常规HE染色步骤:
A.二甲苯（Ⅰ）15min
B.二甲苯（Ⅱ）15min
C.二甲苯：无水乙醇=1:12min
D.100%乙醇（Ⅰ）5min
E.100%乙醇（Ⅱ）5min
F.80%乙醇5min
G.蒸馏水5min
H.苏木**染色5min
I.水洗10min或流水冲洗5min
J.1%盐酸乙醇30s
K.水洗30s
L.蒸馏水过洗5s
M.0.5%伊红液染色1-3min
N.蒸馏水稍洗30s
O.80%乙醇稍洗30s
P.95%乙醇（Ⅰ）1min
Q.95%乙醇（Ⅱ）1min
R.无水乙醇（Ⅰ）3min
S.无水乙醇（Ⅱ）3min
T.二甲苯（Ⅰ）3min
U.二甲苯（Ⅱ）3min
V.中性树胶封固 PAS染色原理：过碘酸能使细胞内多糖乙二醇基氧化成二醛，再与Schiff氏液无色品红结合呈红色定位于胞浆上。陕西PAS染色评价
天狼星红的染色法原理是什么？
原理利用胶原分子与强酸性染料天狼星红结合一起后加强双折光现象，使不同颜色和形态的胶原纤维得以区分。
胶原纤维（collagenousfiber）在三种纤维中数量**多，新鲜时呈白色，有光泽，故又名白纤维。在HE染色切片中呈嗜酸性，粗细不等，直径0.5~10um，呈波浪形，有分支并交织呈网，胶原纤维的生化成分为I型胶原蛋白。
胶原蛋白（collagen）由纤维细胞分泌，于细胞外聚合成胶原原纤维，经少量黏合成胶原纤维。胶原纤维是三种纤维中分布*****的一种纤维，***分布于各脏器内，它在皮肤、巩膜和肌腱**为丰富。
胶原纤维在上述的两种方法中着染不同的颜色，如V.G着染红色，Masson氏着染蓝色或绿色。
这主要取决于染料对组织的渗透、吸附、沉淀和反应，而染料分子量的大小是关键，分子量小的分子移动迅速，行动快，对组织的渗透性较强，能穿透较为致密的组织。 吉林荧光染色评价砂罗铬花青法：髓鞘呈鲜蓝色，细胞核呈深蓝色，胶原纤维呈粉红色。
植物相关常用染色方法（1）：(1)淀粉类：淀粉是植物的主要贮藏物质，它们在各种不同的植物细胞中形成各种形状小同的颗粒。由于碘与淀粉作用可形成碘化淀粉而呈蓝色反应，用碘－碘化钾溶液来测试淀粉粒已成为**常用的方法。
(2)蛋白质类：植物细胞中的蛋白质是构成原生质体的主要成分，也可成为后含物贮存于细胞内，可能是无定形的，也可能成为结晶体或成为糊粉粒。
①较普遍的方法是用碘化钾染色，显微镜下观察可看到被染成黄色的圆球状小颗粒，即为储藏蛋白质的糊粉粒。
②**－溴酚蓝法是检测糊粉粒的**普通方法：在切片上滴加**－溴酚蓝试剂（**10g,溴酚蓝1mg,蒸馏水100ml)1滴，过5分钟后，用0.5%的醋酸冲洗，除去切片上多余的染料，再放在培养皿中水洗5分后用甘油封藏，细胞中如有糊粉粒则被染成鲜蓝色。
③曙红－酒精－苦味酸法也是显示糊粉粒的较好方法：在切片上滴上曙红－酒精－苦味酸试剂（配方曙红1g,溶于苦味酸的95%酒精饱和溶液50ml),镜检，当糊粉粒的基质现出蓝色时，加上数滴纯酒精，此时糊粉粒中球蛋白无色而结晶现出黄绿色，吸去多余酒精，用丁香油透明，加拿大树胶封固，**终蛋白质结晶应为黄色，球蛋白为粉红色，基质为暗红色。
