实验室常用人工染料(5)中性红:
中性红是弱碱性染料,呈红色粉末状,能溶于水(溶解度4%)和酒精(溶解度1.8%)。它的碱性溶液中呈现黄色,在强碱性溶液中呈蓝色,而在弱酸性溶液中呈红色,所以能用作指示剂。中性红无毒,常做***染色的染料,用来染原生动物和显示动植物组织中活细胞的内含物等。陈久的中性红水溶液,用作显示尼尔体的常用染料。
番红:
番红是碱性染料,能溶于水和酒精。番红是细胞学和动植物组织学生常用的染料,能染细胞核、染色体和植物蛋白质,示维管束植物木质化、木栓化和角质化的组织,还能染孢子囊。 罗丹明染色法:铜沉积物-砖红色,核-蓝色,胆汁-绿色。成都HE染色结果
天狼星红的染色法原理是什么?
原理利用胶原分子与强酸性染料天狼星红结合一起后加强双折光现象,使不同颜色和形态的胶原纤维得以区分。
胶原纤维(collagenousfiber)在三种纤维中数量**多,新鲜时呈白色,有光泽,故又名白纤维。在HE染色切片中呈嗜酸性,粗细不等,直径0.5~10um,呈波浪形,有分支并交织呈网,胶原纤维的生化成分为I型胶原蛋白。
胶原蛋白(collagen)由纤维细胞分泌,于细胞外聚合成胶原原纤维,经少量黏合成胶原纤维。胶原纤维是三种纤维中分布*****的一种纤维,***分布于各脏器内,它在皮肤、巩膜和肌腱**为丰富。
胶原纤维在上述的两种方法中着染不同的颜色,如V.G着染红色,Masson氏着染蓝色或绿色。
这主要取决于染料对组织的渗透、吸附、沉淀和反应,而染料分子量的大小是关键,分子量小的分子移动迅速,行动快,对组织的渗透性较强,能穿透较为致密的组织。 贵阳番红固绿染色切片甲基紫染色法:将淀粉样物,细胞核双重染色;淀粉样物红色或紫红色。细胞核蓝色。
植物细胞壁染色剂:配方一、纤维素细胞壁染液(Ⅰ)取固绿,溶于100毫升95%酒精中,即成。该液能染色纤维素细胞壁,还用于动植物中作浆质染色剂。配方二、纤维素细胞壁染液(Ⅱ)氯化锌20克碘化钾碘先把氯化锌溶于少量蒸馏水中,再加入,即成碘-氯化锌溶液。该染液能把细胞壁染成紫色,胞质染成淡黄色,胞核染成棕色。配方三、纤维素细胞壁染液(Ⅲ)甲液:取1克碘和,溶于100毫升蒸馏水中,即成1%碘液。乙液:取7份硫酸和3份蒸馏水相混,即成665%硫酸溶液。染色时,在材料上滴加甲液,再加一滴乙液,纤维素细胞壁就染成黄色。配方四、木质化细胞壁染液(Ⅰ)硫酸化苯胺(或盐酸化苯胺)1份蒸馏水70份95%酒精30份、硫酸30份将上述各组分相混,将细胞材料放入混合液里染色,可是木质化细胞壁呈鲜黄或姜黄色。配方五、木质化细胞壁染液(Ⅱ)取间**4~5克,溶于100毫升95%酒精中,即成间**-酒**。先在材料.上滴上1滴浓盐酸,然后滴上间**一酒**1滴,木质化的细胞壁就染上樱红或紫红色。配方六、木质化细胞壁染液(Ⅲ)取1克番红,溶于99毫升蒸馏水中,即成1%番红溶液。
