扬克斯特科技为您介绍特殊染色的应用价值。现代病理学中免疫组织化学技术、电子显微镜技术以及其它细胞及分子生物学技术应用日益***,但由于这些技术要求一定的实验条件以及所需的试剂价格较为昂贵,对于一部分病人以及某一些基层医院是比较难以接受的。而组织化学技术则具有无需复杂的实验条件以及较为昂贵的试剂操作又比较简单的优势,在临床病理学诊断中具有重要的应用价值。
比如,当细胞中出现色素,是黑色素还是含铁血黄素以及当组织中出现均一化学物质是否为淀粉样变性等,用组织化学技术区别起来很简单,所以组织化学技术,虽然已有几十年到几百年的历史,仍是一个很有实用价值的技术。 Ziehl-Neelsen抗酸杆菌染色法:抗酸杆菌红色,背景灰蓝色。山东双色染色步骤
四川扬克斯特为您介绍病原微生物染色。
***和霉菌:***引起的病变虽然多种多样,但都不具有特异性,且***在HE染色中均显蓝色,故须作***染色。
应用:
在化脓性炎、坏死性化脓性炎及肉芽组织性化脓性炎或化脓性炎伴有巨细胞反应疑为霉菌***时,找到霉菌的菌丝、抱子及菌体即诊断为霉菌性炎。
细菌: 细菌在HE染色上不能分类,故须作细菌染色。
(1)一些疑为细菌***性炎症,可用细菌染色进一步确定病原诊断。如伤寒肉芽肿性炎或葡萄球菌性炎等化脓性炎症的诊断中细菌染色有很重要的诊断价值。
(2)风病与结核病:均由菌体表面含蜡质膜的抗酸杆菌所***形成,故须经抗酸染色才能着色,从而与其它疾病相鉴别。
湖北甲苯胺蓝染色结果masson染色用来显示组织中纤维以及炎性因子的染色方法之一。
甲基绿派洛宁法:1、试剂配制:(1)2%甲基绿水溶液:甲基绿(methylgreen)1g蒸馏水加至50ml用三氯甲烷抽提,方法详后。(2)5%派洛宁水溶液:派洛宁G(pyronineG)1g蒸馏水加至20ml(3)醋酸盐缓冲液(pH)醋酸液41ml醋酸钠液59ml(4)甲基绿派洛宁染液:2%甲基绿水溶液(经抽提)5ml5%派洛宁水溶液1ml蒸馏水12ml醋酸盐缓冲液(pH)18ml2、操作步骤:(1)新鲜组织固定于Carnoy氏液(4℃)3~6小时,经95%酒精和无水酒精脱水,二甲苯透明,石蜡包埋。(2)切片经二甲苯脱蜡至蒸馏水。(3)置入甲基绿派洛宁染液于室温染30~60分钟。(4)取出切片,不经水洗,用滤纸吸干多余染液。(5)用**迅速分化。(6)转入**二甲苯(1:1)稍洗。(7)二甲苯透明2~3次。(8)中性树胶封固。结果:存在于胞质和核仁内的核糖核酸呈红紫色,胞核染色质内的脱氧核糖核酸绿色或绿蓝色。3、对照方法:(1)取另一连续切片用核糖核酸酶1mg/1ml于37℃温箱内消化3小时,蒸馏水洗后置入甲基绿派洛宁染液内染色。(2)切片在10%高氯酸于4℃处理12~18小时,水洗后用1%碳酸钠液中和2分钟,流水冲洗5分钟,再用蒸馏水洗后置入甲基绿派洛宁染液内染色。经上述方法之一处理后的切片就为阴性。
弹力纤维染色应用:
(1)动静脉的辨认:在血管病变时是动脉还是静脉以及是否为血管壁难辨认时,弹力纤维染色有助于辨认。有弹力板者为动脉,有弹力纤维构成血管轮廓者为血管。弹力纤维抗损伤能力较强,故弹力性纤维构成血管轮廓不易损坏。
(2)弹力纤维瘤的诊断:弹力纤维染色可见瘤样病变内有大量弹力纤维增生,非真性**。
