Bushnell-Haas琼脂(Bushnell-Haas Agar,简称BH琼脂)是一种专为检测环境微生物降解烃类能力而设计的合成培养基。其配方精简而精细:以磷酸钾缓冲对维持pH 7.0±0.2,硫酸铵提供氮源,氯化钠、硫酸镁与微量金属盐构成基本离子环境,却不含任何有机碳源。正这份“刻意为之的贫瘠”,使BH琼脂成为筛选“吃油微生物”的黄金标准——只有当培养皿中额外滴加柴油、石蜡或多环芳烃时,能利用这些烃类作为碳与能源的细菌、酵母乃至菌才会长出可见菌落,降解能力越强,菌落周围出现透明晕圈的速度越快、直径越大。自1940年代问世以来,BH琼脂被广用于石油污染土壤、海洋表面膜及工业废水的微生物资源普查。研究人员只需将样品匀浆涂布于表面覆有薄层原油的BH平板,28℃培养3–7天,即可依据菌落形态与晕圈初步分离高效降解株;再结合GC-MS测定残余烃量,可在两周内完成从筛选到定量评价的完整流程。近年来,随着极端环境研究升温,BH配方被灵活调整:添加3% NaCl可分离耐海盐烃降解菌;降低pH至4.5、补充Cu²⁺则用于勘查酸性矿山废水中的耐重金属菌。小小威氏芽孢杆菌,用微米之躯守护绿色丰收,让农药瓶少一个,饭碗多一粒。海洋新鞘氨醇菌
MB培养基基础(Marine Broth Base)是一种专为海洋细菌设计的富营养液体培养基,由蛋白胨、酵母粉及多种无机盐组成,pH 7.2–7.6,渗透压与海水相当。配方中氯化钠浓度约2–3%,并补充镁、钾、钙等海水中主要离子,可瞬时启动依赖高盐环境的嗜盐菌与耐盐菌,缩短延滞期。实验室常规做法是将培养基干粉溶解于蒸馏水后,补加陈海水或人工海盐,即可恢复接近自然海水的离子谱,使挑剔的海洋放线菌、弧菌、假单胞菌等迅速进入对数生长,用于后续分离、保藏或活性物质筛选。由于海洋微生物常产色素、抗生物质及胞外多糖,MB培养基的高营养特性可充分展现这些次级代谢潜能:弧菌在28℃、180 r/min振荡培养12小时,菌浓即可达10⁹ CFU/mL,菌液呈乳白或淡粉;某些Planococcus则分泌墨蓝色素,使整瓶培养液变为靛蓝,成为天然色素研究的理想起点。若需固体培养,只需补加1.5%琼脂,即成MBA平板,可在表面涂布沉积物悬液,28℃培养2–3天,挑取形态各异的单菌落进行16S rDNA鉴定,流程简洁高效。在质量控制方面,MB培养基需用人工海水或陈海水配制,切忌直接使用自来水,以免钙镁离子不足或氯残留抑制菌体;灭菌后若出现沉淀,多为镁盐析出,可50℃水浴复溶,不影响使用。

蒙氏肠球菌(Enterococcus mundtii)是一种革兰氏阳性、兼性厌氧的球形细菌,常以成对或短链排列。近年来,科研团队从健康动物肠道中分离到一株编号为HCD01的蒙氏肠球菌,经16S rRNA测序及系统发育分析,确认其与模式菌株同源性高达99%以上,已被保藏于中国微生物菌种保藏中心,保藏号CGMCC No.31447。安全评价显示,HCD01不含溶血素、凝胶酶等常见毒力基因,溶血试验呈阴性,且对小鼠脏器系数无不良影响,具备益生菌的先决条件。功能试验中,该菌能在pH 2~4的酸性环境及10% NaCl的高盐环境中存活,表现出良好的耐酸耐盐能力;同时可产生乳酸,使培养基pH在16小时内由6.2降至5.5,抑制沙门氏菌和停乳链球菌等病原体的生长。动物试验进一步证实,连续灌服HCD01的小鼠平均日增重提高,料重比下降,肠道绒毛结构完整,且在沙门氏菌攻毒后,肺、肝及结肠病变明显减轻,说明其既能促进生长,又能缓解致病菌沾染造成的组织损伤。综上,蒙氏肠球菌HCD01集安全、耐逆、产酸、抑菌、促生长于一体,在替代抗生物质的微生态制剂及畜牧养殖业中具有广阔的应用前景。
