冷冻切片HE染色步骤:（1）冰冻切片固定10～30s
（2）稍水洗1～2s
（3）苏木**染色（60℃）30～60s
（4）流水洗去苏木**5～10s
（5）1%盐酸乙醇1～3s
（6）稍水洗1～2s
（7）促蓝液返蓝5～10s
（8）流水冲洗15～30s
（9）0.5%曙红液染色30～60s
（10）蒸馏水稍洗1～2s
（11）80%乙醇1～2s
（12）95%乙醇1～2s
（13）无水乙醇1～2s
（14）石炭酸二甲苯2～3s
（15）二甲苯（Ⅰ）2～3s
（16）二甲苯（Ⅱ）2～3s
（17）中性树胶封固
注：第（14）步如果不用石炭酸二甲苯，可改用无水乙醇。
染色结果：细胞核蓝色，胞质、肌纤维、胶原纤维和红细胞呈深浅不一的红色。
注意事项：
切片脱水透明，切片经HE染色后，要彻底脱水透明，才能用中性树胶封盖。如果脱水不彻底，封片后呈白色雾状，镜下观察模糊不清，且容易褪色。切片1-2级无水乙醇脱水，也可使用石炭酸二甲苯进行脱水。石炭酸有较强脱水能力，但长时间可使切片脱色，因此要经过多次二甲苯以使石碳酸完全除去。 苯酚碱性品红法：使抗酸杆菌的糖脂蜡质与碱性品红结合形成复合物，从而使抗酸杆菌呈红色。安徽HE染色试剂
显示胶原纤维、网状纤维和弹力纤维的三联染色法的试剂配制：
(1)高锰酸钾硫酸液高锰酸钾水溶液中加入5ml的硫酸。
(2)维多利亚蓝染色液维多利亚蓝2g，糊精0.5g，间苯二酚4g；蒸馏水200ml。
将上述物质混合后加热煮沸，边煮边搅拌，约5min。然后用另一容器取30%三氯化铁水溶液25ml，另行加热煮沸后慢慢倒入上述混合液中继续煮沸3min,不断搅拌溶液呈胶体状。去火冷却过滤，将滤纸上的残渣连同滤纸放在60℃恒温箱中烤干。残渣呈深蓝色细颗粒状粉末，再溶于400ml的70%乙醇液中。然后加浓盐酸4ml和苯酚5g放置至成熟后使用。
(3)丽春红染色S染色液
丽春红S水溶液15ml，苦味酸饱和水溶液85ml。
(4)Gomori氨性银改良液取5%硝酸银水溶液5ml，滴加浓氨水由棕黑色变清为止，再加入3%氢氧化钠水溶液5ml，此时该液突变紫黑色，这时再加入氨水使之变清晰为止。***用蒸馏水补足至50ml，盛棕色试剂瓶中，置于冰箱中备用较长时间。 辽宁阿利新蓝染色切片维多利亚蓝法：将HBsAg阳性，细胞核双重染色；HBsAg阳性呈蓝绿色，细胞核红色。
油红染色法油红作为脂肪染色剂，其染色步骤简便，染色结果肯定，脂肪染色切片效果优于苏丹IV。
试剂配制：
油红O：0.5g
异丙醇(含量98%)：100ml
此为油红饱和液，可长期保存备用。
染色步骤：
(1)冻切片
(2)蒸馏水充分洗涤。
(3)油红稀释液染10-15分钟，避光、密封。油红稀释液的配制：
(4)取油红饱和液6毫升，加蒸馏水4毫升，静置5-10分钟后过滤后使用。
(5)60%乙醇镜下分化至间质清晰。
(6)水洗
(7)Marry氏苏木素复染核。
(8)水洗
(9)甘油或甘油明胶封片。
结果：脂肪呈鲜红色，细胞核呈蓝色，间质无色。
线粒体染色剂：
配方一、詹钠斯绿B(Janu’s green酒精饱和溶液)
取125毫升詹钠斯绿B，加入到625毫升无水酒精中，搅拌，即成烟鲁绿B酒精饱和染液。
(1)取詹钠斯绿酒精饱和染液按1: 30000比例加蒸馏水稀释，用来染原生动物线粒体。
(2)取詹钠斯绿酒精饱和液，按1: 1000比例加蒸馏水稀释，用来染新鲜蛙血线粒体。
配方二、詹钠斯绿B中性红染液
先配制詹钠斯绿B和中性红酒精包和液。詹钠斯绿酒精饱和液见配方一。中性红酒精饱和液配制方法：
取125毫升中性红，加入到50毫升无水酒精中，搅拌。
在10毫升生理盐水(两栖类生理盐水浓度为0.65%;哺乳类生理盐水浓度为0.9%)中，加入詹钠斯绿B酒精饱和液0.7~1毫升，中性红酒精饱和液2毫升，混合。詹钠斯绿B稀释液是***染液。 阿尔辛蓝（AB）染色法：唾液酸及若硫酸化黏液物资以及一般黏液蓝色，细胞核红色。其他不着色或淡染。
四川扬克斯特为您介绍脂质染色：
脂肪和类脂统称为脂类，它是构成机体的正常成份，脂肪主要积于脂肪组织中，并以油滴状的微粒存在于脂肪细胞胞浆内。因脂肪溶于酒精，故在HE染色中则被溶解掉，因此对某些疾病不能判断，所以必须进行脂肪染色。
应用：
（1）心、脑、肾等组织***的脂肪栓塞，脂肪染色即可判定栓子是否为脂肪滴。
（2）心脏、肝脏等脂肪变性：脂肪染色可显示变性细胞内的脂滴。
（3）脂肪肉瘤与其它间叶组织的恶性**的鉴别：脂肪染色即可显示脂肪肉瘤瘤细胞内产生的脂滴。 粘液胭脂红法：将粘液和细胞核染色；粘液深玫瑰色，核黑色，其他成分黄色。上海单色染色原理
透明骨骼标本染色剂配方一：茜素红染液(Ⅰ) 取冰醋酸5毫升、甘油5毫升、1%水合氯醛60毫升混合。安徽HE染色试剂
实验室常用人工染料：（1）人工染料：即苯胺染料或煤焦油染料，种类很多，应用极广。它们的缺点是经日光照射容易褪色，苯胺蓝、亮绿、甲基绿等更易褪色。在制片中注意掌握酸碱度，并避免日光直射，也能经几年不褪色。
1、酸性品红
酸性品红是酸性染料，呈红色粉末状，能容于水，略溶于酒精(0.3%)。 他是良好的细胞制染色剂，在动物制片上应用很广，在植物制片上用来染皮层、髓部等薄壁细胞和纤维素壁。他跟甲基绿同染，能显示线粒体。
组织切片在染色前先浸在带酸性的水中，可增强它的染色力。酸性品红容易跟碱起作用，所以染色过度，易在自来水中褪色。
2、刚果红
刚果红是酸性染料，呈枣红色粉末状，能溶于水喝酒精，遇酸呈蓝色。他能作染料，也用作指示剂。他在植物制片中常作为苏木精或其他细胞染料的衬垫剂。他用来染细胞质时，能把胶制或纤维素染成红色。在动物组织制片中用来染神经轴、弹性纤维、胚胎材料等。刚果红可以跟苏木静作二重染色，也可用作类淀粉染色，由于他能溶于水和酒精，所以洗涤和脱水处理要迅速。 安徽HE染色试剂
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