在切片染色到封片之前的过程中，乙醇是一个特别常用的脱水脱二甲苯的试剂。在二甲苯中脱蜡不完全的切片组织进入到乙醇中能看到明显的蜡渣沉积会对试剂造成污染，也会影响***制成切片的效果，在操作过程中要特别注意。
二甲苯可以洗去切片组织上的蜡，蜡块是将组织包块后进行切片的必要物质；二甲苯也作为切片染色流程全部完成后，帮助透明让染色图像更加清晰的试剂。
染液的作用：让切片充分的着色，不同的染色方法所使用到的染液和染色时间也各不相同，一般按照自己对实验目的的需要来选用比较好的染色方法或多重染色方法。 masson染色用来显示组织中纤维以及炎性因子的染色方法之一。贵州masson染色效果
天狼星红的染色法原理是什么？
原理利用胶原分子与强酸性染料天狼星红结合一起后加强双折光现象，使不同颜色和形态的胶原纤维得以区分。
胶原纤维（collagenousfiber）在三种纤维中数量**多，新鲜时呈白色，有光泽，故又名白纤维。在HE染色切片中呈嗜酸性，粗细不等，直径0.5~10um，呈波浪形，有分支并交织呈网，胶原纤维的生化成分为I型胶原蛋白。
胶原蛋白（collagen）由纤维细胞分泌，于细胞外聚合成胶原原纤维，经少量黏合成胶原纤维。胶原纤维是三种纤维中分布*****的一种纤维，***分布于各脏器内，它在皮肤、巩膜和肌腱**为丰富。
胶原纤维在上述的两种方法中着染不同的颜色，如V.G着染红色，Masson氏着染蓝色或绿色。
这主要取决于染料对组织的渗透、吸附、沉淀和反应，而染料分子量的大小是关键，分子量小的分子移动迅速，行动快，对组织的渗透性较强，能穿透较为致密的组织。 番红固绿染色效果甲基紫染色法：将淀粉样物，细胞核双重染色；淀粉样物红色或紫红色。细胞核蓝色。
胶原纤维染色：凡是间叶组织细胞都可产生网织纤维，也可产生胶原纤维，纤维母细胞是产生胶原纤维的主要细胞。胶原纤维是结缔组织中的主要纤维，是结缔组织中起支持作用的重要部分，具有一定的韧性和坚固性，能抵抗一定的牵引力而不致撕裂。胶原纤维是原胶原互相错开1/4平行排列交联成胶原原纤维，胶原原纤维再聚合成较宽的结构。按胶原的化学成分可分为15种，间质中的胶原纤维主要由I、Ⅱ、Ⅲ型胶原组成，新鲜时呈白色，故又称为白纤维。在HE染色中呈均一的粉红色，与周围间质区分不是很清楚。染色后，便可明显区别开来，易于观察病变时胶原纤维的变化。
应用：
（1）***硬化性疾病的观察：如肝硬变、心肌瘢痕的观察，胶原染色更易于观察诊断。
（2）瘢痕与淀粉样物质鉴别：前者胶原纤维染色为阳性，后者为阴性。
（3）骨纤维异常增殖病与骨纤维化的鉴别：利用胶原纤维染色可较易观察前者胶原纤维紊乱，纵横交错，后者较规则。
甲苯胺蓝染色法 ：1. 甲苯胺蓝液
甲苯胺蓝0.5g蒸馏水定容至100ml
2. 冰醋酸液
冰醋酸0.5ml蒸馏水定容至100ml
染色步骤：
1.组织切片常规脱蜡至水
2.入甲苯胺蓝液30min
3.稍水洗
4.入冰醋酸液分化，直到胞核和颗粒清晰。
5.稍水洗，用冷风吹干
6.二甲苯透明，中性树胶封固
(二)
①切片脱腊至水。
②蒸馏水浸洗3次。
⑤0.1%甲苯胺蓝液浸染10min。
④水洗，洗去多余染液。
⑤各级酒精脱水。
⑥二甲苯透明，中性树胶封固。
试剂的配制
称取0.1g甲苯胺蓝，溶于100ml 0.1M 醋酸盐缓冲液中，置室温5天后，即可使用染液于室温下可保存3个月，若放于4℃水箱则可保存半年左右，但该液的染色效果在早期为比较好，若染液存放时间较长，则染色偏淡，应适应延长染色时间。 Gram甲紫染色法：将纤维蛋白染色；纤维蛋白蓝黑色；背景红色。
实验室常用人工染料（2）甲基蓝：
甲基蓝是弱酸性染料，能溶于水和酒精。甲基蓝在动植物的制片技术方面应用极广。他跟伊红合用能染神经细胞,也是细菌制片中不可缺少的染料。它的水溶液是原生动物的***染色剂。甲基蓝极易氧化，因此用他染色后不能长久保存。
固绿：
固绿是酸性染料，能溶于水(溶解度为4%)和酒精(海解度为90)0图绿是“种染合有势质的纤维素细胞组织的染色剂，四轻奥物租和植租物组织应用极广。他和苏木精、看红并列为植物组织学上三中**常用的染料。 粘液胭脂红法：将粘液和细胞核染色；粘液深玫瑰色，核黑色，其他成分黄色。陕西荧光染色原理
中文名：masson染色，释义：用两种或三种阴离子染料混合，作用：显示组织中纤维的染色方法。贵州masson染色效果
显示胶原纤维、网状纤维和弹力纤维的三联染色法的染色步骤：
(1)中性甲醛液固定组织，石蜡切片，常规脱蜡至水。
(2)高锰酸钾硫酸液氧化3min后，自来水浸洗后，用2%草酸漂白2min.
(3)5%硫酸铁铵1min.
(4)Gomori氨性银改良液染1min.
(5)蒸馏水洗2次，用15%甲醛液还原1min.
(6)蒸馏水洗2次，氯化金30s，蒸馏水洗1次。
(7)70%乙醇浸一次，再浸入维多利亚蓝液中染30min-1h.
(8)95%乙醇分化1min左右。
(9)浸入蒸馏水中1min后，用丽春红S染色液染色2min.
(10)直接用无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。
3.结果
胶原纤维呈红色，网状纤维呈黑色，弹力纤维呈绿色，肌肉和红细胞呈淡黄色。
4.注意事项
氨性银液滴染时，要用干净吸管，防止银液污染而发生沉淀。氨性银液作用后的切片不能倾倒，应将蒸馏水冲洗切片上的银液，这样就不会使银液表面的银挥发.
颗粒而沉积在组织上。 贵州masson染色效果
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