5'DNA腺苷酰化试剂盒中使用的酶通常被称为腺苷酰化酶(Adenylase),这种酶能够催化5'端磷酸化的单链DNA或RNA(pDNA或pRNA)转换成5'端腺苷酰化DNA或RNA(AppDNA或AppRNA)。根据搜索结果,该酶的来源是嗜热古细菌,在大肠杆菌中进行表达并纯化而获得。这种酶在反应中将ATP分解成AMP和PPi,然后将AMP转移到单链DNA的5'磷酸基团上,形成腺苷酰化单链DNA,从而制备出腺苷酰化接头(linker)。此外,一些5'DNA腺苷酰化试剂盒中使用的酶是MthRNA连接酶(例如NEB#M2611A),这种酶也用于生成高产量的5'腺苷酰化DNA,并且操作简便,具有超过95%的效率,无需凝胶纯化即可完成单步反应。MthRNA连接酶是一种已知能够在65℃下有效工作的酶,有助于避免DNA的二级结构对腺苷酰化反应的干扰。这些酶的高效率和特异性使得5'DNA腺苷酰化试剂盒在单链DNA的5'端腺苷酰化修饰中非常有效,常用于miRNA等3'端为羟基的RNA或单链DNA在克隆、高通量测序建库或PCR检测等应用中。由于Pfu DNA Polymerase 对引物的质量要求较高,使用纯度高的引物可以减少由于引物错误导致的非目标突变。Recombinant Human CD94 (His-Avi Tag)
磁珠本身并不直接参与电泳过程,但它们可以用于电泳后的样品处理,特别是在核酸(DNA或RNA)的提取和纯化过程中。以下是使用磁珠进行电泳后样品处理的一般步骤:1.**凝胶电泳**:-首先,将DNA或RNA样品通过凝胶电泳进行分离。凝胶通常是琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶,根据样品的大小和类型选择合适的凝胶浓度和缓冲体系。2.**观察和切割**:-电泳完成后,使用紫外线照射凝胶并使用适当的染料(如EB或SYBRGreen)对DNA或RNA进行染色,以在紫外光下观察到DNA或RNA的条带。3.**样品提取**:-确定目标DNA或RNA条带后,使用干净的工具(如切割器或移液枪)从凝胶中切割出含有目标分子的凝胶片段。4.**磁珠准备**:-根据磁珠试剂盒的说明书,准备磁珠。通常包括磁珠的重悬和可能的表面修饰,以确保它们能够特异性地结合目标核酸。5.**样品与磁珠混合**:-将切割出的凝胶片段转移到含有磁珠的溶液中,温和地混合以促进磁珠与核酸的结合。6.**磁分离**:-将含有磁珠和核酸的混合物置于磁分离架上,利用磁场使磁珠快速聚集在管底,从而实现与溶液的分离。7.**洗涤**:-移除未结合的溶液,向磁珠上加入洗涤液,再次进行磁分离以去除杂质。Recombinant Human ANGPT2/Angiopoietin-2 (His-Avi Tag)来源于Francisella tularensis:FnCas12a是一种来源于Francisella tularensis菌株的核酸内切酶。
pA-Tn5转座酶的产品组分通常包括以下几个部分:1.**pA-Tn5转座酶蛋白**:一种高活性的Tn5转座酶突变体与ProteinA的融合蛋白,它是产品的主要组分,用于实现DNA片段化和接头连接的功能。2.**储存溶液**:碧云天的BeyoNGS™pA-Tn5转座酶产品含有特定的储存溶液,其组成为50mMHEPES(pH7.2),100mMNaCl,0.1mMEDTA,1mMDTT,0.1%TritonX-100,50%(v/v)Glycerol,这种溶液有助于保持酶的稳定性和活性。3.**测序接头(Adapters)**:用于与pA-Tn5转座酶组装形成pA-Tn5转座体(pA-Tn5Transposome),这是进行CUT&Tag实验的必需组分。4.**反应缓冲液**:部分产品包含用于转座酶反应的缓冲液,例如5×TagmentBuffer,这种缓冲液含有Mg2+,对转座酶的活性至关重要。5.**附件**:某些产品可能还包括附件,如说明书,提供产品使用和保存的详细信息。6.**其他组分**:根据产品的不同,可能还包括CouplingBuffer、AnnealingBuffer等其他辅助组分,这些组分有助于转座酶与DNA的结合和反应的进行。7.**包装规格**:pA-Tn5转座酶的包装规格可能有所不同,例如碧云天提供的BeyoNGS™pA-Tn5转座酶有800pmol和4000pmol两种包装规格。