(3)心血管先天性弹力组织增生,这组疾病有先天性内膜炎及冠状动脉的弹力纤维组织增生。弹力纤维染色有助于诊断。
(4)弹力纤维损伤性疾病:这组疾病有肺气肿、***、大动脉中层炎症等,弹力纤维染色有助于这些疾病的观察诊断。
(5)一些与弹力纤维变化有关的皮肤疾病的诊断与鉴别诊断:这组疾病有皮肤松弛症,萎缩性硬化性苔藓等,其诊断与鉴别诊断常依赖于弹力纤维染色,以观察弹力纤维变化。 三氯醋酸三氯化铁法:将胆色素和其他物质染色;胆色素绿色,其他呈复染的红色和黄色。
脂肪染色剂
苏丹Ⅲ染液
取0.1克苏丹Ⅲ,溶于20毫升95%酒精中,即成0.5%苏丹Ⅲ染液。
这染液能染脂肪,还能染木栓、角质层。
血液染色剂
配方一、瑞氏 (Wright's)染液
取瑞氏染料粉末0.1克和甲醇60毫升。把染料放在研钵内,加少量甲醇研磨,使染料溶解,然后把溶解的染料倒入干净的棕色玻璃瓶。并用完甲醇为止。配制好的染液在室温中保存,即可使用。
新鲜配制的染液偏碱性,放置后呈酸性,染液贮存愈久染色愈好。这染液的适宜pH值是6.4~6.8。因此,染色时加入缓冲液,可维持一定的酸碱度,使染色效果更好。
这种染液除能染血液,还能染疟原虫。
瑞氏染料可以自制。在100是升05%碳酸氢钠水溶液里加入1克美蓝,溶解后放在锅内,蒸上1小时,取出冷却后过滤在滤液里加入0.1%伊红水溶液500毫升。随加、随搅拌,使混合液呈紫色。
静置一夜后,用滤纸过滤。滤纸上的沉淀物,在室内风干或放在干燥箱内,充分干燥后研磨成粉末,即成瑞氏染料。
配方二、甲基紫染液
取甲基紫0.5克,加到100毫升生理盐水中,溶解后加入冰醋酸0.02毫升。 银氨染色法:将网状纤维,胶原纤维双重染色;网状纤维呈黑色,胶原纤维呈红色,背景呈黄色。江苏PAS染色步骤
阿尔辛蓝(AB)染色法:唾液酸及若硫酸化黏液物资以及一般黏液蓝色,细胞核红色。其他不着色或淡染。山东双色染色步骤
细胞核染色剂(1)配方一、甲基绿染液
取1克甲基绿,溶于99毫升蒸馏水中,加入1毫升冰醋酸。本染液能染细胞核,还用来染木质化细胞壁。
配方二、龙胆紫染液
取1克龙胆紫,溶于少量2%醋酸溶液中,加2%醋酸溶液,直到溶液不呈深紫色止。
配方三、美蓝(亚甲基蓝)染液
取0.5克美蓝,溶于30毫升95%酒精中,加100毫升0.01%氢氧化钾溶液,保存在棕色瓶此溶液能染细胞核,还用来染细菌、血和神经组织等。
配方四、硼砂-洋红染液
取4克硼砂,溶于96毫升蒸馏水中。再加入2克洋红,加热溶解后煮沸30分钟,静置3日,用100毫升70%酒精冲淡,放置24小时后过滤。
此染液能染细胞核,还用来染糊粉粒和一般动物、植物的整体染色,如水螅、血吸虫等整体标本。
配方五、德氏(Delafield’s)苏木精染液
甲液:取1苏木精,溶于6毫升无水酒精中,即成苏木精-酒精溶液。
乙液:取10克铵矾溶于90毫升蒸馏水中,即成10%铵矾水溶液。
取甲液逐滴加入到乙液中,用纸遮盖,放在阳光明亮处,使它充分氧化。3~4天后将溶液过滤,在滤液中加入25毫升甘油和25毫升甲醇,保存在密闭玻璃瓶内。静置1~2个月,待该液颜色变深时过滤,可长久保存。本染液是染色体的优良染色剂,除能染细胞核外,还用来染纤维素、细胞壁和动植物组织。山东双色染色步骤
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