甲苯胺蓝染色法 :1. 甲苯胺蓝液
甲苯胺蓝0.5g蒸馏水定容至100ml
2. 冰醋酸液
冰醋酸0.5ml蒸馏水定容至100ml
染色步骤:
1.组织切片常规脱蜡至水
2.入甲苯胺蓝液30min
3.稍水洗
4.入冰醋酸液分化,直到胞核和颗粒清晰。
5.稍水洗,用冷风吹干
6.二甲苯透明,中性树胶封固
(二)
①切片脱腊至水。
②蒸馏水浸洗3次。
⑤0.1%甲苯胺蓝液浸染10min。
④水洗,洗去多余染液。
⑤各级酒精脱水。
⑥二甲苯透明,中性树胶封固。
试剂的配制
称取0.1g甲苯胺蓝,溶于100ml 0.1M 醋酸盐缓冲液中,置室温5天后,即可使用染液于室温下可保存3个月,若放于4℃水箱则可保存半年左右,但该液的染色效果在早期为比较好,若染液存放时间较长,则染色偏淡,应适应延长染色时间。 切片中,载玻片是用来放被测标本的,而盖玻片是盖在被测标本之上的。甘肃阿利新蓝染色结果
HE染色结果的判断细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色,软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色,粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色,胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色,弹力纤维呈亮粉红色,红血球呈橘红色,蛋白性液体呈粉红色。
着***况与组织或细胞的种类有关,也随其生活周期及病理变化而改变。例如,细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱,当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时,伊红着色由浅变深。
HE染色评定标准:
(1)切片完整,厚度4-6微米,厚薄均匀,无皱褶无刀痕;
(2)染色核浆分明,红蓝适度,透明洁净,封裱美观。 天狼星红染色原理镀银染色:把固定后的组织或切片浸于银溶液中,再用还原剂处理,使之呈现深棕色或黑色。
实验室常用人工染料(2)甲基蓝:
甲基蓝是弱酸性染料,能溶于水和酒精。甲基蓝在动植物的制片技术方面应用极广。他跟伊红合用能染神经细胞,也是细菌制片中不可缺少的染料。它的水溶液是原生动物的***染色剂。甲基蓝极易氧化,因此用他染色后不能长久保存。
固绿:
固绿是酸性染料,能溶于水(溶解度为4%)和酒精(海解度为90)0图绿是“种染合有势质的纤维素细胞组织的染色剂,四轻奥物租和植租物组织应用极广。他和苏木精、看红并列为植物组织学上三中**常用的染料。
油红染色法油红作为脂肪染色剂,其染色步骤简便,染色结果肯定,脂肪染色切片效果优于苏丹IV。
试剂配制:
油红O:0.5g
异丙醇(含量98%):100ml
此为油红饱和液,可长期保存备用。
染色步骤:
(1)冻切片
(2)蒸馏水充分洗涤。
(3)油红稀释液染10-15分钟,避光、密封。油红稀释液的配制:
(4)取油红饱和液6毫升,加蒸馏水4毫升,静置5-10分钟后过滤后使用。
(5)60%乙醇镜下分化至间质清晰。
(6)水洗
(7)Marry氏苏木素复染核。
(8)水洗
(9)甘油或甘油明胶封片。
结果:脂肪呈鲜红色,细胞核呈蓝色,间质无色。 缓冲亚甲蓝法:将尼氏体及核仁和背景双重染色;尼氏体及核仁蓝色,背景红色或粉红色。
网状纤维染色:网状纤维是非常细而短的纤维,大量堆积时则形成致密的网状,故有网状纤维之称。疏松组织中网状纤维比较少,它多分布在结缔组织与其它组织交界处,如在上皮组织与结缔组织交界处的基膜内,***周围以及造血***,内分泌腺的腺细胞团索和外分泌腺的腺末房周围等处均有丰富的网状纤维。
网状纤维的变化,反映了疾病的发生和发展的不同过程,对疾病的诊断有极大意义。网状纤维的多少、粗细紧密、疏松或断裂,都是病理检验的重要指标,尤其是在临床病理诊断中,可根据其存在和分布来鉴别*与肉瘤。所以网状纤维的组织化学染色,在临床病理诊断上占着相当重要的位置。 六胺银染色法:将***和细胞核双重染色;***均着色,菌丝和孢子呈黑褐色,细胞核红色,背景淡绿色。江西甲苯胺蓝染色步骤
HE染色的适用范围:组织学、胚胎学、病理学教学与科研。甘肃阿利新蓝染色结果
番红染液的运用特点:
番红通常具有红色成团的化学成像结构(有时被描述为二甲基番红)。同时也有三甲基番红,其在下环的邻位有多加一个甲基。这两个化合物在生物染色应用的表现基本上是相同的,所以大部分番红的制造商并无法区分这两者。商业用番红的配制经常会包含这两种类型的混合。
番红也在分析化学中被用作氧化还原指示剂。
番红是个在一分子中含有两个氮原子的化合物,其为对称的2,8-二甲基-3,7-二氨基吩嗪。可以借由连接一分子氧化的对位-二氨和两分子的一级氨取得。
这是透过对位-氨基偶氮与一级氨的浓缩以及对位-亚硝基二烷基苯胺和二级碱基,例如二苯基间苯二胺,之间的反应。它们为呈现出特有绿色金属光泽的结晶固体;在水中立即被溶解并能染成蓝色或紫色。
同时也是可形成稳定的一元酸盐类的强碱。它们的酒精溶液会显现出红黄色的萤光。酚藏红在自由态时十分不稳定;它的氯化物会形成绿色的板块。其很容易就重氮化,而重氮化的盐类与酒精煮沸后会产生阿朴藏红或引杜林染料,C18H12N3。 甘肃阿利新蓝染色结果
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