直接称重程序
大多数稀释蛋白的密度与水的密度大致相同 (即1 g/mL)。 利用这一特性，可通过称取浓缩液与滤过液重量并将其单位从克转化成毫升的方法，对其进行量化。 本方法适用于浓度不超过或约为20 mg/mL的溶液。
1. 使用之前，分别称取空的过滤装置、离心管和空的浓缩液收集管的重量。
2. 在过滤装置中加入溶液，然后重新称重。
3. 按说明组装装置和离心机。
4. 用移液管收集浓缩液，然后将其注入到已经预先称重的浓缩液收集管。
5. 从离心管上取下装置，然后称取离心管和浓缩液收集管的重量。
6. 减去空的装置/试管的重量，计算初始材料、滤过液及浓缩液的重量。
7. 化验初始材料、滤出液及浓缩液，以确定溶质浓度。
8. 使用重量/体积数据及所测出的浓度来计算回收量
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非无菌 Millex 过滤器现在采用一种更大的新 外壳，达 33 mm，装有默克密理博 Express PLUS （PES），Durapore （PVDF）和尼龙膜。 流速更快 更大的滤膜表面积提高了流速。它还降低了 排空注射器所需要的压力，从而使过滤溶液 更容易。 低保留体积 尽管膜表面积升高了，但是保留体积 ( 空气 吹过后 ) 被降低到 80 µL，比 25 mm Millex 过 滤器下降了 20%。 更高的操作压力 新型 33 mm Millex 非无菌包装过滤器较大外 壳压力为 8.6 bar（125 psi），这意味着你可 以比以前更快速的过滤溶液。 广西聚四氟乙烯滤膜Millipore密理博用途Millipore纯水机耗材。
应用如果将压力罐与一个外部的压力源连接，压力罐中盛有 的液体便可通过 Merck Millipore 加压过滤器而得到过滤。 罐符合ASME-UM规范要求。密封盖用凸轮锁定手柄密封。 排气后可高温高压灭菌。附件压力释放阀、压力表和软 管接头符合法规规定。附件密封盖可保证压力罐在真空 环境下使用。应用用于真空过滤少量样品，进行颗粒或 生物污染物分析。提供熔结玻璃支撑 件或不锈钢支撑网。厚型预过滤膜或 带衬垫的滤膜不能密封在此过滤器 中。建议在溶剂过滤中使用 Durapore （PVDF）滤膜或不带衬垫的 PTFE 膜。警告 : 禁止与易燃性液体配合使用， 以免受伤。 装有滤膜的换膜过滤器不能高温高压 灭菌。
Amicon® Pro能做到一步离心完成脱盐换液蛋白缓冲液置换、脱盐和透析样品的特点和制备要求 Amicon® Pro 系统 Amicon® Ultra 超滤管 D-Tube™ 透析管快速操作 ~20 分钟 <1 小时 5 小时敏感样品，在高浓度时容易出现沉淀 适合使用 不适合使用 适合使用透析后浓缩 适合使用 适合使用 不适合使用置换的缓冲液量比较有限 适合使用 适合使用 不适合使用
Microcon® DNA Fast Flow 超滤管，专门设计用于从含有SDS的溶液中浓缩和回收基因组DNA。管子和膜均为低非特异性吸附的材质，医用级O型圈密封，保证了在洗涤步骤中样品丢失较少。反转回收设计，即使样品量很小也能获得理想的得率，浓缩倍数可以达到20X。 上海登宁科技有限公司Millipore滤膜。
Q:浓缩后发现浓缩液中没有目的蛋白，可能的原因有哪些？
A: 首先，Amicon® Ultra超滤管的蛋白较低起始浓度为25ug/ml。请确保样本的起始浓度大于这个浓度。其次，如果问题仍然出现，请不要丢弃样本滤过液以便用于分析可能的原因：
1）a
如果目的样本在滤过液中，那么请排查：
） 是否选择了合适截留分子量的超滤管（目的蛋白分子量的1/2或者1/3）？
b）使用的离心力是否是在限定范围内？如果使用的是rpm，请换算成相应的g离心力，具体换算方法请垂询。
c）离心机较近是否有校准过？
d）是否尝试这个蛋白？如果能确保用同样的超滤管对其它蛋白成功操作的话，那么有可能是这个目的
蛋白的原因。有时蛋白会因其本身的一些特性（构象差异）而影响浓缩效果，建议选用更小截留分子量的超
滤管（如原本选用30k，此时可以选择10k）。
2）a
如果目的样本也不在滤过液中，那么：
）蛋白样本起始浓度是否大于25ug/mL？ b）用来确定样本浓度的方法是什么？是否可信？
c）目的蛋白是不是沉淀了？如果是，具体解决方法请参考上面的关于蛋白沉淀问题的解释。
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通过超滤操作精确地将混在大分子中的小分子去除的想法常常不切实际。事实上，膜的规格描述是基于截留而非通过的性质。一项实验结果 显 示，采 用 100k NMWL 滤 膜，大 于 100kDa 的分子截留率>90%，但 这 时 比 膜 孔 径 小 的 分 子 并 不 是 完 全 自 由 地 通 过 滤 膜，75kDa 的分子截留率为 83%，30kDa 的分子也有 32% 被截留。混合的溶液中的各种成分通过膜并不像单一成分的溶液那么简单和容易。实践中，如果要分离两种大分子，它们之间的分子量差异应该达到 10倍以上，或至少膜的 NMWL 规格在两种蛋白之间，则可达到比较理想的分离。如果蛋白溶液较为稀释，低压下操作也有助于达到更好的效果山东聚四氟乙烯滤膜Millipore密理博价格
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