在切片染色到封片之前的过程中，乙醇是一个特别常用的脱水脱二甲苯的试剂。在二甲苯中脱蜡不完全的切片组织进入到乙醇中能看到明显的蜡渣沉积会对试剂造成污染，也会影响***制成切片的效果，在操作过程中要特别注意。
二甲苯可以洗去切片组织上的蜡，蜡块是将组织包块后进行切片的必要物质；二甲苯也作为切片染色流程全部完成后，帮助透明让染色图像更加清晰的试剂。
染液的作用：让切片充分的着色，不同的染色方法所使用到的染液和染色时间也各不相同，一般按照自己对实验目的的需要来选用比较好的染色方法或多重染色方法。 透明骨骼标本染色剂配方二：茜素红溶液(Ⅱ) 取1克茜素红，溶于100毫升95%酒精，搅拌成深紫色的茜素红染液。湖南甲苯胺蓝染色上机
四川扬克斯特为您介绍多色染色法示例：
（1）一、Mallory三色染色法（染结缔组织）
1.试剂配制
(1)重铬酸钾液
重铬酸钾2.5g;醋酸5m1，蒸馏水95ml
(2)苯胺蓝桔黄G液苯胺蓝0.5g，桔黄G2g，磷钨酸1g，蒸馏水100m1
(3)酸性复红液酸性复红0.5g，蒸馏水100ml
2.染色步骤
(1)中性甲醛液固定组织，石蜡切片，常规脱蜡至水。
(2)重铬酸钾液10mino
(3)蒸馏水冲洗2min，蒸馏水2次。
(4)酸性复红液2min,蒸馏稍洗。
(5)苯胺蓝液20min,95%乙醇快速分化。
(6)直接用无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。
3.结果
胶原和网状纤维呈蓝色，软骨、粘液、淀粉样变物质呈淡蓝色:神经胶质纤维、
肌纤维和酸性颗粒呈红色，髓鞘和红色呈桔红色。
4.注意事项
(1)酸性复红液易溶解于水，肉眼观察切片上保留一定的红色。
(2)苯胺蓝液染色后，用95%乙醇分化时，须用显微镜观察掌握。
(3)对陈旧的固定标本，其染色效果较差，可增加染色时间。
(4)另张切片，可同时作胶原纤维对照染色而进行鉴别组织成分。 河北荧光染色上机HE染色的适用范围:组织学、胚胎学、病理学教学与科研。
冷冻切片HE染色步骤:（1）冰冻切片固定10～30s
（2）稍水洗1～2s
（3）苏木**染色（60℃）30～60s
（4）流水洗去苏木**5～10s
（5）1%盐酸乙醇1～3s
（6）稍水洗1～2s
（7）促蓝液返蓝5～10s
（8）流水冲洗15～30s
（9）0.5%曙红液染色30～60s
（10）蒸馏水稍洗1～2s
（11）80%乙醇1～2s
（12）95%乙醇1～2s
（13）无水乙醇1～2s
（14）石炭酸二甲苯2～3s
（15）二甲苯（Ⅰ）2～3s
（16）二甲苯（Ⅱ）2～3s
（17）中性树胶封固
注：第（14）步如果不用石炭酸二甲苯，可改用无水乙醇。
染色结果：细胞核蓝色，胞质、肌纤维、胶原纤维和红细胞呈深浅不一的红色。
注意事项：
切片脱水透明，切片经HE染色后，要彻底脱水透明，才能用中性树胶封盖。如果脱水不彻底，封片后呈白色雾状，镜下观察模糊不清，且容易褪色。切片1-2级无水乙醇脱水，也可使用石炭酸二甲苯进行脱水。石炭酸有较强脱水能力，但长时间可使切片脱色，因此要经过多次二甲苯以使石碳酸完全除去。
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特殊染色法为了显示与确定组织或细胞中的正常结构或病理过程中出现的异常物质、病变及病原体等，需要分别选用相应的显示这些成分的染色方法进行染色。包括：胶原纤维染色（Masson等）、网状纤维染色、弹力纤维染色、肌肉组织染色（磷钨酸苏木素）、脂肪染色（苏丹Ⅲ）、糖原染色（PAS）、粘液染色（PAS）等。
相关染液：苏丹Ⅲ、Ⅳ，甲苯胺蓝。
病理诊断：***硬化性疾病的观察。 LiLLie亚铁反应法：将黑色素，肌纤维双重染色；黑色素暗绿色，背景浅绿或不着色，肌纤维和背景黄色。
实验室常用人工染料（4）结晶紫：
结晶紫是碱性染料，能溶于水(溶解度9%)和酒精(溶解度8.75%)。结晶紫在细胞学、组织学和细菌学等方面应用极广，是一种优良的染色剂。他是细胞核染色常用的，用来显示染色体的中心体，并可染淀粉、纤维蛋白、神经胶质等。凡是用番红和苏木精或其他染料染细胞核不能成功时，用它能得到良好的结果。用番红和结晶紫作染色体的二重染色，染色体染成红色，纺锤丝染成紫色，所以也是一种显示细胞分裂的优良染色剂。用结晶紫染纤毛，效果也很好。用结晶紫染色的切片，缺点是不易长久保存。
龙胆紫：
龙胆紫是混合的碱性染料，主要是结晶紫和甲基紫的混合物。在必要是，龙胆紫能跟结晶紫互相替用。医药上用的紫***，主要成分是甲基紫，需要时能代替龙胆紫和结晶紫。 中文名：masson染色，释义：用两种或三种阴离子染料混合，作用：显示组织中纤维的染色方法。湖北甲苯胺蓝染色步骤
高碘酸复红法：将***和红细胞双重染色；***紫红色，红细胞浅黄色。湖南甲苯胺蓝染色上机
脂肪染色剂
苏丹Ⅲ染液
取0.1克苏丹Ⅲ，溶于20毫升95%酒精中，即成0.5%苏丹Ⅲ染液。
这染液能染脂肪，还能染木栓、角质层。
血液染色剂
配方一、瑞氏 (Wright's)染液
取瑞氏染料粉末0.1克和甲醇60毫升。把染料放在研钵内，加少量甲醇研磨，使染料溶解，然后把溶解的染料倒入干净的棕色玻璃瓶。并用完甲醇为止。配制好的染液在室温中保存,即可使用。
新鲜配制的染液偏碱性，放置后呈酸性，染液贮存愈久染色愈好。这染液的适宜pH值是6.4~6.8。因此，染色时加入缓冲液，可维持一定的酸碱度，使染色效果更好。
这种染液除能染血液，还能染疟原虫。
瑞氏染料可以自制。在100是升05%碳酸氢钠水溶液里加入1克美蓝，溶解后放在锅内，蒸上1小时，取出冷却后过滤在滤液里加入0.1%伊红水溶液500毫升。随加、随搅拌，使混合液呈紫色。
静置一夜后，用滤纸过滤。滤纸上的沉淀物，在室内风干或放在干燥箱内,充分干燥后研磨成粉末，即成瑞氏染料。
配方二、甲基紫染液
取甲基紫0.5克，加到100毫升生理盐水中，溶解后加入冰醋酸0.02毫升。 湖南甲苯胺蓝染色上机
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