四川扬克斯特为您介绍脂质染色:
脂肪和类脂统称为脂类,它是构成机体的正常成份,脂肪主要积于脂肪组织中,并以油滴状的微粒存在于脂肪细胞胞浆内。因脂肪溶于酒精,故在HE染色中则被溶解掉,因此对某些疾病不能判断,所以必须进行脂肪染色。
应用:
(1)心、脑、肾等组织***的脂肪栓塞,脂肪染色即可判定栓子是否为脂肪滴。
(2)心脏、肝脏等脂肪变性:脂肪染色可显示变性细胞内的脂滴。
(3)脂肪肉瘤与其它间叶组织的恶性**的鉴别:脂肪染色即可显示脂肪肉瘤瘤细胞内产生的脂滴。 粘液胭脂红法:将粘液和细胞核染色;粘液深玫瑰色,核黑色,其他成分黄色。福建阿利新蓝染色切片
弹力纤维染色:弹力纤维是结缔组织发生形成较晚的一种纤维,在创伤修复中一般在4—5周才有较明显的弹力纤维形成。弹力纤维艰固、较小而弹性较大,容易伸展,在结缔组织起弹性作用。弹力纤维由弹性蛋白组成,新鲜时呈黄色又称黄纤维。弹力纤维纤维分枝连成网,折光性强,含量多时在HE染片上呈折光性强的粉红色,量少的不显色。故量多时与胶原纤维不易区别,量少则不能观察。弹力纤维染色主要用于观察弹力纤维有无增生、肿胀、断裂、破碎及萎缩或缺如等病变。流式染色评价硝酸银染色法:将胃幽门螺杆菌染色;胃幽门螺杆菌棕黑或黑色,背景淡黄色。
甲基绿派洛宁法:1、试剂配制:(1)2%甲基绿水溶液:甲基绿(methylgreen)1g蒸馏水加至50ml用三氯甲烷抽提,方法详后。(2)5%派洛宁水溶液:派洛宁G(pyronineG)1g蒸馏水加至20ml(3)醋酸盐缓冲液(pH)醋酸液41ml醋酸钠液59ml(4)甲基绿派洛宁染液:2%甲基绿水溶液(经抽提)5ml5%派洛宁水溶液1ml蒸馏水12ml醋酸盐缓冲液(pH)18ml2、操作步骤:(1)新鲜组织固定于Carnoy氏液(4℃)3~6小时,经95%酒精和无水酒精脱水,二甲苯透明,石蜡包埋。(2)切片经二甲苯脱蜡至蒸馏水。(3)置入甲基绿派洛宁染液于室温染30~60分钟。(4)取出切片,不经水洗,用滤纸吸干多余染液。(5)用**迅速分化。(6)转入**二甲苯(1:1)稍洗。(7)二甲苯透明2~3次。(8)中性树胶封固。结果:存在于胞质和核仁内的核糖核酸呈红紫色,胞核染色质内的脱氧核糖核酸绿色或绿蓝色。3、对照方法:(1)取另一连续切片用核糖核酸酶1mg/1ml于37℃温箱内消化3小时,蒸馏水洗后置入甲基绿派洛宁染液内染色。(2)切片在10%高氯酸于4℃处理12~18小时,水洗后用1%碳酸钠液中和2分钟,流水冲洗5分钟,再用蒸馏水洗后置入甲基绿派洛宁染液内染色。经上述方法之一处理后的切片就为阴性。
细菌特殊染色剂配方一、芽孢染液用此配方染色是用甲液染色后,用乙液复染。
甲液:取5克孔雀绿,加入少量蒸馏水,使它溶解后,用蒸馏水稀释到100毫升,即成孔雀绿染液。
乙液:取番红花红0.5克,加入少量蒸馏水,使它溶解后,用蒸馏水稀释到100毫升,集成番红花红复染液。
配方二、荚膜染液此配方先用甲液染色,后用乙液复染。
甲液:取结晶紫0.1克,溶于少量蒸馏水后,加水稀释到100毫升,再加入0.25毫升冰醋酸一结晶紫染液。
乙液:取硫酸铜(31.3克),溶于少量蒸馏水后,加水稀释到100毫升,即成20%硫酸铜脱色剂。
配方三、鞭毛染液
甲液
饱和明矾溶液2毫升5%石炭酸溶液5毫升
20%丹宁酸溶液2毫升
乙液
碱性品红11克95%酒精100毫升
使用前取甲液9毫升和乙液1毫升相混,过滤即可。 砂罗铬花青法:髓鞘呈鲜蓝色,细胞核呈深蓝色,胶原纤维呈粉红色。
染色体染色剂:配方一、醋酸-洋红染液
取45ml冰醋酸,加蒸馏水55ml,煮沸后徐徐加入洋红1g,搅拌均匀后加入1颗铁锈钉,煮沸10min,冷却后过滤,贮存在棕色瓶内。
配方二、醋酸-地衣红染液
取45ml醋酸,跟55ml蒸馏水相混,加热,徐徐加入地衣红粉末1~2g,搅拌溶解后,缓缓煮沸2小时,冷却后过滤,贮存在棕色瓶里。
配方三、龙胆紫染液
取1g龙胆紫,用少量蒸馏水溶解后,加蒸馏水,稀释到100ml,保存在棕色瓶内。
配方四、甲苯胺蓝染液
取0.5g甲苯胺蓝,溶解在100ml蒸馏水中,即成0.5%甲苯胺蓝水溶液。 HE染色中文名:苏木精——伊红染色法,外文名:hematoxylin-eosin staining,简称:HE染色法。江苏masson染色质量
地依红染色法:将弹力纤维、结缔组织,细胞核双重染色;弹力纤维呈深棕色,结缔组织浅棕色,细胞核蓝色。福建阿利新蓝染色切片
番红染液的运用特点:
番红通常具有红色成团的化学成像结构(有时被描述为二甲基番红)。同时也有三甲基番红,其在下环的邻位有多加一个甲基。这两个化合物在生物染色应用的表现基本上是相同的,所以大部分番红的制造商并无法区分这两者。商业用番红的配制经常会包含这两种类型的混合。
番红也在分析化学中被用作氧化还原指示剂。
番红是个在一分子中含有两个氮原子的化合物,其为对称的2,8-二甲基-3,7-二氨基吩嗪。可以借由连接一分子氧化的对位-二氨和两分子的一级氨取得。
这是透过对位-氨基偶氮与一级氨的浓缩以及对位-亚硝基二烷基苯胺和二级碱基,例如二苯基间苯二胺,之间的反应。它们为呈现出特有绿色金属光泽的结晶固体;在水中立即被溶解并能染成蓝色或紫色。
同时也是可形成稳定的一元酸盐类的强碱。它们的酒精溶液会显现出红黄色的萤光。酚藏红在自由态时十分不稳定;它的氯化物会形成绿色的板块。其很容易就重氮化,而重氮化的盐类与酒精煮沸后会产生阿朴藏红或引杜林染料,C18H12N3。 福建阿利新蓝染色切片
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