重组人激肽释放酶5(RecombinantHumanKallikrein5,简称KLK5)是一种丝氨酸蛋白酶,属于人组织激肽释放酶家族成员,广表达于皮肤、乳腺、唾液腺和食管等组织中。KLK5在皮肤中尤其丰富,主要参与角质层蛋白的降解过程,对维持皮肤屏障功能和正常脱屑具有重要作用。该重组蛋白通常采用大肠杆菌表达系统制备,N端带有His标签,便于通过金属螯合亲和层析(IMAC)进行高效纯化,纯度可达95%以上。蛋白以液体形式提供,溶解于含尿素的缓冲液中,适合用于体外酶活性分析、抗体开发及蛋白质相互作用研究。研究表明,KLK5具有胰蛋白酶样活性,能够特异性切割含有精氨酸或赖氨酸残基的底物,但不具有胰凝乳蛋白酶样活性。此外,KLK5在体液中可与蛋白酶抑制剂如α1-抗胰蛋白酶和α2-巨球蛋白形成复合物,这种相互作用可能调节其酶活性,并在炎症和病微环境中发挥重要作用。在病研究中,KLK5被发现与卵巢病和乳腺病的发长发展密切相关,其表达水平在患者血清和腹水中明显升高,提示其可能作为潜在的病标志物用于临床诊断和预后评估。因此,重组人KLK5蛋白不仅是研究皮肤生理和病理机制的重要工具,也为病标志物开发和药物筛选提供了有力支持。将合成的gRNA与Cas9 NLS蛋白混合,形成复合物。由于Cas9 NLS蛋白两端都有NLS,有助于复合物快速进入细胞核。DL50

重组人SP17蛋白(HisTag)是一种在哺乳动物细胞中表达的重组蛋白,融合了His标签,便于纯化和检测。SP17(SpermProtein17)是一种液体特异性蛋白,主要存在于液体中,参与精子的成熟和受精过程。它在生殖生物学和男性不育研究中具有重要的应用价值。SP17的功能与机制SP17在精子的成熟过程中发挥重要作用。它通过与精子表面的受体结合,调节精子的运动能力和受精能力。此外,SP17还参与精子的保护机制,防止精子在生殖道中的损伤。SP17的功能异常与男性不育症密切相关,其表达水平的变化可能影响精子的质量和受精能力。重组人SP17蛋白(HisTag)的特点重组人SP17蛋白(HisTag)具有以下明显特点:高纯度:纯度≥95%(经SDS-PAGE和SEC-HPLC验证),确保实验结果的可靠性。低内素:内素水平<0.1EU/μg,适合用于细胞实验和体内研究。功能完整:保留了天然SP17的结构域和功能特性。实验应用重组人SP17蛋白(HisTag)在多种实验中表现出色:体外受精实验:用于研究SP17对精子运动能力和受精能力的影响。细胞实验:检测SP17在精子表面的表达水平,研究其与受体的结合能力。Recombinant Human Nesfatin-1利用His标签通过亲和层析从细胞裂解物中纯化目标蛋白,然后可能通过离子交换层析、等方法进一步提纯。

SETD7(SETdomaincontaining7)是依赖S-腺苷甲硫氨酸的组蛋白H3K4特异性甲基转移酶,亦催化p53、TAF10等非组蛋白底物,在干细胞维持、代谢重编程及病抑制网络中扮演“表观开关”角色。本品以昆虫细胞-杆状病毒系统表达全长催化域(aa1-366),保留天然折叠与辅因子结合口袋;N端6×His标签经Ni²⁺-NTA、离子交换两步纯化,SDS-PAGE与SEC-MALS显示单体均一,纯度≥98%;内素<0.05EU/μg,适配体外酶活、晶体学与细胞转染。功能验证:在标准甲基化体系中,100nMSETD7可在30min内将H3(1-21)肽段K4位单甲基化提升至85%,Km(SAM)=0.9μM;ITC测定其辅因子结合热力学ΔH=-8.6kcal/mol,结构模型与PDB1O9S重叠RMSD<0.5Å。His标签兼容SPR、AlphaLISA及Pull-down,可高通量筛选SAM竞争性抑制剂或底物模拟肽,加速糖尿病、病表观治先导化合物的发现。该重组蛋白为解析SETD7底物谱、开发位点特异性甲基化调控策略提供了高活性、可规模化的研究级试剂。
T7EndonucleaseI(T7EI)在CRISPR/Cas9基因编辑中的应用主要体现在突变体检测和基因编辑效率评估上。以下是T7EI在CRISPR/Cas9中的具体应用步骤和特点:1.**基因编辑效率评估**:-T7EI用于评估CRISPR-Cas9在给定的导向RNA靶位点上对细胞群体进行基因编辑的效率。-通过PCR扩增围绕CRISPR导向RNA靶位点的基因组DNA,如果CRISPR-Cas9介导的非同源末端连接(NHEJ)修复事件引入了突变,变性和退火将形成突变型和野生型PCR扩增子的异源双链DNA。2.**突变体检测**:-如果CRISPR/Cas9编辑成功在DNA上引入突变,则可与野生型DNA片段退火产生异质双链DNA。T7EI可以识别该DNA上的不完全配对的DNA位点然后进行双链切割,通过琼脂糖凝胶电泳即可显示酶切后的条带,从而半定量判定基因编辑效果。-T7EI能识别长度大于或等于2bp的插入、缺失或突变导致的错配DNA,不能识别1bp的插入、缺失或突变。3.**实验步骤**:-收集细胞并提取基因组DNA,然后使用PCR扩增期望编辑的基因组区域。扩增子的长度建议为0.5-1kb。-对扩增的DNA进行变性和退火复性,以产生异质双链DNA。-使用T7EI酶处理退火后的DNA产物,在37℃孵育15分钟。在目前生物技术的微观世界中,限制性核酸内切酶是基因工程的关键工具之一。