Masson染色法试剂：Regaud氏苏木精：苏木精1g，95%酒精10ml，甘油10ml，蒸馏水80ml将苏木精加入蒸馏水内加温溶解,冷却后加入酒精和甘油,放数日后即可应用Masson丽春红酸性复红液：丽春红，酸性复红，蒸馏水99ml，冰醋酸1ml：冰醋酸ml，蒸馏水100ml1%磷钼酸水溶液：磷钼酸1g，蒸馏水100ml苯胺蓝水溶液：苯胺蓝2g，蒸馏水98ml，冰醋酸2ml1%光绿水溶液：光绿1g，蒸馏水100ml步骤：1．石蜡切片脱蜡至水2．铬化处理或去汞盐沉淀（甲醛固定的组织此步可略）3．依次自来水和蒸馏水洗4．用Regaud苏木精染液或Weigert苏木**染核5-10min5．充分水洗,如过染可盐酸酒精分化6．蒸馏水洗7．用Masson丽春红酸性复红液5-10min8．2%冰醋酸水溶液浸洗片刻9．1%磷钼酸水溶液分化3-5min10．不经水洗,直接用苯胺蓝或光绿液染5min11．以12．95%酒精、无水酒精、二甲苯透明、中性树胶封固结果：胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色（如光绿液染色为绿色），胞浆、肌肉、纤维素、神经胶质呈红色，胞核黑蓝色。注意事项：1．组织固定起着很重要的作用，根据不同的固定液可延长或缩短染色时间2．磷钼酸水溶液对丽春红、酸性复红有分化作用，分化时镜下控制，肌纤维和纤维素呈红色，胶原纤维呈淡粉红色即可。 美蓝染色法：美蓝是常用的***染色染料，当它处于氧化状态是呈现出蓝色，而还原态时为无色。
四川扬克斯特为您介绍病原微生物染色。
***和霉菌：***引起的病变虽然多种多样，但都不具有特异性，且***在HE染色中均显蓝色，故须作***染色。
应用：
在化脓性炎、坏死性化脓性炎及肉芽组织性化脓性炎或化脓性炎伴有巨细胞反应疑为霉菌***时，找到霉菌的菌丝、抱子及菌体即诊断为霉菌性炎。
细菌： 细菌在HE染色上不能分类，故须作细菌染色。
（1）一些疑为细菌***性炎症，可用细菌染色进一步确定病原诊断。如伤寒肉芽肿性炎或葡萄球菌性炎等化脓性炎症的诊断中细菌染色有很重要的诊断价值。
（2）风病与结核病：均由菌体表面含蜡质膜的抗酸杆菌所***形成，故须经抗酸染色才能着色，从而与其它疾病相鉴别。
三氯醋酸三氯化铁法：将胆色素和其他物质染色；胆色素绿色，其他呈复染的红色和黄色。昆明单色染色原理
高碘酸复红法：将***和红细胞双重染色；***紫红色，红细胞浅黄色。陕西PAS染色评价
吸虫染色剂
梅耶氏(Mayer' s )明矾-洋红染液
取铵明矾(硫酸铝铵) 5克，溶于95毫升蒸馏水中，再加入0.5克洋红酸，加热溶解，冷却后过滤。在滤液中加入少量防腐剂，如麝香草酚、樟脑粉、水杨酸钠、苯酚(石炭酸)等，以防生霉。
这种染液适合于染小型动物材料，如吸虫等寄生虫的整体，也能染高等植物的表皮和蕨类植物的原叶体。
***染色剂
配方一、中性红染液.
先配成1%中性红水溶液(1克中性红溶于100毫升蒸馏水中)。取这种溶液1毫升，用0.6%生理盐水(或蒸馏水)稀释到50毫升，即成0.02%中性红水溶液，贮存在棕色瓶里，放在黑暗处。
本染液用来显示原生动物的食物泡以及动植物组织中活细胞的内含物等。
配方二、尼罗蓝(Nile Blue)染液
取0.1克尼罗蓝，溶解于1000~1500毫升蒸馏水中，即成尼罗蓝染液。
这种染液能把原生动物大核染成绿色，食物泡染成蓝色。
配方三、亚甲蓝染液
取0.1克亚甲蓝，溶解于1000毫升蒸馏水中，即成亚甲蓝染液。
这种染液用于原生动物的***染色。 陕西PAS染色评价
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