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  • 安徽HE染色步骤,染色
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染色基本参数
  • 品牌
  • 扬克斯
  • 型号
  • 适宜人群
  • 动物
  • 不适宜人群
  • 动物
  • 保质期
  • 3个月
染色企业商机

植物相关常用染色方法(2):油脂:在植物解剖学研究中,常用苏丹Ⅲ(或苏丹 IV) 溶液对脂肪性物质进行染色切片浸入上述溶液中 24h, 然后用 50% 的酒精洗涤,加上甘油后观察,油脂可被染成淡黄至红色,栓质和角质也同样被染色。如果细胞中存在硬脂或脂肪酸结晶时,染色十分缓慢,可稍加热。

单宁:单宁的化学结构比较复杂,它是一种多元酚的衍生物,大多呈胶体状态,存在于植物细胞的液泡中,或形成单独的液泡。将切片浸人 10% 的氯化铁水溶液中(或加-些碳酸钠),单宁物质则被染成蓝绿色。

橡胶:天然橡胶是异戊二烯的聚合物,植物组织中所含橡胶物质大多存在千乳汁管中,也有的存在于液泡中。对存在于乳汁管中的橡胶成分,可以用苏丹Ⅲ溶液染色材料应先用 10%铬酸 +70%酒精(使用前配制)固定 24h, 以使橡胶凝固,用刀片切去1-2mm, 而后徒手切片,于载玻片上加上苏丹Ⅲ或苏丹 Ⅳ溶液染色,乳汁管中的橡胶类物质被染成红色。 美蓝染料***染色时,由于活细胞代谢过程中的脱氢作用,美蓝接受H后就由氧化转变为还原态,故表现出无色。安徽HE染色步骤

油红染色法油红作为脂肪染色剂,其染色步骤简便,染色结果肯定,脂肪染色切片效果优于苏丹IV。

试剂配制:

油红O:0.5g

异丙醇(含量98%):100ml

此为油红饱和液,可长期保存备用。

染色步骤:

(1)冻切片

(2)蒸馏水充分洗涤。

(3)油红稀释液染10-15分钟,避光、密封。油红稀释液的配制:

(4)取油红饱和液6毫升,加蒸馏水4毫升,静置5-10分钟后过滤后使用。

(5)60%乙醇镜下分化至间质清晰。

(6)水洗

(7)Marry氏苏木素复染核。

(8)水洗

(9)甘油或甘油明胶封片。

结果:脂肪呈鲜红色,细胞核呈蓝色,间质无色。 山东多色染色评价HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中**基本、使用*****的技术方法。

细胞核染色剂(1)配方一、甲基绿染液

取1克甲基绿,溶于99毫升蒸馏水中,加入1毫升冰醋酸。本染液能染细胞核,还用来染木质化细胞壁。

配方二、龙胆紫染液

取1克龙胆紫,溶于少量2%醋酸溶液中,加2%醋酸溶液,直到溶液不呈深紫色止。

配方三、美蓝(亚甲基蓝)染液

取0.5克美蓝,溶于30毫升95%酒精中,加100毫升0.01%氢氧化钾溶液,保存在棕色瓶此溶液能染细胞核,还用来染细菌、血和神经组织等。

配方四、硼砂-洋红染液

取4克硼砂,溶于96毫升蒸馏水中。再加入2克洋红,加热溶解后煮沸30分钟,静置3日,用100毫升70%酒精冲淡,放置24小时后过滤。

此染液能染细胞核,还用来染糊粉粒和一般动物、植物的整体染色,如水螅、血吸虫等整体标本。

配方五、德氏(Delafield’s)苏木精染液

甲液:取1苏木精,溶于6毫升无水酒精中,即成苏木精-酒精溶液。

乙液:取10克铵矾溶于90毫升蒸馏水中,即成10%铵矾水溶液。

取甲液逐滴加入到乙液中,用纸遮盖,放在阳光明亮处,使它充分氧化。3~4天后将溶液过滤,在滤液中加入25毫升甘油和25毫升甲醇,保存在密闭玻璃瓶内。静置1~2个月,待该液颜色变深时过滤,可长久保存。本染液是染色体的优良染色剂,除能染细胞核外,还用来染纤维素、细胞壁和动植物组织。

显示胶原纤维、网状纤维和弹力纤维的三联染色法的染色步骤:

(1)中性甲醛液固定组织,石蜡切片,常规脱蜡至水。

(2)高锰酸钾硫酸液氧化3min后,自来水浸洗后,用2%草酸漂白2min.

(3)5%硫酸铁铵1min.

(4)Gomori氨性银改良液染1min.

(5)蒸馏水洗2次,用15%甲醛液还原1min.

(6)蒸馏水洗2次,氯化金30s,蒸馏水洗1次。

(7)70%乙醇浸一次,再浸入维多利亚蓝液中染30min-1h.

(8)95%乙醇分化1min左右。

(9)浸入蒸馏水中1min后,用丽春红S染色液染色2min.

(10)直接用无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。

3.结果

胶原纤维呈红色,网状纤维呈黑色,弹力纤维呈绿色,肌肉和红细胞呈淡黄色。

4.注意事项

氨性银液滴染时,要用干净吸管,防止银液污染而发生沉淀。氨性银液作用后的切片不能倾倒,应将蒸馏水冲洗切片上的银液,这样就不会使银液表面的银挥发.

颗粒而沉积在组织上。 Gram甲紫染色法:将纤维蛋白染色;纤维蛋白蓝黑色;背景红色。

席夫(Schiff's)试剂:

称取0.5克碱性品红,加到100 毫升煮沸的蒸馏水中,再微微加热5分钟,不断搅拌,使它溶解。在溶液冷却到50摄氏度时过滤,滤液中加入10毫升1N盐酸。再冷却到25摄氏度时加入0.5克偏重(亚硫酸钠)或无(水亚硫酸氢钠)。把溶液装入棕色试剂瓶内,摇荡后,塞紧瓶塞,放在黑暗中24小时。在溶液颜色退到淡黄色时,加入0.5克活性炭,用力摇荡1分钟,过滤后把滤液贮在棕色试剂瓶内,塞紧瓶塞,滤液应该是无色的。在使用时勿让溶液长时间暴露在空气中和见光(瓶外用黑纸或暗盒遮光)。

如溶液变成红色,即失去染色能力。碱性品红是较强的核染色剂,在孚尔根氏(Feulgen's)反应中作为组织化学试剂,以检查DNA。 缓冲亚甲蓝法:将尼氏体及核仁和背景双重染色;尼氏体及核仁蓝色,背景红色或粉红色。河南甲苯胺蓝染色原理

阿尔辛蓝(AB)染色法:唾液酸及若硫酸化黏液物资以及一般黏液蓝色,细胞核红色。其他不着色或淡染。安徽HE染色步骤

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