在现代替物技术的微观世界中,限制性核酸内切酶是基因工程的关键工具之一,而AscI便是其中一位“稀有切割手”。它以其独特的识别序列和精细的切割能力,在基因工程、分子生物学研究以及遗传学等领域发挥着重要作用。AscI的识别序列是“GG^CGCGCC”,这一序列在基因组中极为罕见,使得AscI的切割位点相对稀少。这种稀有性使得AscI在处理复杂基因组时具有独特的优势,能够避免过度切割导致的片段过小或信息丢失。AscI会在“^”标记的位置将DNA链切断,产生黏性末端,这种黏性末端的特性使得AscI在基因克隆和重组DNA构建中具有独特的优势。在基因工程中,AscI的应用极为广。科学家可以利用它将目标基因从复杂的基因组中精细地分离出来,再通过DNA连接酶将切割后的基因片段与载体DNA连接起来,构建出能够高效表达目标蛋白的重组载体。这种精细的切割能力使得AscI成为处理大型基因组或复杂基因片段时的理想选择。AscI的另一个重要应用是基因分析。通过观察AscI对不同DNA样本的切割模式,科学家可以分析基因的多态性,进而推断出基因的结构和功能差异。这种技术在遗传病诊断和基因多样性研究中具有重要意义。在CRISPR-Cas9等基因编辑技术中,使用Pfu DNA Polymerase进行修复模板的合成。DL50
牛痘DNA拓扑异构酶I可以用于PCR产物的克隆,通过其识别序列在引物设计中引入,实现扩增后的DNA片段连接 。DL50
重组人KIR2DL3蛋白(RecombinantHumanKIR2DL3Protein,His-AviTag)是一种重要的免疫调节受体,属于杀伤细胞免疫球蛋白样受体(Killer-cellImmunoglobulin-likeReceptor,KIR)家族,主要表达于自然杀伤细胞(NK细胞)和部分T细胞亚群表面。KIR2DL3通过识别并结合靶细胞表面特定的HLA-C分子,传递抑制性信号,从而抑制NK细胞的细胞毒活性,在维持免疫耐受、抗病毒免疫及肿瘤免疫监视中发挥关键作用。该重组蛋白采用真核表达系统(如HEK293细胞)制备,确保了其天然构象和生物活性。其N端融合了His标签,便于通过Ni-NTA亲和层析进行高效纯化;同时带有Avi标签,可在体内或体外通过生物素连接酶实现特异性生物素化,极大提高了其在ELISA、表面等离子共振(SPR)及流式细胞术等实验中的应用灵活性。KIR2DL3在免疫治研究中具有重要意义,尤其在NK细胞功能调控、肿瘤免疫逃逸机制及个体化免疫治策略开发中受到广关注。重组人KIR2DL3蛋白为研究NK细胞与靶细胞相互作用、筛选KIR-HLA阻断剂及开发新型免疫检查点抑制剂提供了可靠工具,具有重要的科研与临床转化价值。DL50
6×DNALoadingBuffer:凝胶电泳中的关键试剂6×DNALoadingBuffer是一种用于凝胶电泳的即用型试剂,广泛应用于DNA片段的分离和分析。它通过添加特定的染料和甘油(或蔗糖),使DNA样品在电泳过程中更容易被观察和操作。产品特点高密度与染料标记:6×DNALoadingBuffer含有高浓度的甘油或蔗糖,使DNA样品在电泳时能够沉降在凝胶孔底部,避免漂浮。同时,其中的染料(如溴酚蓝和二甲苯蓝)可以指示DNA迁移的位置,便于实时观察电泳进程。即用型设计:无需额外配制,直接与DNA样品混合即可使用,简化了实验操作。兼容性强:适用于多种类型的DNA样品,包括PCR产物、质粒DN...