甲基绿派洛宁法：1、试剂配制：（1）2%甲基绿水溶液：甲基绿（methylgreen）1g蒸馏水加至50ml用三氯甲烷抽提，方法详后。（2）5%派洛宁水溶液：派洛宁G（pyronineG）1g蒸馏水加至20ml（3）醋酸盐缓冲液（pH）醋酸液41ml醋酸钠液59ml（4）甲基绿派洛宁染液：2%甲基绿水溶液（经抽提）5ml5%派洛宁水溶液1ml蒸馏水12ml醋酸盐缓冲液（pH）18ml2、操作步骤：（1）新鲜组织固定于Carnoy氏液（4℃）3~6小时，经95%酒精和无水酒精脱水，二甲苯透明，石蜡包埋。（2）切片经二甲苯脱蜡至蒸馏水。（3）置入甲基绿派洛宁染液于室温染30~60分钟。（4）取出切片，不经水洗，用滤纸吸干多余染液。（5）用**迅速分化。（6）转入**二甲苯（1:1）稍洗。（7）二甲苯透明2~3次。（8）中性树胶封固。结果：存在于胞质和核仁内的核糖核酸呈红紫色，胞核染色质内的脱氧核糖核酸绿色或绿蓝色。3、对照方法：（1）取另一连续切片用核糖核酸酶1mg/1ml于37℃温箱内消化3小时，蒸馏水洗后置入甲基绿派洛宁染液内染色。（2）切片在10%高氯酸于4℃处理12~18小时，水洗后用1%碳酸钠液中和2分钟，流水冲洗5分钟，再用蒸馏水洗后置入甲基绿派洛宁染液内染色。经上述方法之一处理后的切片就为阴性。 苏丹Ⅲ染色法：将脂肪和细胞核染色，遇脂肪变橘黄色，细胞核呈蓝色。陕西单色染色上机
冷冻切片HE染色步骤:（1）冰冻切片固定10～30s
（2）稍水洗1～2s
（3）苏木**染色（60℃）30～60s
（4）流水洗去苏木**5～10s
（5）1%盐酸乙醇1～3s
（6）稍水洗1～2s
（7）促蓝液返蓝5～10s
（8）流水冲洗15～30s
（9）0.5%曙红液染色30～60s
（10）蒸馏水稍洗1～2s
（11）80%乙醇1～2s
（12）95%乙醇1～2s
（13）无水乙醇1～2s
（14）石炭酸二甲苯2～3s
（15）二甲苯（Ⅰ）2～3s
（16）二甲苯（Ⅱ）2～3s
（17）中性树胶封固
注：第（14）步如果不用石炭酸二甲苯，可改用无水乙醇。
染色结果：细胞核蓝色，胞质、肌纤维、胶原纤维和红细胞呈深浅不一的红色。
注意事项：
切片脱水透明，切片经HE染色后，要彻底脱水透明，才能用中性树胶封盖。如果脱水不彻底，封片后呈白色雾状，镜下观察模糊不清，且容易褪色。切片1-2级无水乙醇脱水，也可使用石炭酸二甲苯进行脱水。石炭酸有较强脱水能力，但长时间可使切片脱色，因此要经过多次二甲苯以使石碳酸完全除去。 河南阿利新蓝染色步骤透明骨骼标本染色剂配方一：茜素红染液(Ⅰ) 取冰醋酸5毫升、甘油5毫升、1%水合氯醛60毫升混合。
切片的载玻片和盖玻片有什么区别？
载玻片是用来放被测标本的，而盖玻片是盖在被测标本之上的。
1.载玻片在下边，是你要观察版的物质的盛放载体权，就是你要把东西放你它上面。
2.盖玻片比载玻片要小，载玻片主要用来盛放观察物，盖玻片是盖在载玻片上的，用做固定用的。
3.载玻片是转片中的比较厚的一块玻璃片，是用来承载实物的；盖玻片是那个小的圆的或者方/薄 的。
4.装片是一套东西的总称，包括载玻片、盖玻片和装载的实物。
5.盖玻片正方形,载玻片长方形,且宽度都较盖玻片的边长大。
载玻片和盖玻片如何清洗？
载玻片是一直泡75%酒精，用的时候才拿出来晾干或者烧干酒精就用，不会有什么灰尘；盖玻片是一次性的，用完就扔了。
