HE染色原理(2)脱氧核糖核酸(DNA)两条链上的磷酸基向外,带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。伊红Y是一种化学合成的酸性染料,在水中离解成带负电荷的阴离子,与蛋白质的氨基正电荷的阳离子结合使胞浆染色,细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织、嗜伊红颗粒等被染成不同程度的红色或粉红色,与蓝色的细胞核形成鲜明对比。伊红是细胞浆的良好染料。
由于组织或细胞的不同成分对苏木精的亲和力不同及染色性质不一样。经苏木精染色后,细胞核及钙盐粘液等呈蓝色,可用盐酸酒精分化和弱碱性溶液显蓝,如处理适宜,可使细胞核着清楚的深蓝色,胞浆等其它成分脱色。再利用胞浆染料伊红染胞浆,使胞浆的各种不同成分又呈现出深浅不同的粉红色。故各种组织或细胞成分与病变的一般形态结构特点均可显示出来。地依红染色法:将弹力纤维、结缔组织,细胞核双重染色;弹力纤维呈深棕色,结缔组织浅棕色,细胞核蓝色。天津单色染色步骤
神经原纤维呈细线状,存在于神经细胞体及树突中,它们形成一个稠密的网状,轴突中的原纤维也互相交织在一起,且伸延至轴突全长。在HE染色中呈粉红色,难与胶原纤维相区别,故须作神经纤维染色。
应用:
(1)有利于观察神经原纤维的损伤。
(2)神经系统**的鉴别与诊断:如神经母细胞瘤与未分化*的区别等。
细胞质染色剂配方一、伊红染液:伊红染液一般配用水溶液和酒精溶液两种。
(1)取1g伊红,溶于99毫升蒸馏水中,即成1%伊红水溶液(市售红墨水内含伊红成分,可以用红墨水稀释液来代替本溶液)。
(2)取1g伊红,溶于99毫升70%酒精中,即成1%伊红-酒精溶液。
配方二、甲基蓝染液
取1g甲基蓝,溶于29毫升70%酒精中,加入70毫升蒸馏水,即成1%甲基蓝染液。
配方三、亮绿染液
取0.5克亮绿,溶解在100毫升蒸馏水中,即成0.5%亮绿溶液。 云南HE染色原理masson染色是指用两种或三种阴离子染料混合,胶原纤维呈蓝色,肌纤维呈红色。
细菌染色剂配方一、齐氏(Zieh1)石炭酸品红染液
甲液:取石炭酸5克,溶解在95毫升蒸馏水中。
乙液:取03克碱性品红,放入研钵中研磨,逐渐加入10毫升95%酒精,继续淹役,使它溶解。
将甲液和乙液混合后,摇匀,过滤,装瓶,备用。
配方二、罗氏(loffler's)美蓝染液
甲液:取S克美蓝,溶于100毫升95%6酒精中,制成美蓝一酒精饱和液。
乙液:取氢氧化钾0.01克(或1%氢氧化钾溶液1毫升),溶液也可用于放线菌染色,0.1%浓度可用于酵母菌染色。
配方三、革兰氏(Gram's)染液
用此液染色因先用甲液染色,再加乙液固定,丙液处理,***用丁液复染。四种液体的配方如下:
甲液:结晶紫液
(1)结晶紫2克95%酒精20升
(2)草酸铵0.8克蒸馏水80毫升
使用前将(1)、(2)液轻摇混匀,静置48小时后使用。
乙液:碘液
碘1克碘化钾2克蒸馏水300毫升
将碘化钾溶于少量蒸馏水中,然后加入碘,待碘全部溶解后,加水稀释至300毫升。
丙液:95%酒精溶液
丁液:番红花红液
2.5%番红花红酒精溶液10毫升蒸馏水100毫升。
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特殊染色法为了显示与确定组织或细胞中的正常结构或病理过程中出现的异常物质、病变及病原体等,需要分别选用相应的显示这些成分的染色方法进行染色。包括:胶原纤维染色(Masson等)、网状纤维染色、弹力纤维染色、肌肉组织染色(磷钨酸苏木素)、脂肪染色(苏丹Ⅲ)、糖原染色(PAS)、粘液染色(PAS)等。
相关染液:苏丹Ⅲ、Ⅳ,甲苯胺蓝。
病理诊断:***硬化性疾病的观察。 漂白法:将黑色素及嗜银细胞,胶原纤维双重染色;黑色素及嗜银细胞颗粒黑色,胶原纤维红色,背景淡黄。
Masson染色法试剂:Regaud氏苏木精:苏木精1g,95%酒精10ml,甘油10ml,蒸馏水80ml将苏木精加入蒸馏水内加温溶解,冷却后加入酒精和甘油,放数日后即可应用Masson丽春红酸性复红液:丽春红,酸性复红,蒸馏水99ml,冰醋酸1ml:冰醋酸ml,蒸馏水100ml1%磷钼酸水溶液:磷钼酸1g,蒸馏水100ml苯胺蓝水溶液:苯胺蓝2g,蒸馏水98ml,冰醋酸2ml1%光绿水溶液:光绿1g,蒸馏水100ml步骤:1.石蜡切片脱蜡至水2.铬化处理或去汞盐沉淀(甲醛固定的组织此步可略)3.依次自来水和蒸馏水洗4.用Regaud苏木精染液或Weigert苏木**染核5-10min5.充分水洗,如过染可盐酸酒精分化6.蒸馏水洗7.用Masson丽春红酸性复红液5-10min8.2%冰醋酸水溶液浸洗片刻9.1%磷钼酸水溶液分化3-5min10.不经水洗,直接用苯胺蓝或光绿液染5min11.以12.95%酒精、无水酒精、二甲苯透明、中性树胶封固结果:胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色(如光绿液染色为绿色),胞浆、肌肉、纤维素、神经胶质呈红色,胞核黑蓝色。注意事项:1.组织固定起着很重要的作用,根据不同的固定液可延长或缩短染色时间2.磷钼酸水溶液对丽春红、酸性复红有分化作用,分化时镜下控制,肌纤维和纤维素呈红色,胶原纤维呈淡粉红色即可。 粘液胭脂红法:将粘液和细胞核染色;粘液深玫瑰色,核黑色,其他成分黄色。黑龙江流式染色试剂
罗丹明染色法:铜沉积物-砖红色,核-蓝色,胆汁-绿色。天津单色染色步骤
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