Masson染色法试剂:Regaud氏苏木精:苏木精1g,95%酒精10ml,甘油10ml,蒸馏水80ml将苏木精加入蒸馏水内加温溶解,冷却后加入酒精和甘油,放数日后即可应用Masson丽春红酸性复红液:丽春红,酸性复红,蒸馏水99ml,冰醋酸1ml:冰醋酸ml,蒸馏水100ml1%磷钼酸水溶液:磷钼酸1g,蒸馏水100ml苯胺蓝水溶液:苯胺蓝2g,蒸馏水98ml,冰醋酸2ml1%光绿水溶液:光绿1g,蒸馏水100ml步骤:1.石蜡切片脱蜡至水2.铬化处理或去汞盐沉淀(甲醛固定的组织此步可略)3.依次自来水和蒸馏水洗4.用Regaud苏木精染液或Weigert苏木**染核5-10min5.充分水洗,如过染可盐酸酒精分化6.蒸馏水洗7.用Masson丽春红酸性复红液5-10min8.2%冰醋酸水溶液浸洗片刻9.1%磷钼酸水溶液分化3-5min10.不经水洗,直接用苯胺蓝或光绿液染5min11.以12.95%酒精、无水酒精、二甲苯透明、中性树胶封固结果:胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色(如光绿液染色为绿色),胞浆、肌肉、纤维素、神经胶质呈红色,胞核黑蓝色。注意事项:1.组织固定起着很重要的作用,根据不同的固定液可延长或缩短染色时间2.磷钼酸水溶液对丽春红、酸性复红有分化作用,分化时镜下控制,肌纤维和纤维素呈红色,胶原纤维呈淡粉红色即可。 镀银染色:把固定后的组织或切片浸于银溶液中,再用还原剂处理,使之呈现深棕色或黑色。重庆多色染色质量
多色染色法示例:Masson三色染色法
1.试剂配制
(1)Masson复合染色液
酸性复红1g,丽春红2g,桔黄G2g,醋酸300ml。
(2)亮绿染色液高绿SF0.1g,醋酸100ml。
2.染色步骤
中性甲醛液固定组织,石蜡切片,常规脱蜡至水。
(1)Masson复合染色液5min。
(2)醋酸水溶液稍洗。
(3)5%磷钨酸5-10min。
(4)醋酸水溶液浸洗2次。
(5)亮绿染色液5min,醋酸水洗2次。
(6)无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。
3.结果
胶原纤维呈绿色,肌纤维呈红色,红细胞呈桔红色。
4.注意事项
(1)Masson复合染色液,经磷钨酸分化时须用显微镜控制肌纤维清晰为止。
(2)亮绿染料可用苯胺蓝替换,可用来作为对比观察染色的效果。 昆明流式染色结果美蓝染料***染色时,由于活细胞代谢过程中的脱氢作用,美蓝接受H后就由氧化转变为还原态,故表现出无色。
HE染色结果的判断细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色,软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色,粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色,胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色,弹力纤维呈亮粉红色,红血球呈橘红色,蛋白性液体呈粉红色。
着***况与组织或细胞的种类有关,也随其生活周期及病理变化而改变。例如,细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱,当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时,伊红着色由浅变深。
HE染色评定标准:
(1)切片完整,厚度4-6微米,厚薄均匀,无皱褶无刀痕;
(2)染色核浆分明,红蓝适度,透明洁净,封裱美观。
弹力纤维染色应用:
(1)动静脉的辨认:在血管病变时是动脉还是静脉以及是否为血管壁难辨认时,弹力纤维染色有助于辨认。有弹力板者为动脉,有弹力纤维构成血管轮廓者为血管。弹力纤维抗损伤能力较强,故弹力性纤维构成血管轮廓不易损坏。
(2)弹力纤维瘤的诊断:弹力纤维染色可见瘤样病变内有大量弹力纤维增生,非真性**。
(3)心血管先天性弹力组织增生,这组疾病有先天性内膜炎及冠状动脉的弹力纤维组织增生。弹力纤维染色有助于诊断。
(4)弹力纤维损伤性疾病:这组疾病有肺气肿、***、大动脉中层炎症等,弹力纤维染色有助于这些疾病的观察诊断。
(5)一些与弹力纤维变化有关的皮肤疾病的诊断与鉴别诊断:这组疾病有皮肤松弛症,萎缩性硬化性苔藓等,其诊断与鉴别诊断常依赖于弹力纤维染色,以观察弹力纤维变化。 爱先蓝法:将新型隐球菌夹膜染色;隐球菌呈蓝色。
实验室常用人工染料(5)中性红:
中性红是弱碱性染料,呈红色粉末状,能溶于水(溶解度4%)和酒精(溶解度1.8%)。它的碱性溶液中呈现黄色,在强碱性溶液中呈蓝色,而在弱酸性溶液中呈红色,所以能用作指示剂。中性红无毒,常做***染色的染料,用来染原生动物和显示动植物组织中活细胞的内含物等。陈久的中性红水溶液,用作显示尼尔体的常用染料。
番红:
番红是碱性染料,能溶于水和酒精。番红是细胞学和动植物组织学生常用的染料,能染细胞核、染色体和植物蛋白质,示维管束植物木质化、木栓化和角质化的组织,还能染孢子囊。 醛品红法:将HBsAg,弹力纤维及脂褐素双重染色;HBsAg阳性物质紫色,弹力纤维、脂褐素紫色至深紫色。北京PAS染色质量
镀银染色是神经元和神经纤维的主要染色法。重庆多色染色质量
番红、固绿对植物组织染色,是染色什么部位?
固绿是一种染含有浆质的纤维素细胞组织的染色剂,在染细胞和植物组织上应用极广。
番红在一些染色的实验计划表中用作复染剂,将所有的细胞核染成红色。
可溶解于水和乙醇。通常配成1%水溶液染植物的木质部,也可以按照以下配方配成苯胺番红液对组织进行块染:番红5g,95%乙醇50mL,苯胺20mL,蒸馏水450mL。
番红能够对植物的木质化、栓质化和角质化部分进行染色,对细胞核中染色质、染色体和花粉外壁等都可染成鲜艳的红色。染色时间一般为2~24h,常与固绿等进行合作染色。 重庆多色染色质量
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