这是一种用一步温和的离心完成渗滤而很大程度保持蛋白活性的好方法。 为了与下游应用兼容，常常需要用透析或渗滤方法对蛋白样品进行缓冲液置换。传统透析方法需要时间很长，多步透析容易造成样品丢失、损耗和失活，而且***还需要一步浓缩。新产品 Amicon® Pro 带来了突破性的革新，需一步温和的渗滤操作即可达到同时对样品进行换液和浓缩的目的。 Amicon® Pro建立小量蛋白样品纯化-换液/ 脱盐-浓缩流程 新标准 操作步骤的优化与简化往往带来更好的结果，数据的稳定性、可比性和高通量化随之得以改 善，默克密理博新上市的Amicon® Pro纯化超滤管创造性地将纯化、换液、脱盐和浓缩操作融为一体，减少样品转移损失和人为操作的繁琐和误差，使蛋白样品的处理更加标准化，数据结果便于评估和比较。宝贵的小量样本从此有了比较好的操作工具。对于不同的需求我们选择不同的超滤浓缩管系列。江苏默克超滤浓缩管批发
样品的澄清、过滤和除菌 Ultrafree®-MC和Ultrafree®-CL微滤管 Ultrafree®-MC（0.5mL）和Ultrafree®-CL（2mL）是一次性使用的微滤离心管，可以用于各种水性样品和在某些溶剂中的样品除颗粒物、除沉淀的处理。提供两种体积及多种膜孔径以及已经经过无菌处理的产品供选择。Ultrafree®微滤离心管操作简便、样品回收率高且重复性很好，是蛋白和核酸样品处理的理想选择。 特点与优点 有0.1-5.0μm五种膜孔径供选择 采用高回收率的亲水Durapore® (PVDF)膜和亲水PTFE膜 提供无菌包装和非无菌包装形式产品 过滤速度快，数据稳定、重现性好 上样体积为0.5mL (MC)或2mL (CL) 配合1.5mL离心管固定转子(MC)或15mL离心管转子使用 顶盖颜色标识易于区分膜孔径奉贤区Merck离心浓缩管代理商超滤浓缩管服务电话是多少呢。
浓度：当需要截留的样品浓度很低时，通量通常不受浓度影响。操作过 程中，随着溶质浓度的升高，增加的粘滞性和极化将导致通量降低。 温度：粗体，作为获得压力、浓度一样的词条通常增加操作时的温度可 以提高超滤效率。每增加 1℃蛋白扩散率增加 3-3.5%，同时溶液粘度降低。 实践中一般是以样品和设备能耐受的比较高温度来操作。 pH：改换溶液和 / 或 pH 常常改变分子结构，蛋白尤其如此。在蛋白的 pI 值蛋白会沉淀，产生堵塞和得率损失。 污垢：溶液中除了目的分子造成的浓差极化，还有其它小颗粒和分子会 在膜上富集和沉淀，逐渐堆积在膜孔上或膜孔结构中，形成结晶和沉淀。
上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管（有5种截留分子量规格可选）。 6. 加入1 mL洗脱缓冲液与树脂混匀。孵育5 min。 7. 4,000×g离心15 min。 8. 加上蛋白样品**终需要的缓冲液1.5 mL。4,000×g离心15 min，置换缓冲液的同时进行浓缩。 9. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管，1,000×g离心回收纯化和浓缩好的蛋白。 * 本操作受Amicon® Ultra-0.5 mL超滤管～1 mg蛋白的容量限制。体积较大而蛋白浓度较低的情况下也可以采用如上方法，但溶液体积和离心时间等需要略加优化。 用Protein A或G对抗体进行亲和纯化购买超滤浓缩管就找益启生物公司。
用超滤对分子进行分级 通过选定截留分子量的超滤操作能精确地将混在大分子中的小分子去 除的想法常常不切实际。事实上，膜的规格描述是基于截留而非通过 的性质。一项实验中，采用 100k NMWL 滤膜，大于 100kDa 的分子截 留率 >90%，但这时比膜孔径小的分子并不是完全自由地通过滤膜， 75kDa 的分子截留率为 83%，30kDa 的分子也有 32% 被截留。混合的 溶液中的各 种成分通过膜并不像单一成分的溶液那么简单和容易。实 践中，如果要分离两种大分子，它们之间的分子量差异应该达到 10 倍 以上，或至少膜的 NMWL 规格在两种蛋白之间，则可达到比较理想的 分离。如果蛋白溶液较为稀释，低压下操作也有助于达到更好的效果。超滤浓缩管应用领域你知道吗。江苏默克超滤浓缩管批发
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蛋白如果浓缩过快或者过度浓缩都有可能引起蛋白沉淀。建议蛋白浓缩后的**终浓度不超过 20mg/ml。对于对浓缩速度敏感而容易沉淀的蛋白，建议的改进方法是： 1）离心力降为推荐离心力的30%-50% 2）改用截留分子量更大的超滤管（如原本选用10k，此时可以选择30k） 3）在浓缩过程中取出超滤管，用***头反复吹吸几次后再继续浓缩 Amicon® Ultra超滤膜中含有微量甘油。如果出现这种情况，请先用0.1 N NaOH清洗再离心。***用缓冲液或Milli-Q®水再次清洗后甩干。清洗后的滤膜应立即使用，如暂时不用，请保持润湿状态，避免重新干燥。江苏默克超滤浓缩管批发
