细菌染色剂配方一、齐氏(Zieh1)石炭酸品红染液
甲液:取石炭酸5克,溶解在95毫升蒸馏水中。
乙液:取03克碱性品红,放入研钵中研磨,逐渐加入10毫升95%酒精,继续淹役,使它溶解。
将甲液和乙液混合后,摇匀,过滤,装瓶,备用。
配方二、罗氏(loffler's)美蓝染液
甲液:取S克美蓝,溶于100毫升95%6酒精中,制成美蓝一酒精饱和液。
乙液:取氢氧化钾0.01克(或1%氢氧化钾溶液1毫升),溶液也可用于放线菌染色,0.1%浓度可用于酵母菌染色。
配方三、革兰氏(Gram's)染液
用此液染色因先用甲液染色,再加乙液固定,丙液处理,***用丁液复染。四种液体的配方如下:
甲液:结晶紫液
(1)结晶紫2克95%酒精20升
(2)草酸铵0.8克蒸馏水80毫升
使用前将(1)、(2)液轻摇混匀,静置48小时后使用。
乙液:碘液
碘1克碘化钾2克蒸馏水300毫升
将碘化钾溶于少量蒸馏水中,然后加入碘,待碘全部溶解后,加水稀释至300毫升。
丙液:95%酒精溶液
丁液:番红花红液
2.5%番红花红酒精溶液10毫升蒸馏水100毫升。 苯酚碱性品红法:使抗酸杆菌的糖脂蜡质与碱性品红结合形成复合物,从而使抗酸杆菌呈红色。昆明masson染色效果
四川扬克斯特为您介绍脂质染色:
脂肪和类脂统称为脂类,它是构成机体的正常成份,脂肪主要积于脂肪组织中,并以油滴状的微粒存在于脂肪细胞胞浆内。因脂肪溶于酒精,故在HE染色中则被溶解掉,因此对某些疾病不能判断,所以必须进行脂肪染色。
应用:
(1)心、脑、肾等组织***的脂肪栓塞,脂肪染色即可判定栓子是否为脂肪滴。
(2)心脏、肝脏等脂肪变性:脂肪染色可显示变性细胞内的脂滴。
(3)脂肪肉瘤与其它间叶组织的恶性**的鉴别:脂肪染色即可显示脂肪肉瘤瘤细胞内产生的脂滴。 HE染色因脂肪溶于酒精,故在HE染色中则被溶解掉,因此对某些疾病不能判断,所以必须进行脂肪染色。
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特殊染色法为了显示与确定组织或细胞中的正常结构或病理过程中出现的异常物质、病变及病原体等,需要分别选用相应的显示这些成分的染色方法进行染色。包括:胶原纤维染色(Masson等)、网状纤维染色、弹力纤维染色、肌肉组织染色(磷钨酸苏木素)、脂肪染色(苏丹Ⅲ)、糖原染色(PAS)、粘液染色(PAS)等。
相关染液:苏丹Ⅲ、Ⅳ,甲苯胺蓝。
病理诊断:***硬化性疾病的观察。
甲苯胺蓝染色法 :1. 甲苯胺蓝液
甲苯胺蓝0.5g蒸馏水定容至100ml
2. 冰醋酸液
冰醋酸0.5ml蒸馏水定容至100ml
染色步骤:
1.组织切片常规脱蜡至水
2.入甲苯胺蓝液30min
3.稍水洗
4.入冰醋酸液分化,直到胞核和颗粒清晰。
5.稍水洗,用冷风吹干
6.二甲苯透明,中性树胶封固
(二)
①切片脱腊至水。
②蒸馏水浸洗3次。
⑤0.1%甲苯胺蓝液浸染10min。
④水洗,洗去多余染液。
⑤各级酒精脱水。
⑥二甲苯透明,中性树胶封固。
试剂的配制
称取0.1g甲苯胺蓝,溶于100ml 0.1M 醋酸盐缓冲液中,置室温5天后,即可使用染液于室温下可保存3个月,若放于4℃水箱则可保存半年左右,但该液的染色效果在早期为比较好,若染液存放时间较长,则染色偏淡,应适应延长染色时间。 伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。
油红染色法油红作为脂肪染色剂,其染色步骤简便,染色结果肯定,脂肪染色切片效果优于苏丹IV。
试剂配制:
油红O:0.5g
异丙醇(含量98%):100ml
此为油红饱和液,可长期保存备用。
染色步骤:
(1)冻切片
(2)蒸馏水充分洗涤。
(3)油红稀释液染10-15分钟,避光、密封。油红稀释液的配制:
(4)取油红饱和液6毫升,加蒸馏水4毫升,静置5-10分钟后过滤后使用。
(5)60%乙醇镜下分化至间质清晰。
(6)水洗
(7)Marry氏苏木素复染核。
(8)水洗
(9)甘油或甘油明胶封片。
结果:脂肪呈鲜红色,细胞核呈蓝色,间质无色。 砂罗铬花青法:髓鞘呈鲜蓝色,细胞核呈深蓝色,胶原纤维呈粉红色。HE染色
高碘酸无色品红法:将脂褐素染色;脂褐素呈深紫色颗粒,粘液也呈深紫色。昆明masson染色效果
HE染色的试剂与仪器A:0.5~1%的伊红酒精溶液:
称取伊红Y0.5~1g,加少量蒸馏水溶解后,再滴加冰醋酸直至浆糊状。以滤纸过滤,将滤渣在烘箱中烤干后,以95%酒精(即工业酒精,如果不怕浪费,用无水乙醇配制也可)100毫升溶解。
B:苏木素染液配方:(配制3000ml,可按比列减少)
苏木精6g
无水乙醇100ml
硫酸铝钾150g
蒸馏水2000ml
碘酸钠1.2g
冰醋酸120ml
甘油900ml
配制方法:将苏木素溶于无水乙醇,再将硫酸铝钾溶于蒸馏水,溶解后将甘油倾入一起混合,***加入冰醋酸和碘酸钠。
C:1%盐酸酒精分化液:将1毫升浓盐酸加入99毫升70%酒精中即可。 昆明masson染色效果
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