四川扬克斯特为您介绍多色染色法示例:
(1)一、Mallory三色染色法(染结缔组织)
1.试剂配制
(1)重铬酸钾液
重铬酸钾2.5g;醋酸5m1,蒸馏水95ml
(2)苯胺蓝桔黄G液苯胺蓝0.5g,桔黄G2g,磷钨酸1g,蒸馏水100m1
(3)酸性复红液酸性复红0.5g,蒸馏水100ml
2.染色步骤
(1)中性甲醛液固定组织,石蜡切片,常规脱蜡至水。
(2)重铬酸钾液10mino
(3)蒸馏水冲洗2min,蒸馏水2次。
(4)酸性复红液2min,蒸馏稍洗。
(5)苯胺蓝液20min,95%乙醇快速分化。
(6)直接用无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。
3.结果
胶原和网状纤维呈蓝色,软骨、粘液、淀粉样变物质呈淡蓝色:神经胶质纤维、
肌纤维和酸性颗粒呈红色,髓鞘和红色呈桔红色。
4.注意事项
(1)酸性复红液易溶解于水,肉眼观察切片上保留一定的红色。
(2)苯胺蓝液染色后,用95%乙醇分化时,须用显微镜观察掌握。
(3)对陈旧的固定标本,其染色效果较差,可增加染色时间。
(4)另张切片,可同时作胶原纤维对照染色而进行鉴别组织成分。 中文名:masson染色,释义:用两种或三种阴离子染料混合,作用:显示组织中纤维的染色方法。山东多色染色原理
实验室常用人工染料:(1)人工染料:即苯胺染料或煤焦油染料,种类很多,应用极广。它们的缺点是经日光照射容易褪色,苯胺蓝、亮绿、甲基绿等更易褪色。在制片中注意掌握酸碱度,并避免日光直射,也能经几年不褪色。
1、酸性品红
酸性品红是酸性染料,呈红色粉末状,能容于水,略溶于酒精(0.3%)。 他是良好的细胞制染色剂,在动物制片上应用很广,在植物制片上用来染皮层、髓部等薄壁细胞和纤维素壁。他跟甲基绿同染,能显示线粒体。
组织切片在染色前先浸在带酸性的水中,可增强它的染色力。酸性品红容易跟碱起作用,所以染色过度,易在自来水中褪色。
2、刚果红
刚果红是酸性染料,呈枣红色粉末状,能溶于水喝酒精,遇酸呈蓝色。他能作染料,也用作指示剂。他在植物制片中常作为苏木精或其他细胞染料的衬垫剂。他用来染细胞质时,能把胶制或纤维素染成红色。在动物组织制片中用来染神经轴、弹性纤维、胚胎材料等。刚果红可以跟苏木静作二重染色,也可用作类淀粉染色,由于他能溶于水和酒精,所以洗涤和脱水处理要迅速。 贵州流式染色方法masson染色用来显示组织中纤维以及炎性因子的染色方法之一。
染色体染色剂:配方一、醋酸-洋红染液
取45ml冰醋酸,加蒸馏水55ml,煮沸后徐徐加入洋红1g,搅拌均匀后加入1颗铁锈钉,煮沸10min,冷却后过滤,贮存在棕色瓶内。
配方二、醋酸-地衣红染液
取45ml醋酸,跟55ml蒸馏水相混,加热,徐徐加入地衣红粉末1~2g,搅拌溶解后,缓缓煮沸2小时,冷却后过滤,贮存在棕色瓶里。
配方三、龙胆紫染液
取1g龙胆紫,用少量蒸馏水溶解后,加蒸馏水,稀释到100ml,保存在棕色瓶内。
配方四、甲苯胺蓝染液
取0.5g甲苯胺蓝,溶解在100ml蒸馏水中,即成0.5%甲苯胺蓝水溶液。
甲苯胺蓝染色法 :1. 甲苯胺蓝液
甲苯胺蓝0.5g蒸馏水定容至100ml
2. 冰醋酸液
冰醋酸0.5ml蒸馏水定容至100ml
染色步骤:
1.组织切片常规脱蜡至水
2.入甲苯胺蓝液30min
3.稍水洗
4.入冰醋酸液分化,直到胞核和颗粒清晰。
5.稍水洗,用冷风吹干
6.二甲苯透明,中性树胶封固
(二)
①切片脱腊至水。
②蒸馏水浸洗3次。
⑤0.1%甲苯胺蓝液浸染10min。
④水洗,洗去多余染液。
⑤各级酒精脱水。
⑥二甲苯透明,中性树胶封固。
试剂的配制
称取0.1g甲苯胺蓝,溶于100ml 0.1M 醋酸盐缓冲液中,置室温5天后,即可使用染液于室温下可保存3个月,若放于4℃水箱则可保存半年左右,但该液的染色效果在早期为比较好,若染液存放时间较长,则染色偏淡,应适应延长染色时间。 切片中,载玻片是用来放被测标本的,而盖玻片是盖在被测标本之上的。
弹力纤维染色应用:
(1)动静脉的辨认:在血管病变时是动脉还是静脉以及是否为血管壁难辨认时,弹力纤维染色有助于辨认。有弹力板者为动脉,有弹力纤维构成血管轮廓者为血管。弹力纤维抗损伤能力较强,故弹力性纤维构成血管轮廓不易损坏。
(2)弹力纤维瘤的诊断:弹力纤维染色可见瘤样病变内有大量弹力纤维增生,非真性**。
(3)心血管先天性弹力组织增生,这组疾病有先天性内膜炎及冠状动脉的弹力纤维组织增生。弹力纤维染色有助于诊断。
(4)弹力纤维损伤性疾病:这组疾病有肺气肿、***、大动脉中层炎症等,弹力纤维染色有助于这些疾病的观察诊断。
(5)一些与弹力纤维变化有关的皮肤疾病的诊断与鉴别诊断:这组疾病有皮肤松弛症,萎缩性硬化性苔藓等,其诊断与鉴别诊断常依赖于弹力纤维染色,以观察弹力纤维变化。 透明骨骼标本染色剂配方一:茜素红染液(Ⅰ) 取冰醋酸5毫升、甘油5毫升、1%水合氯醛60毫升混合。天津HE染色原理
Gram碱性复红结晶紫法将革兰氏阴性菌,革兰氏阳性菌双重染色;革兰阳性细菌蓝色,阴性红色,细胞核红色。山东多色染色原理
色素染色(含铁血黄素及黑色素):
含铁血黄素是由漏出于血管外的红细胞,被巨噬细胞吞噬后,分解血红蛋白产生的颗粒,HE染色为棕黄色,故称为含铁血黄素。因有时与福尔马林沉渣及黑色素等难相区别,故做含铁血黄素染色。
应用:
主要用于同其它色素鉴别,若为阳性,显示陈旧性出血。黑色素常见于皮肤色素细胞,恶性黑色素瘤常可产生黑色素。组织内大量存在时呈棕黑色,易于鉴别。但少量存在时便难与其它色素相鉴别,须作黑色素染色。
黑色素瘤的诊断与鉴别诊断:**细胞内色素是否为黑色素,染黑色素有助于确定黑色素性质及**的定性诊断。
血色病与黑便病:皮革内有色素沉着,黑色素阴性而含铁血黄素阳性者可能为前者。 山东多色染色原理
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