细菌特殊染色剂配方一、芽孢染液用此配方染色是用甲液染色后,用乙液复染。
甲液:取5克孔雀绿,加入少量蒸馏水,使它溶解后,用蒸馏水稀释到100毫升,即成孔雀绿染液。
乙液:取番红花红0.5克,加入少量蒸馏水,使它溶解后,用蒸馏水稀释到100毫升,集成番红花红复染液。
配方二、荚膜染液此配方先用甲液染色,后用乙液复染。
甲液:取结晶紫0.1克,溶于少量蒸馏水后,加水稀释到100毫升,再加入0.25毫升冰醋酸一结晶紫染液。
乙液:取硫酸铜(31.3克),溶于少量蒸馏水后,加水稀释到100毫升,即成20%硫酸铜脱色剂。
配方三、鞭毛染液
甲液
饱和明矾溶液2毫升5%石炭酸溶液5毫升
20%丹宁酸溶液2毫升
乙液
碱性品红11克95%酒精100毫升
使用前取甲液9毫升和乙液1毫升相混,过滤即可。 镀银染色是神经元和神经纤维的主要染色法。黑龙江甲苯胺蓝染色评价
细菌染色剂配方一、齐氏(Zieh1)石炭酸品红染液
甲液:取石炭酸5克,溶解在95毫升蒸馏水中。
乙液:取03克碱性品红,放入研钵中研磨,逐渐加入10毫升95%酒精,继续淹役,使它溶解。
将甲液和乙液混合后,摇匀,过滤,装瓶,备用。
配方二、罗氏(loffler's)美蓝染液
甲液:取S克美蓝,溶于100毫升95%6酒精中,制成美蓝一酒精饱和液。
乙液:取氢氧化钾0.01克(或1%氢氧化钾溶液1毫升),溶液也可用于放线菌染色,0.1%浓度可用于酵母菌染色。
配方三、革兰氏(Gram's)染液
用此液染色因先用甲液染色,再加乙液固定,丙液处理,***用丁液复染。四种液体的配方如下:
甲液:结晶紫液
(1)结晶紫2克95%酒精20升
(2)草酸铵0.8克蒸馏水80毫升
使用前将(1)、(2)液轻摇混匀,静置48小时后使用。
乙液:碘液
碘1克碘化钾2克蒸馏水300毫升
将碘化钾溶于少量蒸馏水中,然后加入碘,待碘全部溶解后,加水稀释至300毫升。
丙液:95%酒精溶液
丁液:番红花红液
2.5%番红花红酒精溶液10毫升蒸馏水100毫升。 黑龙江甲苯胺蓝染色评价Gram碱性复红结晶紫法将革兰氏阴性菌,革兰氏阳性菌双重染色;革兰阳性细菌蓝色,阴性红色,细胞核红色。
甲基绿派洛宁法:1、试剂配制:(1)2%甲基绿水溶液:甲基绿(methylgreen)1g蒸馏水加至50ml用三氯甲烷抽提,方法详后。(2)5%派洛宁水溶液:派洛宁G(pyronineG)1g蒸馏水加至20ml(3)醋酸盐缓冲液(pH)醋酸液41ml醋酸钠液59ml(4)甲基绿派洛宁染液:2%甲基绿水溶液(经抽提)5ml5%派洛宁水溶液1ml蒸馏水12ml醋酸盐缓冲液(pH)18ml2、操作步骤:(1)新鲜组织固定于Carnoy氏液(4℃)3~6小时,经95%酒精和无水酒精脱水,二甲苯透明,石蜡包埋。(2)切片经二甲苯脱蜡至蒸馏水。(3)置入甲基绿派洛宁染液于室温染30~60分钟。(4)取出切片,不经水洗,用滤纸吸干多余染液。(5)用**迅速分化。(6)转入**二甲苯(1:1)稍洗。(7)二甲苯透明2~3次。(8)中性树胶封固。结果:存在于胞质和核仁内的核糖核酸呈红紫色,胞核染色质内的脱氧核糖核酸绿色或绿蓝色。3、对照方法:(1)取另一连续切片用核糖核酸酶1mg/1ml于37℃温箱内消化3小时,蒸馏水洗后置入甲基绿派洛宁染液内染色。(2)切片在10%高氯酸于4℃处理12~18小时,水洗后用1%碳酸钠液中和2分钟,流水冲洗5分钟,再用蒸馏水洗后置入甲基绿派洛宁染液内染色。经上述方法之一处理后的切片就为阴性。
常规HE染色步骤:
A.二甲苯(Ⅰ)15min
B.二甲苯(Ⅱ)15min
C.二甲苯:无水乙醇=1:12min
D.100%乙醇(Ⅰ)5min
E.100%乙醇(Ⅱ)5min
F.80%乙醇5min
G.蒸馏水5min
H.苏木**染色5min
I.水洗10min或流水冲洗5min
J.1%盐酸乙醇30s
K.水洗30s
L.蒸馏水过洗5s
M.0.5%伊红液染色1-3min
N.蒸馏水稍洗30s
O.80%乙醇稍洗30s
P.95%乙醇(Ⅰ)1min
Q.95%乙醇(Ⅱ)1min
R.无水乙醇(Ⅰ)3min
S.无水乙醇(Ⅱ)3min
T.二甲苯(Ⅰ)3min
U.二甲苯(Ⅱ)3min
V.中性树胶封固 透明骨骼标本染色剂配方一:茜素红染液(Ⅰ) 取冰醋酸5毫升、甘油5毫升、1%水合氯醛60毫升混合。
四川扬克斯特为您介绍病原微生物染色。
***和霉菌:***引起的病变虽然多种多样,但都不具有特异性,且***在HE染色中均显蓝色,故须作***染色。
应用:
在化脓性炎、坏死性化脓性炎及肉芽组织性化脓性炎或化脓性炎伴有巨细胞反应疑为霉菌***时,找到霉菌的菌丝、抱子及菌体即诊断为霉菌性炎。
细菌: 细菌在HE染色上不能分类,故须作细菌染色。
(1)一些疑为细菌***性炎症,可用细菌染色进一步确定病原诊断。如伤寒肉芽肿性炎或葡萄球菌性炎等化脓性炎症的诊断中细菌染色有很重要的诊断价值。
(2)风病与结核病:均由菌体表面含蜡质膜的抗酸杆菌所***形成,故须经抗酸染色才能着色,从而与其它疾病相鉴别。
中文名:masson染色,释义:用两种或三种阴离子染料混合,作用:显示组织中纤维的染色方法。江西甲苯胺蓝染色效果
苏木素VG法:细胞灰黑色,髓鞘灰白色,胶原红色,肌纤维黄色,***细胞浆琥珀黄色,胶质纤维琥珀色。黑龙江甲苯胺蓝染色评价
油红染色法油红作为脂肪染色剂,其染色步骤简便,染色结果肯定,脂肪染色切片效果优于苏丹IV。
试剂配制:
油红O:0.5g
异丙醇(含量98%):100ml
此为油红饱和液,可长期保存备用。
染色步骤:
(1)冻切片
(2)蒸馏水充分洗涤。
(3)油红稀释液染10-15分钟,避光、密封。油红稀释液的配制:
(4)取油红饱和液6毫升,加蒸馏水4毫升,静置5-10分钟后过滤后使用。
(5)60%乙醇镜下分化至间质清晰。
(6)水洗
(7)Marry氏苏木素复染核。
(8)水洗
(9)甘油或甘油明胶封片。
结果:脂肪呈鲜红色,细胞核呈蓝色,间质无色。 黑龙江甲苯胺蓝染色评价
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