在切片染色到封片之前的过程中,乙醇是一个特别常用的脱水脱二甲苯的试剂。在二甲苯中脱蜡不完全的切片组织进入到乙醇中能看到明显的蜡渣沉积会对试剂造成污染,也会影响***制成切片的效果,在操作过程中要特别注意。
二甲苯可以洗去切片组织上的蜡,蜡块是将组织包块后进行切片的必要物质;二甲苯也作为切片染色流程全部完成后,帮助透明让染色图像更加清晰的试剂。
染液的作用:让切片充分的着色,不同的染色方法所使用到的染液和染色时间也各不相同,一般按照自己对实验目的的需要来选用比较好的染色方法或多重染色方法。 美蓝染料***染色时,由于活细胞代谢过程中的脱氢作用,美蓝接受H后就由氧化转变为还原态,故表现出无色。河南甲苯胺蓝染色结果
网状纤维染色的应用:(1)*与肉瘤的鉴别:在网状纤维染色下可清楚显示出肉瘤每一个细胞周围有网状纤维围绕,或似为团状或巢状的瘤组织,但团巢内仍有破碎的网状纤维,*显示为明显巢或索状,巢内无网状纤维。
(2)骨基质与浓缩的分泌物、血浆或水肿液的鉴别:骨基质内有网状纤维,而后者无。
(3)炎症细胞与*细胞的鉴别:在支气管活检中有时挤压较重,一些深染的细胞挤压成团,难以判断是受挤压的炎症细胞。这种病例染网状纤维有利于鉴别,炎症细胞不成巢,小细胞*可有巢状或索状结构。 江苏PAS染色切片砂罗铬花青法:髓鞘呈鲜蓝色,细胞核呈深蓝色,胶原纤维呈粉红色。
实验室常用人工染料(3)苏丹II:
苏丹II是弱酸性染料,呈红色粉末状,易溶于脂肪和酒精(溶解度为0.15%)。 苏丹I是脂肪染色剂。
伊红:
这类染料种类很多。常用的伊红Y,是酸性染料,呈红色带蓝的小结晶或棕色粉末状,溶于水(15摄氏度是溶解度达44%)和酒精(溶于无水酒精的溶解度为2%)。伊红在动物制片中广泛应用,是很好的细胞质染料,常用作苏木精的衬染剂。
碱性品(复)红:
碱性品红是碱性染料,呈暗红色粉末或结晶状,能溶于水(溶解度1%)和酒精(溶解度8%)。碱性品红在生物学制片中用途很广,可用来染色胶原纤维、弹性纤维、嗜复红性颗粒和***组织的核质。在生物学制片中用来染维管束植物的木质化壁,又作为原球藻、轮藻的整体染色。在细菌学制片中,长用来鉴别结核杆菌。在尔根氏反应中用作组织化学试剂,已核查脱氧核糖核酸。
扬克斯特科技为您介绍特殊染色的应用价值。现代病理学中免疫组织化学技术、电子显微镜技术以及其它细胞及分子生物学技术应用日益***,但由于这些技术要求一定的实验条件以及所需的试剂价格较为昂贵,对于一部分病人以及某一些基层医院是比较难以接受的。而组织化学技术则具有无需复杂的实验条件以及较为昂贵的试剂操作又比较简单的优势,在临床病理学诊断中具有重要的应用价值。
比如,当细胞中出现色素,是黑色素还是含铁血黄素以及当组织中出现均一化学物质是否为淀粉样变性等,用组织化学技术区别起来很简单,所以组织化学技术,虽然已有几十年到几百年的历史,仍是一个很有实用价值的技术。 Gram碱性复红结晶紫法将革兰氏阴性菌,革兰氏阳性菌双重染色;革兰阳性细菌蓝色,阴性红色,细胞核红色。
胶原纤维染色:凡是间叶组织细胞都可产生网织纤维,也可产生胶原纤维,纤维母细胞是产生胶原纤维的主要细胞。胶原纤维是结缔组织中的主要纤维,是结缔组织中起支持作用的重要部分,具有一定的韧性和坚固性,能抵抗一定的牵引力而不致撕裂。胶原纤维是原胶原互相错开1/4平行排列交联成胶原原纤维,胶原原纤维再聚合成较宽的结构。按胶原的化学成分可分为15种,间质中的胶原纤维主要由I、Ⅱ、Ⅲ型胶原组成,新鲜时呈白色,故又称为白纤维。在HE染色中呈均一的粉红色,与周围间质区分不是很清楚。染色后,便可明显区别开来,易于观察病变时胶原纤维的变化。
应用:
(1)***硬化性疾病的观察:如肝硬变、心肌瘢痕的观察,胶原染色更易于观察诊断。
(2)瘢痕与淀粉样物质鉴别:前者胶原纤维染色为阳性,后者为阴性。
(3)骨纤维异常增殖病与骨纤维化的鉴别:利用胶原纤维染色可较易观察前者胶原纤维紊乱,纵横交错,后者较规则。 透明骨骼标本染色剂配方二:茜素红溶液(Ⅱ) 取1克茜素红,溶于100毫升95%酒精,搅拌成深紫色的茜素红染液。江苏甲苯胺蓝染色切片
甲醇刚果红法:将淀粉样物,细胞核双重染色;淀粉样物紫红色,细胞核蓝色。河南甲苯胺蓝染色结果
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特殊染色法为了显示与确定组织或细胞中的正常结构或病理过程中出现的异常物质、病变及病原体等,需要分别选用相应的显示这些成分的染色方法进行染色。包括:胶原纤维染色(Masson等)、网状纤维染色、弹力纤维染色、肌肉组织染色(磷钨酸苏木素)、脂肪染色(苏丹Ⅲ)、糖原染色(PAS)、粘液染色(PAS)等。
相关染液:苏丹Ⅲ、Ⅳ,甲苯胺蓝。
病理诊断:***硬化性疾病的观察。 河南甲苯胺蓝染色结果
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