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染色基本参数
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植物相关常用染色方法(2):油脂:在植物解剖学研究中,常用苏丹Ⅲ(或苏丹 IV) 溶液对脂肪性物质进行染色切片浸入上述溶液中 24h, 然后用 50% 的酒精洗涤,加上甘油后观察,油脂可被染成淡黄至红色,栓质和角质也同样被染色。如果细胞中存在硬脂或脂肪酸结晶时,染色十分缓慢,可稍加热。

单宁:单宁的化学结构比较复杂,它是一种多元酚的衍生物,大多呈胶体状态,存在于植物细胞的液泡中,或形成单独的液泡。将切片浸人 10% 的氯化铁水溶液中(或加-些碳酸钠),单宁物质则被染成蓝绿色。

橡胶:天然橡胶是异戊二烯的聚合物,植物组织中所含橡胶物质大多存在千乳汁管中,也有的存在于液泡中。对存在于乳汁管中的橡胶成分,可以用苏丹Ⅲ溶液染色材料应先用 10%铬酸 +70%酒精(使用前配制)固定 24h, 以使橡胶凝固,用刀片切去1-2mm, 而后徒手切片,于载玻片上加上苏丹Ⅲ或苏丹 Ⅳ溶液染色,乳汁管中的橡胶类物质被染成红色。 油红O脂肪法是显示组织内脂肪的染色方法,染料在脂肪内能高度溶解,可特异性的使组织内的中性脂肪着色。北京流式染色效果

网状纤维染色的应用:

(1)*与肉瘤的鉴别:在网状纤维染色下可清楚显示出肉瘤每一个细胞周围有网状纤维围绕,或似为团状或巢状的瘤组织,但团巢内仍有破碎的网状纤维,*显示为明显巢或索状,巢内无网状纤维。

(2)骨基质与浓缩的分泌物、血浆或水肿液的鉴别:骨基质内有网状纤维,而后者无。

(3)炎症细胞与*细胞的鉴别:在支气管活检中有时挤压较重,一些深染的细胞挤压成团,难以判断是受挤压的炎症细胞。这种病例染网状纤维有利于鉴别,炎症细胞不成巢,小细胞*可有巢状或索状结构。 贵州单色染色质量地衣红法:将HBsAg染色;HBsAg阳性呈棕色。

实验室常用人工染料(4)结晶紫:

结晶紫是碱性染料,能溶于水(溶解度9%)和酒精(溶解度8.75%)。结晶紫在细胞学、组织学和细菌学等方面应用极广,是一种优良的染色剂。他是细胞核染色常用的,用来显示染色体的中心体,并可染淀粉、纤维蛋白、神经胶质等。凡是用番红和苏木精或其他染料染细胞核不能成功时,用它能得到良好的结果。用番红和结晶紫作染色体的二重染色,染色体染成红色,纺锤丝染成紫色,所以也是一种显示细胞分裂的优良染色剂。用结晶紫染纤毛,效果也很好。用结晶紫染色的切片,缺点是不易长久保存。

龙胆紫:

龙胆紫是混合的碱性染料,主要是结晶紫和甲基紫的混合物。在必要是,龙胆紫能跟结晶紫互相替用。医药上用的紫***,主要成分是甲基紫,需要时能代替龙胆紫和结晶紫。

胶原纤维染色:凡是间叶组织细胞都可产生网织纤维,也可产生胶原纤维,纤维母细胞是产生胶原纤维的主要细胞。胶原纤维是结缔组织中的主要纤维,是结缔组织中起支持作用的重要部分,具有一定的韧性和坚固性,能抵抗一定的牵引力而不致撕裂。胶原纤维是原胶原互相错开1/4平行排列交联成胶原原纤维,胶原原纤维再聚合成较宽的结构。按胶原的化学成分可分为15种,间质中的胶原纤维主要由I、Ⅱ、Ⅲ型胶原组成,新鲜时呈白色,故又称为白纤维。在HE染色中呈均一的粉红色,与周围间质区分不是很清楚。染色后,便可明显区别开来,易于观察病变时胶原纤维的变化。

应用:

(1)***硬化性疾病的观察:如肝硬变、心肌瘢痕的观察,胶原染色更易于观察诊断。

(2)瘢痕与淀粉样物质鉴别:前者胶原纤维染色为阳性,后者为阴性。

(3)骨纤维异常增殖病与骨纤维化的鉴别:利用胶原纤维染色可较易观察前者胶原纤维紊乱,纵横交错,后者较规则。 粘液胭脂红法:将粘液和细胞核染色;粘液深玫瑰色,核黑色,其他成分黄色。

细菌染色剂配方一、齐氏(Zieh1)石炭酸品红染液

甲液:取石炭酸5克,溶解在95毫升蒸馏水中。

乙液:取03克碱性品红,放入研钵中研磨,逐渐加入10毫升95%酒精,继续淹役,使它溶解。

将甲液和乙液混合后,摇匀,过滤,装瓶,备用。

配方二、罗氏(loffler's)美蓝染液

甲液:取S克美蓝,溶于100毫升95%6酒精中,制成美蓝一酒精饱和液。

乙液:取氢氧化钾0.01克(或1%氢氧化钾溶液1毫升),溶液也可用于放线菌染色,0.1%浓度可用于酵母菌染色。

配方三、革兰氏(Gram's)染液

用此液染色因先用甲液染色,再加乙液固定,丙液处理,***用丁液复染。四种液体的配方如下:

甲液:结晶紫液

(1)结晶紫2克95%酒精20升

(2)草酸铵0.8克蒸馏水80毫升

使用前将(1)、(2)液轻摇混匀,静置48小时后使用。

乙液:碘液

碘1克碘化钾2克蒸馏水300毫升

将碘化钾溶于少量蒸馏水中,然后加入碘,待碘全部溶解后,加水稀释至300毫升。

丙液:95%酒精溶液

丁液:番红花红液

2.5%番红花红酒精溶液10毫升蒸馏水100毫升。 苏木素VG法:细胞灰黑色,髓鞘灰白色,胶原红色,肌纤维黄色,***细胞浆琥珀黄色,胶质纤维琥珀色。辽宁番红固绿染色效果

中文名:masson染色,释义:用两种或三种阴离子染料混合,作用:显示组织中纤维的染色方法。北京流式染色效果

多色染色法示例:Masson三色染色法

1.试剂配制

(1)Masson复合染色液

酸性复红1g,丽春红2g,桔黄G2g,醋酸300ml。

(2)亮绿染色液高绿SF0.1g,醋酸100ml。

2.染色步骤

中性甲醛液固定组织,石蜡切片,常规脱蜡至水。

(1)Masson复合染色液5min。

(2)醋酸水溶液稍洗。

(3)5%磷钨酸5-10min。

(4)醋酸水溶液浸洗2次。

(5)亮绿染色液5min,醋酸水洗2次。

(6)无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。

3.结果

胶原纤维呈绿色,肌纤维呈红色,红细胞呈桔红色。

4.注意事项

(1)Masson复合染色液,经磷钨酸分化时须用显微镜控制肌纤维清晰为止。

(2)亮绿染料可用苯胺蓝替换,可用来作为对比观察染色的效果。 北京流式染色效果

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