PCR抑制剂是指那些在PCR反应中能够干扰或阻碍DNA扩增的物质。这些物质通常来源于生物样本本身或者样本的收集和处理过程。以下是一些PCR抑制剂的特点:1.**多样性**:PCR抑制剂可以是多种不同的化合物,包括胆酸盐、尿素、血红素、酚类化合物、蛋白质、多糖、植物或血液成分等。2.**来源**:它们可能来自血液(如血红素)、尿液(如尿素)、粪便(如胆酸盐)、植物(如多酚和多糖)、土壤(如腐殖酸)或化学物质(如酚类化合物)。3.**影响**:抑制剂可以影响DNA聚合酶的活性,干扰引物的退火,或与DNA模板发生非特异性结合,导致PCR扩增效率降低或特异性下降。4.**复杂性**:由于样本来源的复杂性,不同的抑制剂可能需要不同的策略来克服。某些抑制剂可能通过物理方法(如离心、过滤)去除,而其他抑制剂可能需要化学处理或使用特定的PCR增强剂。5.**浓度依赖性**:抑制效果通常与抑制剂的浓度有关。在较低浓度下,某些抑制剂可能不会影响PCR,但随着浓度增加,抑制效果会变得更加明显。6.**特异性**:某些抑制剂可能对特定的DNA聚合酶或PCR体系有特定的影响。例如,一些抑制剂可能特别影响高GC含量的模板扩增。牛痘DNA拓扑异构酶I是一种来源于牛痘病毒的酶,有多种作用于DNA分子的能力。
PCR产物直接进行电泳分析通常涉及以下步骤:PCR扩增:首先使用PCR Master Mix和特定的引物对目标DNA片段进行扩增。PCR产物的准备:如果使用的是含有预混凝胶加载染料的PCR Master Mix(如某些Blood Direct PCR Master Mix),则PCR产物在扩增后已经含有了适合电泳的染料。如果没有使用含染料的Master Mix,则需要在PCR反应完成后向产物中添加适量的凝胶加载染料。电泳槽的准备:清洁电泳槽,确保没有灰尘或残留物。安装电泳板和梳子,注意密封以防缓冲液泄漏。灌注缓冲液:向电泳槽中灌注适量的电泳缓冲液,常用的缓冲液有1X TAE或1X TBE。PCR产物的加载:将PCR产物轻轻混合均匀,避免气泡的产生。使用移液枪或微量移液管将PCR产物加入到凝胶孔中。如果PCR Master Mix中已含有染料,通常不需要额外添加。电泳条件的设置:根据PCR产物的大小和凝胶的浓度选择合适的电压和时间进行电泳。例如,较小的DNA片段可能需要较高的电压,而较大的片段则可能需要较低的电压和更长的时间。在基因编辑中,Pfu DNA Polymerase可以用于精确地引入特定位点的突变,或在基因组中插入特定的DNA序列。Recombinant Human Exodus-2/CCL21
Recombinant Biotinylated Human MAGE-A3 (HLA-A*24:02) Protein, His-Avi Tag 是一种通过重组DNA技术。Recombinant Human CD94 (His-Avi Tag)
1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)中的缓冲溶液是专门为逆转录反应设计的,以确保酶的活性和反应的高效进行。根据搜索结果,这些缓冲液通常包含以下特点:1.**优化的pH值**:缓冲液具有特定的pH值,以保证逆转录酶在合适pH条件下工作。2.**包含dNTPs**:一些缓冲液已经预混合了dNTPs(去氧核苷酸三磷酸),这是cDNA合成的必需原料。3.**稳定性**:缓冲液配方设计为在一定温度范围内稳定,以适应不同温度下的逆转录反应。4.**可能包含RNase抑制剂**:某些缓冲液中包含RNase抑制剂,以防止RNA模板在实验过程中被降解。5.**适用于不同温度**:有的缓冲液设计可以适应不同的反应温度,以满足复杂二级结构RNA模板的逆转录需求。6.**灵活的引物使用**:缓冲液与不同类型的引物兼容,包括oligo(dT)、随机六聚体或基因特异性引物。7.**无核酸酶水**:缓冲液中可能包含无核酸酶水,确保反应体系不受核酸酶的污染。
BstDNA聚合酶在等温扩增中的优势主要包括以下几点:1.**高灵敏度和扩增效率**:BstDNA聚合酶具有链置换能力,能够在恒温条件下快速、高效、特异性地扩增模板。翌圣生物的BstPlusDNAPolymerase灵敏度超高,低至5copies目的基因可测,且始终能比竞品更快达到阈值,扩增速率更快。2.**高dUTP耐受性**:BstPlusDNAPolymerase具有较高的dUTP耐受性,在反应体系中添加dUTP对BstPlusDNAPolymerase的灵敏度及扩增效率无影响,这使得它在防污染系统中表现出色。3.**快速扩增**:使用BstDNA聚合酶的等温扩增技术,如LAMP,可以在...