四川扬克斯特为您介绍多色染色法示例:
(1)一、Mallory三色染色法(染结缔组织)
1.试剂配制
(1)重铬酸钾液
重铬酸钾2.5g;醋酸5m1,蒸馏水95ml
(2)苯胺蓝桔黄G液苯胺蓝0.5g,桔黄G2g,磷钨酸1g,蒸馏水100m1
(3)酸性复红液酸性复红0.5g,蒸馏水100ml
2.染色步骤
(1)中性甲醛液固定组织,石蜡切片,常规脱蜡至水。
(2)重铬酸钾液10mino
(3)蒸馏水冲洗2min,蒸馏水2次。
(4)酸性复红液2min,蒸馏稍洗。
(5)苯胺蓝液20min,95%乙醇快速分化。
(6)直接用无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。
3.结果
胶原和网状纤维呈蓝色,软骨、粘液、淀粉样变物质呈淡蓝色:神经胶质纤维、
肌纤维和酸性颗粒呈红色,髓鞘和红色呈桔红色。
4.注意事项
(1)酸性复红液易溶解于水,肉眼观察切片上保留一定的红色。
(2)苯胺蓝液染色后,用95%乙醇分化时,须用显微镜观察掌握。
(3)对陈旧的固定标本,其染色效果较差,可增加染色时间。
(4)另张切片,可同时作胶原纤维对照染色而进行鉴别组织成分。 美蓝染料***染色时,由于活细胞代谢过程中的脱氢作用,美蓝接受H后就由氧化转变为还原态,故表现出无色。黑龙江HE染色原理
神经原纤维呈细线状,存在于神经细胞体及树突中,它们形成一个稠密的网状,轴突中的原纤维也互相交织在一起,且伸延至轴突全长。在HE染色中呈粉红色,难与胶原纤维相区别,故须作神经纤维染色。
应用:
(1)有利于观察神经原纤维的损伤。
(2)神经系统**的鉴别与诊断:如神经母细胞瘤与未分化*的区别等。
细胞质染色剂配方一、伊红染液:伊红染液一般配用水溶液和酒精溶液两种。
(1)取1g伊红,溶于99毫升蒸馏水中,即成1%伊红水溶液(市售红墨水内含伊红成分,可以用红墨水稀释液来代替本溶液)。
(2)取1g伊红,溶于99毫升70%酒精中,即成1%伊红-酒精溶液。
配方二、甲基蓝染液
取1g甲基蓝,溶于29毫升70%酒精中,加入70毫升蒸馏水,即成1%甲基蓝染液。
配方三、亮绿染液
取0.5克亮绿,溶解在100毫升蒸馏水中,即成0.5%亮绿溶液。 贵阳单色染色方法阿尔辛蓝(AB)染色法:唾液酸及若硫酸化黏液物资以及一般黏液蓝色,细胞核红色。其他不着色或淡染。
染色体染色剂:配方一、醋酸-洋红染液
取45ml冰醋酸,加蒸馏水55ml,煮沸后徐徐加入洋红1g,搅拌均匀后加入1颗铁锈钉,煮沸10min,冷却后过滤,贮存在棕色瓶内。
配方二、醋酸-地衣红染液
取45ml醋酸,跟55ml蒸馏水相混,加热,徐徐加入地衣红粉末1~2g,搅拌溶解后,缓缓煮沸2小时,冷却后过滤,贮存在棕色瓶里。
配方三、龙胆紫染液
取1g龙胆紫,用少量蒸馏水溶解后,加蒸馏水,稀释到100ml,保存在棕色瓶内。
配方四、甲苯胺蓝染液
取0.5g甲苯胺蓝,溶解在100ml蒸馏水中,即成0.5%甲苯胺蓝水溶液。
实验室常用人工染料(6)亚甲蓝或美蓝:
亚甲蓝或美蓝是碱性染料,呈蓝色粉末状,能溶于水(溶解度9.5%)和酒精(溶解度6%)。亚甲蓝是动物学和细胞学染色上十分重要的细胞核染料,其优点是染色不会过深。
甲基绿:
甲基绿是碱性染料。它是绿色粉末状,能溶于水(溶解度8%)和酒精(溶解度3%)。甲基绿是**有价值的细胞和染色剂,细胞学上常用来染染色质,跟酸性品红一起可作植物木质部的染色。
用这些染料配备而成的染液有很多,例如:吕氏(Loeffer)碱性美蓝染液,齐氏(ziehl)石炭酸复红染液等。 地衣红法:将HBsAg染色;HBsAg阳性呈棕色。
HE染色原理(1)易于被碱性或酸性染料着色的性质称为嗜碱性(basophilia)和嗜酸性(acidophilia);而对碱性染料和酸性染料亲和力都比较弱的现象称为中性(neutrophilia)。
构成组织内蛋白质的氨基酸的种类很多,它们有不同的等电点。在普通染色法中,染色液的酸碱度为ph6左右,细胞内的酸性物质如细胞核的染色质、腺细胞和神经细胞内的粗面内质网及透明软骨基质等均被碱性染料染色,这些物质称为嗜碱性。而细胞质中的其它蛋白质如红细胞中的血红蛋白、嗜酸粒细胞的颗粒及胶原纤维和肌纤维等被酸性染料染色,这些物质称为嗜酸型。如果改变染色液的酸碱度,ph值升高时,则原来被酸性染料染色的物质可变为嗜碱性;ph值降低时,原来被碱性染料染色的物质则可变为嗜酸性。所以说染色液的ph值可以影响染色的反应。罗丹明染色法:铜沉积物-砖红色,核-蓝色,胆汁-绿色。江苏番红固绿染色质量
苏丹Ⅲ染色法:将脂肪和细胞核染色,遇脂肪变橘黄色,细胞核呈蓝色。黑龙江HE染色原理
多色染色法示例:Masson三色染色法
1.试剂配制
(1)Masson复合染色液
酸性复红1g,丽春红2g,桔黄G2g,醋酸300ml。
(2)亮绿染色液高绿SF0.1g,醋酸100ml。
2.染色步骤
中性甲醛液固定组织,石蜡切片,常规脱蜡至水。
(1)Masson复合染色液5min。
(2)醋酸水溶液稍洗。
(3)5%磷钨酸5-10min。
(4)醋酸水溶液浸洗2次。
(5)亮绿染色液5min,醋酸水洗2次。
(6)无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。
3.结果
胶原纤维呈绿色,肌纤维呈红色,红细胞呈桔红色。
4.注意事项
(1)Masson复合染色液,经磷钨酸分化时须用显微镜控制肌纤维清晰为止。
(2)亮绿染料可用苯胺蓝替换,可用来作为对比观察染色的效果。 黑龙江HE染色原理
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