甲基绿派洛宁法:1、试剂配制:(1)2%甲基绿水溶液:甲基绿(methylgreen)1g蒸馏水加至50ml用三氯甲烷抽提,方法详后。(2)5%派洛宁水溶液:派洛宁G(pyronineG)1g蒸馏水加至20ml(3)醋酸盐缓冲液(pH)醋酸液41ml醋酸钠液59ml(4)甲基绿派洛宁染液:2%甲基绿水溶液(经抽提)5ml5%派洛宁水溶液1ml蒸馏水12ml醋酸盐缓冲液(pH)18ml2、操作步骤:(1)新鲜组织固定于Carnoy氏液(4℃)3~6小时,经95%酒精和无水酒精脱水,二甲苯透明,石蜡包埋。(2)切片经二甲苯脱蜡至蒸馏水。(3)置入甲基绿派洛宁染液于室温染30~60分钟。(4)取出切片,不经水洗,用滤纸吸干多余染液。(5)用**迅速分化。(6)转入**二甲苯(1:1)稍洗。(7)二甲苯透明2~3次。(8)中性树胶封固。结果:存在于胞质和核仁内的核糖核酸呈红紫色,胞核染色质内的脱氧核糖核酸绿色或绿蓝色。3、对照方法:(1)取另一连续切片用核糖核酸酶1mg/1ml于37℃温箱内消化3小时,蒸馏水洗后置入甲基绿派洛宁染液内染色。(2)切片在10%高氯酸于4℃处理12~18小时,水洗后用1%碳酸钠液中和2分钟,流水冲洗5分钟,再用蒸馏水洗后置入甲基绿派洛宁染液内染色。经上述方法之一处理后的切片就为阴性。 切片中,载玻片是用来放被测标本的,而盖玻片是盖在被测标本之上的。
细菌特殊染色剂配方一、芽孢染液用此配方染色是用甲液染色后,用乙液复染。
甲液:取5克孔雀绿,加入少量蒸馏水,使它溶解后,用蒸馏水稀释到100毫升,即成孔雀绿染液。
乙液:取番红花红0.5克,加入少量蒸馏水,使它溶解后,用蒸馏水稀释到100毫升,集成番红花红复染液。
配方二、荚膜染液此配方先用甲液染色,后用乙液复染。
甲液:取结晶紫0.1克,溶于少量蒸馏水后,加水稀释到100毫升,再加入0.25毫升冰醋酸一结晶紫染液。
乙液:取硫酸铜(31.3克),溶于少量蒸馏水后,加水稀释到100毫升,即成20%硫酸铜脱色剂。
配方三、鞭毛染液
甲液
饱和明矾溶液2毫升5%石炭酸溶液5毫升
20%丹宁酸溶液2毫升
乙液
碱性品红11克95%酒精100毫升
使用前取甲液9毫升和乙液1毫升相混,过滤即可。 苯酚碱性品红法:使抗酸杆菌的糖脂蜡质与碱性品红结合形成复合物,从而使抗酸杆菌呈红色。山东阿利新蓝染色试剂
地依红染色法:将弹力纤维、结缔组织,细胞核双重染色;弹力纤维呈深棕色,结缔组织浅棕色,细胞核蓝色。成都HE染色结果
植物相关常用染色方法(2):油脂:在植物解剖学研究中,常用苏丹Ⅲ(或苏丹 IV) 溶液对脂肪性物质进行染色切片浸入上述溶液中 24h, 然后用 50% 的酒精洗涤,加上甘油后观察,油脂可被染成淡黄至红色,栓质和角质也同样被染色。如果细胞中存在硬脂或脂肪酸结晶时,染色十分缓慢,可稍加热。
单宁:单宁的化学结构比较复杂,它是一种多元酚的衍生物,大多呈胶体状态,存在于植物细胞的液泡中,或形成单独的液泡。将切片浸人 10% 的氯化铁水溶液中(或加-些碳酸钠),单宁物质则被染成蓝绿色。
橡胶:天然橡胶是异戊二烯的聚合物,植物组织中所含橡胶物质大多存在千乳汁管中,也有的存在于液泡中。对存在于乳汁管中的橡胶成分,可以用苏丹Ⅲ溶液染色材料应先用 10%铬酸 +70%酒精(使用前配制)固定 24h, 以使橡胶凝固,用刀片切去1-2mm, 而后徒手切片,于载玻片上加上苏丹Ⅲ或苏丹 Ⅳ溶液染色,乳汁管中的橡胶类物质被染成红色。 成都HE染色结果
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