番红染液的运用特点：
番红通常具有红色成团的化学成像结构(有时被描述为二甲基番红)。同时也有三甲基番红，其在下环的邻位有多加一个甲基。这两个化合物在生物染色应用的表现基本上是相同的，所以大部分番红的制造商并无法区分这两者。商业用番红的配制经常会包含这两种类型的混合。
番红也在分析化学中被用作氧化还原指示剂。
番红是个在一分子中含有两个氮原子的化合物，其为对称的2,8-二甲基-3,7-二氨基吩嗪。可以借由连接一分子氧化的对位-二氨和两分子的一级氨取得。
这是透过对位-氨基偶氮与一级氨的浓缩以及对位-亚硝基二烷基苯胺和二级碱基，例如二苯基间苯二胺，之间的反应。它们为呈现出特有绿色金属光泽的结晶固体；在水中立即被溶解并能染成蓝色或紫色。
同时也是可形成稳定的一元酸盐类的强碱。它们的酒精溶液会显现出红黄色的萤光。酚藏红在自由态时十分不稳定；它的氯化物会形成绿色的板块。其很容易就重氮化，而重氮化的盐类与酒精煮沸后会产生阿朴藏红或引杜林染料，C18H12N3。 地依红染色法：将弹力纤维、结缔组织，细胞核双重染色；弹力纤维呈深棕色，结缔组织浅棕色，细胞核蓝色。
细菌特殊染色剂配方一、芽孢染液用此配方染色是用甲液染色后，用乙液复染。
甲液：取5克孔雀绿，加入少量蒸馏水，使它溶解后，用蒸馏水稀释到100毫升，即成孔雀绿染液。
乙液：取番红花红0.5克,加入少量蒸馏水，使它溶解后，用蒸馏水稀释到100毫升，集成番红花红复染液。
配方二、荚膜染液此配方先用甲液染色，后用乙液复染。
甲液：取结晶紫0.1克，溶于少量蒸馏水后，加水稀释到100毫升，再加入0.25毫升冰醋酸一结晶紫染液。
乙液：取硫酸铜(31.3克)，溶于少量蒸馏水后，加水稀释到100毫升，即成20%硫酸铜脱色剂。
配方三、鞭毛染液
甲液
饱和明矾溶液2毫升5%石炭酸溶液5毫升
20%丹宁酸溶液2毫升
乙液
碱性品红11克95%酒精100毫升
使用前取甲液9毫升和乙液1毫升相混，过滤即可。 Ziehl-Neelsen抗酸杆菌染色法：抗酸杆菌红色，背景灰蓝色。湖北流式染色原理
漂白法：将黑色素及嗜银细胞，胶原纤维双重染色；黑色素及嗜银细胞颗粒黑色，胶原纤维红色，背景淡黄。陕西单色染色上机
HE染色原理（2）脱氧核糖核酸（DNA）两条链上的磷酸基向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。伊红Y是一种化学合成的酸性染料，在水中离解成带负电荷的阴离子，与蛋白质的氨基正电荷的阳离子结合使胞浆染色，细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织、嗜伊红颗粒等被染成不同程度的红色或粉红色，与蓝色的细胞核形成鲜明对比。伊红是细胞浆的良好染料。
由于组织或细胞的不同成分对苏木精的亲和力不同及染色性质不一样。经苏木精染色后，细胞核及钙盐粘液等呈蓝色，可用盐酸酒精分化和弱碱性溶液显蓝，如处理适宜，可使细胞核着清楚的深蓝色，胞浆等其它成分脱色。再利用胞浆染料伊红染胞浆，使胞浆的各种不同成分又呈现出深浅不同的粉红色。故各种组织或细胞成分与病变的一般形态结构特点均可显示出来。陕西单色染色上机
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