四川扬克斯特为您介绍病原微生物染色。
***和霉菌：***引起的病变虽然多种多样，但都不具有特异性，且***在HE染色中均显蓝色，故须作***染色。
应用：
在化脓性炎、坏死性化脓性炎及肉芽组织性化脓性炎或化脓性炎伴有巨细胞反应疑为霉菌***时，找到霉菌的菌丝、抱子及菌体即诊断为霉菌性炎。
细菌： 细菌在HE染色上不能分类，故须作细菌染色。
（1）一些疑为细菌***性炎症，可用细菌染色进一步确定病原诊断。如伤寒肉芽肿性炎或葡萄球菌性炎等化脓性炎症的诊断中细菌染色有很重要的诊断价值。
（2）风病与结核病：均由菌体表面含蜡质膜的抗酸杆菌所***形成，故须经抗酸染色才能着色，从而与其它疾病相鉴别。
阿尔辛蓝（AB）染色法：唾液酸及若硫酸化黏液物资以及一般黏液蓝色，细胞核红色。其他不着色或淡染。四川甲苯胺蓝染色上机
实验室常用人工染料（6）亚甲蓝或美蓝：
亚甲蓝或美蓝是碱性染料，呈蓝色粉末状，能溶于水(溶解度9.5%)和酒精(溶解度6%)。亚甲蓝是动物学和细胞学染色上十分重要的细胞核染料，其优点是染色不会过深。
甲基绿：
甲基绿是碱性染料。它是绿色粉末状，能溶于水(溶解度8%)和酒精(溶解度3%)。甲基绿是**有价值的细胞和染色剂，细胞学上常用来染染色质，跟酸性品红一起可作植物木质部的染色。
用这些染料配备而成的染液有很多，例如：吕氏(Loeffer)碱性美蓝染液，齐氏(ziehl)石炭酸复红染液等。 河北番红固绿染色质量苦味酸-酸性品红法 胶原纤维，肌纤维、细胞质双重染色；胶原纤维红色，肌纤维和红细胞黄色，细胞核蓝褐色。
四川扬克斯特为您介绍多色染色法示例：
（1）一、Mallory三色染色法（染结缔组织）
1.试剂配制
(1)重铬酸钾液
重铬酸钾2.5g;醋酸5m1，蒸馏水95ml
(2)苯胺蓝桔黄G液苯胺蓝0.5g，桔黄G2g，磷钨酸1g，蒸馏水100m1
(3)酸性复红液酸性复红0.5g，蒸馏水100ml
2.染色步骤
(1)中性甲醛液固定组织，石蜡切片，常规脱蜡至水。
(2)重铬酸钾液10mino
(3)蒸馏水冲洗2min，蒸馏水2次。
(4)酸性复红液2min,蒸馏稍洗。
(5)苯胺蓝液20min,95%乙醇快速分化。
(6)直接用无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。
3.结果
胶原和网状纤维呈蓝色，软骨、粘液、淀粉样变物质呈淡蓝色:神经胶质纤维、
肌纤维和酸性颗粒呈红色，髓鞘和红色呈桔红色。
4.注意事项
(1)酸性复红液易溶解于水，肉眼观察切片上保留一定的红色。
(2)苯胺蓝液染色后，用95%乙醇分化时，须用显微镜观察掌握。
(3)对陈旧的固定标本，其染色效果较差，可增加染色时间。
(4)另张切片，可同时作胶原纤维对照染色而进行鉴别组织成分。
在切片染色到封片之前的过程中，乙醇是一个特别常用的脱水脱二甲苯的试剂。在二甲苯中脱蜡不完全的切片组织进入到乙醇中能看到明显的蜡渣沉积会对试剂造成污染，也会影响***制成切片的效果，在操作过程中要特别注意。
二甲苯可以洗去切片组织上的蜡，蜡块是将组织包块后进行切片的必要物质；二甲苯也作为切片染色流程全部完成后，帮助透明让染色图像更加清晰的试剂。
染液的作用：让切片充分的着色，不同的染色方法所使用到的染液和染色时间也各不相同，一般按照自己对实验目的的需要来选用比较好的染色方法或多重染色方法。 银氨染色法：将网状纤维，胶原纤维双重染色；网状纤维呈黑色，胶原纤维呈红色，背景呈黄色。
脂肪染色剂
苏丹Ⅲ染液
取0.1克苏丹Ⅲ，溶于20毫升95%酒精中，即成0.5%苏丹Ⅲ染液。
这染液能染脂肪，还能染木栓、角质层。
血液染色剂
配方一、瑞氏 (Wright's)染液
取瑞氏染料粉末0.1克和甲醇60毫升。把染料放在研钵内，加少量甲醇研磨，使染料溶解，然后把溶解的染料倒入干净的棕色玻璃瓶。并用完甲醇为止。配制好的染液在室温中保存,即可使用。
新鲜配制的染液偏碱性，放置后呈酸性，染液贮存愈久染色愈好。这染液的适宜pH值是6.4~6.8。因此，染色时加入缓冲液，可维持一定的酸碱度，使染色效果更好。
这种染液除能染血液，还能染疟原虫。
瑞氏染料可以自制。在100是升05%碳酸氢钠水溶液里加入1克美蓝，溶解后放在锅内，蒸上1小时，取出冷却后过滤在滤液里加入0.1%伊红水溶液500毫升。随加、随搅拌，使混合液呈紫色。
静置一夜后，用滤纸过滤。滤纸上的沉淀物，在室内风干或放在干燥箱内,充分干燥后研磨成粉末，即成瑞氏染料。
配方二、甲基紫染液
取甲基紫0.5克，加到100毫升生理盐水中，溶解后加入冰醋酸0.02毫升。 美蓝染料***染色时，由于活细胞代谢过程中的脱氢作用，美蓝接受H后就由氧化转变为还原态，故表现出无色。河北番红固绿染色质量
masson染色是指用两种或三种阴离子染料混合，胶原纤维呈蓝色，肌纤维呈红色。四川甲苯胺蓝染色上机
HE染色的试剂与仪器A：0.5~1%的伊红酒精溶液：
称取伊红Y0.5~1g，加少量蒸馏水溶解后，再滴加冰醋酸直至浆糊状。以滤纸过滤，将滤渣在烘箱中烤干后，以95%酒精（即工业酒精，如果不怕浪费，用无水乙醇配制也可）100毫升溶解。
B：苏木素染液配方：(配制3000ml，可按比列减少)
苏木精6g
无水乙醇100ml
硫酸铝钾150g
蒸馏水2000ml
碘酸钠1.2g
冰醋酸120ml
甘油900ml
配制方法：将苏木素溶于无水乙醇，再将硫酸铝钾溶于蒸馏水，溶解后将甘油倾入一起混合，***加入冰醋酸和碘酸钠。
C：1%盐酸酒精分化液：将1毫升浓盐酸加入99毫升70%酒精中即可。 四川甲苯胺蓝染色上机
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