩gDNA
核酸浓缩与脱盐（单链或双链核酸）
去除标记核苷酸
去除标记氨基酸
从扩增的DNA产物中去除引物
克隆前去除连接序列（linker） 益启生物公司的 超滤浓缩管系列有很多。徐汇区默克超滤浓缩管报价
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Minicon®浓缩器
Minicon® 浓缩器用于在电泳或免疫电泳分析前对尿液和脑脊液进行浓缩，以增强对不正常或病态的蛋白质（例如尿中的 Bence Jones 蛋白）的识别。B15型有 8 个浓缩单元，用于 5mL 样本的处理；CS15型有 10 个浓缩单元，适合 2.5mL 样品的处理。溶剂和盐分通过超滤被吸收剂吸收而样品被浓缩。
优点与应用
静态浓缩器，不需要其它辅助装置
浓缩倍数达到 100 倍，样品终体积小
同时浓缩多个临床样品
特别推荐用于尿液、脑脊液等的蛋白
富集分析 静安区默克超滤浓缩管代理价
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