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染色基本参数
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  • 适宜人群
  • 动物
  • 不适宜人群
  • 动物
  • 保质期
  • 3个月
染色企业商机

多色染色法示例:Masson三色染色法

1.试剂配制

(1)Masson复合染色液

酸性复红1g,丽春红2g,桔黄G2g,醋酸300ml。

(2)亮绿染色液高绿SF0.1g,醋酸100ml。

2.染色步骤

中性甲醛液固定组织,石蜡切片,常规脱蜡至水。

(1)Masson复合染色液5min。

(2)醋酸水溶液稍洗。

(3)5%磷钨酸5-10min。

(4)醋酸水溶液浸洗2次。

(5)亮绿染色液5min,醋酸水洗2次。

(6)无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。

3.结果

胶原纤维呈绿色,肌纤维呈红色,红细胞呈桔红色。

4.注意事项

(1)Masson复合染色液,经磷钨酸分化时须用显微镜控制肌纤维清晰为止。

(2)亮绿染料可用苯胺蓝替换,可用来作为对比观察染色的效果。 甲醇刚果红法:将淀粉样物,细胞核双重染色;淀粉样物紫红色,细胞核蓝色。河北masson染色评价

显示胶原纤维、网状纤维和弹力纤维的三联染色法的试剂配制:

(1)高锰酸钾硫酸液高锰酸钾水溶液中加入5ml的硫酸。

(2)维多利亚蓝染色液维多利亚蓝2g,糊精0.5g,间苯二酚4g;蒸馏水200ml。

将上述物质混合后加热煮沸,边煮边搅拌,约5min。然后用另一容器取30%三氯化铁水溶液25ml,另行加热煮沸后慢慢倒入上述混合液中继续煮沸3min,不断搅拌溶液呈胶体状。去火冷却过滤,将滤纸上的残渣连同滤纸放在60℃恒温箱中烤干。残渣呈深蓝色细颗粒状粉末,再溶于400ml的70%乙醇液中。然后加浓盐酸4ml和苯酚5g放置至成熟后使用。

(3)丽春红染色S染色液

丽春红S水溶液15ml,苦味酸饱和水溶液85ml。

(4)Gomori氨性银改良液取5%硝酸银水溶液5ml,滴加浓氨水由棕黑色变清为止,再加入3%氢氧化钠水溶液5ml,此时该液突变紫黑色,这时再加入氨水使之变清晰为止。***用蒸馏水补足至50ml,盛棕色试剂瓶中,置于冰箱中备用较长时间。 成都单色染色试剂因脂肪溶于酒精,故在HE染色中则被溶解掉,因此对某些疾病不能判断,所以必须进行脂肪染色。

冷冻切片HE染色步骤:(1)冰冻切片固定10~30s

(2)稍水洗1~2s

(3)苏木**染色(60℃)30~60s

(4)流水洗去苏木**5~10s

(5)1%盐酸乙醇1~3s

(6)稍水洗1~2s

(7)促蓝液返蓝5~10s

(8)流水冲洗15~30s

(9)0.5%曙红液染色30~60s

(10)蒸馏水稍洗1~2s

(11)80%乙醇1~2s

(12)95%乙醇1~2s

(13)无水乙醇1~2s

(14)石炭酸二甲苯2~3s

(15)二甲苯(Ⅰ)2~3s

(16)二甲苯(Ⅱ)2~3s

(17)中性树胶封固

注:第(14)步如果不用石炭酸二甲苯,可改用无水乙醇。

染色结果:细胞核蓝色,胞质、肌纤维、胶原纤维和红细胞呈深浅不一的红色。

注意事项:

切片脱水透明,切片经HE染色后,要彻底脱水透明,才能用中性树胶封盖。如果脱水不彻底,封片后呈白色雾状,镜下观察模糊不清,且容易褪色。切片1-2级无水乙醇脱水,也可使用石炭酸二甲苯进行脱水。石炭酸有较强脱水能力,但长时间可使切片脱色,因此要经过多次二甲苯以使石碳酸完全除去。

糖类染色:

