Masson染色法试剂:Regaud氏苏木精:苏木精1g,95%酒精10ml,甘油10ml,蒸馏水80ml将苏木精加入蒸馏水内加温溶解,冷却后加入酒精和甘油,放数日后即可应用Masson丽春红酸性复红液:丽春红,酸性复红,蒸馏水99ml,冰醋酸1ml:冰醋酸ml,蒸馏水100ml1%磷钼酸水溶液:磷钼酸1g,蒸馏水100ml苯胺蓝水溶液:苯胺蓝2g,蒸馏水98ml,冰醋酸2ml1%光绿水溶液:光绿1g,蒸馏水100ml步骤:1.石蜡切片脱蜡至水2.铬化处理或去汞盐沉淀(甲醛固定的组织此步可略)3.依次自来水和蒸馏水洗4.用Regaud苏木精染液或Weigert苏木**染核5-10min5.充分水洗,如过染可盐酸酒精分化6.蒸馏水洗7.用Masson丽春红酸性复红液5-10min8.2%冰醋酸水溶液浸洗片刻9.1%磷钼酸水溶液分化3-5min10.不经水洗,直接用苯胺蓝或光绿液染5min11.以12.95%酒精、无水酒精、二甲苯透明、中性树胶封固结果:胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色(如光绿液染色为绿色),胞浆、肌肉、纤维素、神经胶质呈红色,胞核黑蓝色。注意事项:1.组织固定起着很重要的作用,根据不同的固定液可延长或缩短染色时间2.磷钼酸水溶液对丽春红、酸性复红有分化作用,分化时镜下控制,肌纤维和纤维素呈红色,胶原纤维呈淡粉红色即可。 苯酚碱性品红法:使抗酸杆菌的糖脂蜡质与碱性品红结合形成复合物,从而使抗酸杆菌呈红色。甘肃masson染色方法
切片的载玻片和盖玻片有什么区别?
载玻片是用来放被测标本的,而盖玻片是盖在被测标本之上的。
1.载玻片在下边,是你要观察版的物质的盛放载体权,就是你要把东西放你它上面。
2.盖玻片比载玻片要小,载玻片主要用来盛放观察物,盖玻片是盖在载玻片上的,用做固定用的。
3.载玻片是转片中的比较厚的一块玻璃片,是用来承载实物的;盖玻片是那个小的圆的或者方/薄 的。
4.装片是一套东西的总称,包括载玻片、盖玻片和装载的实物。
5.盖玻片正方形,载玻片长方形,且宽度都较盖玻片的边长大。
载玻片和盖玻片如何清洗?
载玻片是一直泡75%酒精,用的时候才拿出来晾干或者烧干酒精就用,不会有什么灰尘;盖玻片是一次性的,用完就扔了。
浙江荧光染色评价维多利亚蓝法:将HBsAg阳性,细胞核双重染色;HBsAg阳性呈蓝绿色,细胞核红色。
实验室常用人工染料(5)中性红:
中性红是弱碱性染料,呈红色粉末状,能溶于水(溶解度4%)和酒精(溶解度1.8%)。它的碱性溶液中呈现黄色,在强碱性溶液中呈蓝色,而在弱酸性溶液中呈红色,所以能用作指示剂。中性红无毒,常做***染色的染料,用来染原生动物和显示动植物组织中活细胞的内含物等。陈久的中性红水溶液,用作显示尼尔体的常用染料。
番红:
番红是碱性染料,能溶于水和酒精。番红是细胞学和动植物组织学生常用的染料,能染细胞核、染色体和植物蛋白质,示维管束植物木质化、木栓化和角质化的组织,还能染孢子囊。
色素染色(含铁血黄素及黑色素):
含铁血黄素是由漏出于血管外的红细胞,被巨噬细胞吞噬后,分解血红蛋白产生的颗粒,HE染色为棕黄色,故称为含铁血黄素。因有时与福尔马林沉渣及黑色素等难相区别,故做含铁血黄素染色。
应用:
主要用于同其它色素鉴别,若为阳性,显示陈旧性出血。黑色素常见于皮肤色素细胞,恶性黑色素瘤常可产生黑色素。组织内大量存在时呈棕黑色,易于鉴别。但少量存在时便难与其它色素相鉴别,须作黑色素染色。
黑色素瘤的诊断与鉴别诊断:**细胞内色素是否为黑色素,染黑色素有助于确定黑色素性质及**的定性诊断。
血色病与黑便病:皮革内有色素沉着,黑色素阴性而含铁血黄素阳性者可能为前者。 美蓝染料***染色时,由于活细胞代谢过程中的脱氢作用,美蓝接受H后就由氧化转变为还原态,故表现出无色。
多色染色法示例:Masson三色染色法
1.试剂配制
(1)Masson复合染色液
酸性复红1g,丽春红2g,桔黄G2g,醋酸300ml。
(2)亮绿染色液高绿SF0.1g,醋酸100ml。
2.染色步骤
中性甲醛液固定组织,石蜡切片,常规脱蜡至水。
(1)Masson复合染色液5min。
(2)醋酸水溶液稍洗。
(3)5%磷钨酸5-10min。
(4)醋酸水溶液浸洗2次。
(5)亮绿染色液5min,醋酸水洗2次。
(6)无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。
3.结果
胶原纤维呈绿色,肌纤维呈红色,红细胞呈桔红色。
4.注意事项
(1)Masson复合染色液,经磷钨酸分化时须用显微镜控制肌纤维清晰为止。
(2)亮绿染料可用苯胺蓝替换,可用来作为对比观察染色的效果。 masson染色用来显示组织中纤维以及炎性因子的染色方法之一。贵阳荧光染色评价
硝酸银染色法:将胃幽门螺杆菌染色;胃幽门螺杆菌棕黑或黑色,背景淡黄色。甘肃masson染色方法
冷冻切片HE染色步骤:(1)冰冻切片固定10~30s
(2)稍水洗1~2s
(3)苏木**染色(60℃)30~60s
(4)流水洗去苏木**5~10s
(5)1%盐酸乙醇1~3s
(6)稍水洗1~2s
(7)促蓝液返蓝5~10s
(8)流水冲洗15~30s
(9)0.5%曙红液染色30~60s
(10)蒸馏水稍洗1~2s
(11)80%乙醇1~2s
(12)95%乙醇1~2s
(13)无水乙醇1~2s
(14)石炭酸二甲苯2~3s
(15)二甲苯(Ⅰ)2~3s
(16)二甲苯(Ⅱ)2~3s
(17)中性树胶封固
注:第(14)步如果不用石炭酸二甲苯,可改用无水乙醇。
染色结果:细胞核蓝色,胞质、肌纤维、胶原纤维和红细胞呈深浅不一的红色。
注意事项:
切片脱水透明,切片经HE染色后,要彻底脱水透明,才能用中性树胶封盖。如果脱水不彻底,封片后呈白色雾状,镜下观察模糊不清,且容易褪色。切片1-2级无水乙醇脱水,也可使用石炭酸二甲苯进行脱水。石炭酸有较强脱水能力,但长时间可使切片脱色,因此要经过多次二甲苯以使石碳酸完全除去。 甘肃masson染色方法
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