解糖肠球菌(Enterococcus saccharolyticus)是一种革兰阳性、兼性厌氧的球菌,更早从英国稻草垫料中分离,模式菌株ATCC 43076被广用于API及VITEK®系统的质量控制。该菌因能发酵多种糖类产酸,故得名“解糖”,在分类学上与粪肠球菌、屎肠球菌并列,却极少携带典型毒力基因,安全性较高。近年研究发现,解糖肠球菌具有突出的益生潜力:它可在pH 2.5的胃酸和0.3%胆盐中保持90%存活,并分泌乳酸、乙酸等短链脂肪酸,迅速降低肠道pH,抑制沙门氏菌、大肠杆菌等致病菌的定植。体外试验还显示,该菌能黏附于Caco-2细胞单层,上调紧密连接蛋白ZO-1与Occludin的表达,增强肠屏障功能,减轻脂多糖诱导的炎症反应。在动物应用中,日粮添加10^7 CFU/g解糖肠球菌可显著提高断奶仔猪平均日增重8.7%,降低料重比6.3%,并减少腹泻率一半;其代谢产物还能促进双歧杆菌、乳酸菌等有益菌增殖,使结肠丁酸浓度升高30%,改善绒毛高度与隐窝深度比。此外,该菌对万古霉素敏感,不含vanA/vanB耐药操纵子,降低了基因横向转移风险。综上,解糖肠球菌凭借耐酸耐胆盐、产酸抑菌、增强屏障及促生长等多重功能,被视为替代抗生物质的潜力菌株,未来在婴幼儿食品、畜禽养殖及微生态制剂领域具有广阔前景。它以甲醇、甲胺等一碳化合物为主食,却能把这些常被忽视的小分子变成高值产物。

谲诈明串珠菌(Leuconostoc fallax)是明串珠菌属中“貌善心狠”的。菌落乳白、表面光滑,细胞球形成对,发酵葡萄糖产酸产气,看似温顺,却能在泡菜前期迅速增殖,借“糖衣”胞外多糖包裹自己,欺骗宿主免疫系统,故得“谲诈”之名。基因组分析揭示,它携带一套罕见的寡肽转运与组氨酸激酶双组分系统,可感知渗透压与酸度变化,一旦环境pH降至4.0以下,便启动“式”产酸爆发,短时间内释放大量乳酸与乙酸,排挤同坛的乳酸菌盟友,独占发酵主导权。更“狡黠”的是,该菌能分泌一种细菌素Fallaxin,对李斯特菌、金黄色葡萄球菌等革兰氏阳性食源性致病菌具有窄谱杀伤,却对自身及泡菜关键菌株无害,借此在微生态博弈中“借刀杀人”。然而,其高活性胞外多糖合成酶在低温(4℃)仍持续表达,导致泡菜后熟期口感发黏,被食品工程师视为“品质陷阱”。研究尝试通过CRISPR敲除其负调控基因rex,使谲诈明串珠菌在pH 3.8即自动休眠,既保留抑菌特长,又避免过度产黏,为精细控制传统发酵蔬菜的微生态提供了一把“基因开关”。生物公司以玉米浆发酵罐培养,把芽孢制成可湿性粉剂,拌种、滴灌皆宜,保质期两年,运输不必冷链。茄科罗尔斯通氏菌
基因组G+C含量37%,携带多重外排泵与渗透调节基因,可在干旱、盐碱环境中维持胞内水平衡。海洋新鞘氨醇菌
细胞壁缺陷型细菌培养基(L-型细菌培养基)是一种为支持细胞壁缺失或缺陷型细菌(如L-型细菌)生长而设计的高渗、低毒、富营养的培养基。这类细菌因缺乏完整的细胞壁,不能耐受常规培养基的渗透压,因此必须在培养基中加入高浓度的渗透稳定剂,如蔗糖(10–15%)、NaCl(2–5%)或甘露醇,以维持细胞膜的稳定性,防止细胞破裂。L-型细菌通常由某些抗生物质(如青霉素、头孢类)诱导产生,也可在某些慢性沾染或免疫抑制状态下自然出现。由于其生长缓慢、形态多变、常规培养难以检出,因此需要的培养基进行分离与培养。细胞壁缺陷型细菌培养基通常以脑心浸液(BHI)或蛋白胨酵母膏为基础,提供丰富的氨基酸、维生素和其他生长因子,促进L-型细菌的复苏与增殖。部分配方还会加入马血清或人血清(5–10%),以提供胆固醇和脂质,进一步增强膜的稳定性。该培养基可用于临床标本(如尿液、血液、关节液)中L-型细菌的分离,尤其适用于慢性、反复沾染但常规培养阴性的病例。接种后通常在35–37℃、5% CO₂条件下培养3–7天,L-型细菌可形成“油煎蛋”样菌落,即致密、边缘扩散的微小菌落,需用倒置显微镜观察确认。海洋新鞘氨醇菌