糖类从组织化学技术角度来分,可分为多糖、中性粘液物质、酸性粘液物质、粘蛋白及粘脂质。多糖主要指糖原,它是一种胶样液态存在于肝细胞、骨骼肌、心肌等处。因糖原在肝脏及心肌疾患及某些**的病变中分布和量都有一定改变,故糖原的染色在临床病理诊断上具有重要意义。

(1)肝及心肌糖原沉着症的诊断:糖原染色显示在肝或心肌细胞内有大量糖原存在即可确诊。

(2)糖尿病性肾小球硬化症或血管病的诊断。

(3)高雪氏病与尼曼——匹克氏病的鉴别:前者为阳性、后者为阴性,做此染色较易鉴别。

(4)骨内骨外尤文氏肉瘤的诊断:此瘤80%细胞内有较多糖原,糖原染色为阳性,所以糖原染色为阳性(大多数细胞)可以协助诊断。

(5)腺泡状软组织肉瘤与化感瘤:前者棒状小体糖原染色为阳性。

(6)间皮瘤或滑膜肉瘤与其它*的鉴别:前者分泌含透明质酸的粘液,糖原染色为阳性,但透明质酸酶消化后即呈阴性反应,如有此染色特点,即可有助于诊断滑膜肉瘤或间皮瘤而不是*。 高碘酸无色品红法:将脂褐素染色;脂褐素呈深紫色颗粒,粘液也呈深紫色。

吸虫染色剂

梅耶氏(Mayer' s )明矾-洋红染液

取铵明矾(硫酸铝铵) 5克,溶于95毫升蒸馏水中,再加入0.5克洋红酸,加热溶解,冷却后过滤。在滤液中加入少量防腐剂,如麝香草酚、樟脑粉、水杨酸钠、苯酚(石炭酸)等,以防生霉。

这种染液适合于染小型动物材料,如吸虫等寄生虫的整体,也能染高等植物的表皮和蕨类植物的原叶体。

***染色剂

配方一、中性红染液.

先配成1%中性红水溶液(1克中性红溶于100毫升蒸馏水中)。取这种溶液1毫升,用0.6%生理盐水(或蒸馏水)稀释到50毫升,即成0.02%中性红水溶液,贮存在棕色瓶里,放在黑暗处。

本染液用来显示原生动物的食物泡以及动植物组织中活细胞的内含物等。

配方二、尼罗蓝(Nile Blue)染液

取0.1克尼罗蓝,溶解于1000~1500毫升蒸馏水中,即成尼罗蓝染液。

这种染液能把原生动物大核染成绿色,食物泡染成蓝色。

配方三、亚甲蓝染液

取0.1克亚甲蓝,溶解于1000毫升蒸馏水中,即成亚甲蓝染液。

这种染液用于原生动物的***染色。 Lendrum MSB法:将纤维蛋白,细胞核,红细胞多重染色;纤维蛋白红色,陈旧纤维蛋白紫色,细胞核蓝色。河北单色染色效果

缓冲亚甲蓝法:将尼氏体及核仁和背景双重染色;尼氏体及核仁蓝色,背景红色或粉红色。河北masson染色评价

色素染色(含铁血黄素及黑色素):

      含铁血黄素是由漏出于血管外的红细胞,被巨噬细胞吞噬后,分解血红蛋白产生的颗粒,HE染色为棕黄色,故称为含铁血黄素。因有时与福尔马林沉渣及黑色素等难相区别,故做含铁血黄素染色。

应用:

      主要用于同其它色素鉴别,若为阳性,显示陈旧性出血。黑色素常见于皮肤色素细胞,恶性黑色素瘤常可产生黑色素。组织内大量存在时呈棕黑色,易于鉴别。但少量存在时便难与其它色素相鉴别,须作黑色素染色。

黑色素瘤的诊断与鉴别诊断:**细胞内色素是否为黑色素,染黑色素有助于确定黑色素性质及**的定性诊断。

血色病与黑便病:皮革内有色素沉着,黑色素阴性而含铁血黄素阳性者可能为前者。 河北masson染色评价

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