温度敏感 温度对速度影响很小 温度对速度影响很小 温度较低时速度明显降低每一种蛋白的制备都是独特的,常常需要摸索和优化。应该考虑为特定蛋白选择相应的工具进行换液和透析。您可以从操作较快 Amicon® Pro 的渗滤法或更温和的 D-Tube™透析法中选择更适合样品的操作方法。这是一种只用一步温和的离心完成渗滤而较大程度保持蛋白活性的好方法。为了与下游应用兼容,常常需要用透析或渗滤方法对蛋白样品进行缓冲液置换。传统透析方法需要时间很长,多步透析容易造成样品丢失、损耗和失活,而且较后还需要一步浓缩。新产品 Amicon® Pro 带来了突破性的革新,只需一步温和的渗滤操作即可达到同时对样品进行换液和浓缩的目的。
Q:A如何对超滤管进行去除内不好的物质的处理?
A:提 供 的 超 滤 管 是 没 有 经 过 去 内 不好的物质 处 理 的,同 时 由 于 内 不好的物质 通 常 以 多 聚 体 的 形 式 存 在,大 小 在10-1000KD之间不等,在超滤的过程中是无法去除的。可在实验前通过先用0.5M NaOH预清洗,随后用Milli-Q® 水/缓冲液清洗的步骤去除大部分内不好的物质。关于针对Amicon®,Microcon®, Centricon® 尝试过的内不好的物质去除方案
Q:怀疑浓缩过程中目的蛋白和超滤膜之间可能存在非特异性吸附,如何改善?A:Amicon® Ultra超滤管使用的是再生纤维素膜,这种材质是蛋白吸附较低的超滤膜。但是对于一些疏水性蛋白或非极性蛋白,它们和膜的非特异吸附可能会增强。对于这种情况,可以尝试在实验前对超滤管进行封闭处理,。也可以尝试换成Amicon® Ultra 0.5或2来进行实验,通过减小膜面积来降低非特异性吸附。
四川超滤膜Millipore密理博销售Millipore密理博超滤膜。
较大化样品回收率
浓缩液中的样本回收量低可能由于吸附损失、过度浓缩、或者样本穿过滤膜造成。
吸附损失取决于溶质浓度、其疏水性、温度、与过滤装置表面的接触时间、样本成分及pH值。 为较大限度地降低损失,离心后请立即取走浓缩后样本。
如果样本起始浓度高,请监视离心过程,以免使样本过度浓缩。 过度浓缩可导致沉淀和样本损失。
如果样本看起来渗过了滤膜,请选用较低MWCO的Amicon® Ultra-15装置。
以***膜为重点技术,默克密理博为蛋白、核酸、病毒、囊泡等生物样品和微珠(纳米颗粒)的浓缩、脱盐、换液提供多样化操作工具。您可以方便地从以下产品中,根据起始样品体积和特别的要求,选择较适合处理方案。
切向流过滤技术
切向流超滤技术是目前普遍采用的一种膜分离技术,属于分子量水平的切向流过滤,通常截流分子量范围:1-1000 kD。超滤 (Ultrafiltration, UF) 是对溶液中的极小颗粒及可溶性分子进行分离的方法。这种分离主要基于分子的大小,但滤膜介质的通透性也会受样品的化学、分子及电荷特性的影响。超滤通常只能分离那些大小相差 3-5 倍以上的分子,而不适合分离大小相似的分子。
应用范围:
澄清 , 如:分离细胞 / 细胞碎片 ( 细胞收集细胞去除 )
浓缩 , 如:蛋白浓缩,去除水 / 缓冲溶液
脱盐
缓冲溶液的置换 , 如:层析前后缓冲液体系的改变
除热原 , 如:中药注射剂的热原去除
分离 / 纯化 , 如:蛋白、多肽、多糖、病毒、内病毒颗粒、
核酸、抗体
Millipore无菌针头式过滤器。对于浓度很低及珍贵的样品,除了考虑截留效率和操作方便外,额外要关注的是采用的超滤膜及设备对目标蛋白的潜在非特异性吸附损失。不同膜材质对生物分子吸附程度不同,默克密理博的 Ultracel®再生纤维素膜在各类膜中对生物分子吸附较小,是 Amicon® Ultra超滤管等超滤产品成为首要选择关键之一。滤膜和装置表面对溶质的吸附对样品收率会产生直接影响,所以如果希望尽可能提高得率,就应该考虑采用较小的设备和膜面积。小量的、较为稀释的样品应该选用膜面积小的装置,同时保证一定的流速。默克密理博设计了一系列离心式或搅拌式装置,配合不同的膜面积、不同的截留分子量的切向流系统,支持您获得理想的处理效果。装有超滤膜的 Amicon Ultra-4 离心超滤管。湖北离心管Millipore密理博诚信经营
Millipore聚碳酸酯膜。上海小型膜包Millipore密理博使用
打破样品制备瓶颈,事半功倍 Samplicity 是默克密理博新上市的多通道样品过滤系统,帮助您从繁琐、乏味的样品制备操作中解放出来:更短的时间处理更多样品, 而且获得更高得率,适用于各种复杂的样品,甚至是粘度很大、颗粒物含量高、手工难以过滤的样品。对于 UHPLC 等超灵敏分析 方法检测、特殊粘度样品及多样品高通量过滤都是较好的选择。
默克密理博新研发的 Strat-M 膜,模拟了人的皮 肤结构,替代人或动物皮肤,已经成功用于多 种药物的透皮给药检测,获得的数据与人皮一 致性好,并具有批次稳定性好、操作简便等优点, 是非常好的透皮给药检测模型。• 较佳的人皮肤数据—致性 • 批间差小,数据均一性更好 • 性能稳定,保质期长 • 易于获得,不需要特别预处理 • 性价比高 • 无生物安全性之虞 上海小型膜包Millipore密理博使用
上海登宁科技有限公司位于上海外高桥保税区美桂北路378号。公司业务分为实验耗材,医疗诊断耗材,科研耗材等,目前不断进行创新和服务改进,为客户提供良好的产品和服务。公司秉持诚信为本的经营理念,在仪器仪表深耕多年,以技术为先导,以自主产品为重点,发挥人才优势,打造仪器仪表良好品牌。上海登宁立足于全国市场,依托强大的研发实力,融合前沿的技术理念,飞快响应客户的变化需求。