实验室常用人工染料(2)甲基蓝:
甲基蓝是弱酸性染料,能溶于水和酒精。甲基蓝在动植物的制片技术方面应用极广。他跟伊红合用能染神经细胞,也是细菌制片中不可缺少的染料。它的水溶液是原生动物的***染色剂。甲基蓝极易氧化,因此用他染色后不能长久保存。
固绿:
固绿是酸性染料,能溶于水(溶解度为4%)和酒精(海解度为90)0图绿是“种染合有势质的纤维素细胞组织的染色剂,四轻奥物租和植租物组织应用极广。他和苏木精、看红并列为植物组织学上三中**常用的染料。 美蓝染色法:美蓝是常用的***染色染料,当它处于氧化状态是呈现出蓝色,而还原态时为无色。辽宁阿利新蓝染色试剂
弹力纤维染色:弹力纤维是结缔组织发生形成较晚的一种纤维,在创伤修复中一般在4—5周才有较明显的弹力纤维形成。弹力纤维艰固、较小而弹性较大,容易伸展,在结缔组织起弹性作用。弹力纤维由弹性蛋白组成,新鲜时呈黄色又称黄纤维。弹力纤维纤维分枝连成网,折光性强,含量多时在HE染片上呈折光性强的粉红色,量少的不显色。故量多时与胶原纤维不易区别,量少则不能观察。弹力纤维染色主要用于观察弹力纤维有无增生、肿胀、断裂、破碎及萎缩或缺如等病变。广东流式染色试剂地依红染色法:将弹力纤维、结缔组织,细胞核双重染色;弹力纤维呈深棕色,结缔组织浅棕色,细胞核蓝色。
脂肪染色剂
苏丹Ⅲ染液
取0.1克苏丹Ⅲ,溶于20毫升95%酒精中,即成0.5%苏丹Ⅲ染液。
这染液能染脂肪,还能染木栓、角质层。
血液染色剂
配方一、瑞氏 (Wright's)染液
取瑞氏染料粉末0.1克和甲醇60毫升。把染料放在研钵内,加少量甲醇研磨,使染料溶解,然后把溶解的染料倒入干净的棕色玻璃瓶。并用完甲醇为止。配制好的染液在室温中保存,即可使用。
新鲜配制的染液偏碱性,放置后呈酸性,染液贮存愈久染色愈好。这染液的适宜pH值是6.4~6.8。因此,染色时加入缓冲液,可维持一定的酸碱度,使染色效果更好。
这种染液除能染血液,还能染疟原虫。
瑞氏染料可以自制。在100是升05%碳酸氢钠水溶液里加入1克美蓝,溶解后放在锅内,蒸上1小时,取出冷却后过滤在滤液里加入0.1%伊红水溶液500毫升。随加、随搅拌,使混合液呈紫色。
静置一夜后,用滤纸过滤。滤纸上的沉淀物,在室内风干或放在干燥箱内,充分干燥后研磨成粉末,即成瑞氏染料。
配方二、甲基紫染液
取甲基紫0.5克,加到100毫升生理盐水中,溶解后加入冰醋酸0.02毫升。
细菌染色剂配方一、齐氏(Zieh1)石炭酸品红染液
甲液:取石炭酸5克,溶解在95毫升蒸馏水中。
乙液:取03克碱性品红,放入研钵中研磨,逐渐加入10毫升95%酒精,继续淹役,使它溶解。
将甲液和乙液混合后,摇匀,过滤,装瓶,备用。
配方二、罗氏(loffler's)美蓝染液
甲液:取S克美蓝,溶于100毫升95%6酒精中,制成美蓝一酒精饱和液。
乙液:取氢氧化钾0.01克(或1%氢氧化钾溶液1毫升),溶液也可用于放线菌染色,0.1%浓度可用于酵母菌染色。
配方三、革兰氏(Gram's)染液
用此液染色因先用甲液染色,再加乙液固定,丙液处理,***用丁液复染。四种液体的配方如下:
甲液:结晶紫液
(1)结晶紫2克95%酒精20升
(2)草酸铵0.8克蒸馏水80毫升
使用前将(1)、(2)液轻摇混匀,静置48小时后使用。
乙液:碘液
碘1克碘化钾2克蒸馏水300毫升
将碘化钾溶于少量蒸馏水中,然后加入碘,待碘全部溶解后,加水稀释至300毫升。
丙液:95%酒精溶液
丁液:番红花红液
2.5%番红花红酒精溶液10毫升蒸馏水100毫升。 Gram甲紫染色法:将纤维蛋白染色;纤维蛋白蓝黑色;背景红色。
实验室常用人工染料(4)结晶紫:
结晶紫是碱性染料,能溶于水(溶解度9%)和酒精(溶解度8.75%)。结晶紫在细胞学、组织学和细菌学等方面应用极广,是一种优良的染色剂。他是细胞核染色常用的,用来显示染色体的中心体,并可染淀粉、纤维蛋白、神经胶质等。凡是用番红和苏木精或其他染料染细胞核不能成功时,用它能得到良好的结果。用番红和结晶紫作染色体的二重染色,染色体染成红色,纺锤丝染成紫色,所以也是一种显示细胞分裂的优良染色剂。用结晶紫染纤毛,效果也很好。用结晶紫染色的切片,缺点是不易长久保存。
龙胆紫:
龙胆紫是混合的碱性染料,主要是结晶紫和甲基紫的混合物。在必要是,龙胆紫能跟结晶紫互相替用。医药上用的紫***,主要成分是甲基紫,需要时能代替龙胆紫和结晶紫。 甲基紫染色法:将淀粉样物,细胞核双重染色;淀粉样物红色或紫红色。细胞核蓝色。贵州HE染色效果
苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色。辽宁阿利新蓝染色试剂
植物相关常用染色方法(1):(1)淀粉类:淀粉是植物的主要贮藏物质,它们在各种不同的植物细胞中形成各种形状小同的颗粒。由于碘与淀粉作用可形成碘化淀粉而呈蓝色反应,用碘-碘化钾溶液来测试淀粉粒已成为**常用的方法。
(2)蛋白质类:植物细胞中的蛋白质是构成原生质体的主要成分,也可成为后含物贮存于细胞内,可能是无定形的,也可能成为结晶体或成为糊粉粒。
①较普遍的方法是用碘化钾染色,显微镜下观察可看到被染成黄色的圆球状小颗粒,即为储藏蛋白质的糊粉粒。
②**-溴酚蓝法是检测糊粉粒的**普通方法:在切片上滴加**-溴酚蓝试剂(**10g,溴酚蓝1mg,蒸馏水100ml)1滴,过5分钟后,用0.5%的醋酸冲洗,除去切片上多余的染料,再放在培养皿中水洗5分后用甘油封藏,细胞中如有糊粉粒则被染成鲜蓝色。
③曙红-酒精-苦味酸法也是显示糊粉粒的较好方法:在切片上滴上曙红-酒精-苦味酸试剂(配方曙红1g,溶于苦味酸的95%酒精饱和溶液50ml),镜检,当糊粉粒的基质现出蓝色时,加上数滴纯酒精,此时糊粉粒中球蛋白无色而结晶现出黄绿色,吸去多余酒精,用丁香油透明,加拿大树胶封固,**终蛋白质结晶应为黄色,球蛋白为粉红色,基质为暗红色。 辽宁阿利新蓝染色试剂
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