四川扬克斯特为您介绍多色染色法示例：
（1）一、Mallory三色染色法（染结缔组织）
1.试剂配制
(1)重铬酸钾液
重铬酸钾2.5g;醋酸5m1，蒸馏水95ml
(2)苯胺蓝桔黄G液苯胺蓝0.5g，桔黄G2g，磷钨酸1g，蒸馏水100m1
(3)酸性复红液酸性复红0.5g，蒸馏水100ml
2.染色步骤
(1)中性甲醛液固定组织，石蜡切片，常规脱蜡至水。
(2)重铬酸钾液10mino
(3)蒸馏水冲洗2min，蒸馏水2次。
(4)酸性复红液2min,蒸馏稍洗。
(5)苯胺蓝液20min,95%乙醇快速分化。
(6)直接用无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。
3.结果
胶原和网状纤维呈蓝色，软骨、粘液、淀粉样变物质呈淡蓝色:神经胶质纤维、
肌纤维和酸性颗粒呈红色，髓鞘和红色呈桔红色。
4.注意事项
(1)酸性复红液易溶解于水，肉眼观察切片上保留一定的红色。
(2)苯胺蓝液染色后，用95%乙醇分化时，须用显微镜观察掌握。
(3)对陈旧的固定标本，其染色效果较差，可增加染色时间。
(4)另张切片，可同时作胶原纤维对照染色而进行鉴别组织成分。 普鲁士蓝法 反应显示三价铁染色结果：含铁血黄素蓝色，其他浅红色。福建单色染色步骤
脂肪染色剂
苏丹Ⅲ染液
取0.1克苏丹Ⅲ，溶于20毫升95%酒精中，即成0.5%苏丹Ⅲ染液。
这染液能染脂肪，还能染木栓、角质层。
血液染色剂
配方一、瑞氏 (Wright's)染液
取瑞氏染料粉末0.1克和甲醇60毫升。把染料放在研钵内，加少量甲醇研磨，使染料溶解，然后把溶解的染料倒入干净的棕色玻璃瓶。并用完甲醇为止。配制好的染液在室温中保存,即可使用。
新鲜配制的染液偏碱性，放置后呈酸性，染液贮存愈久染色愈好。这染液的适宜pH值是6.4~6.8。因此，染色时加入缓冲液，可维持一定的酸碱度，使染色效果更好。
这种染液除能染血液，还能染疟原虫。
瑞氏染料可以自制。在100是升05%碳酸氢钠水溶液里加入1克美蓝，溶解后放在锅内，蒸上1小时，取出冷却后过滤在滤液里加入0.1%伊红水溶液500毫升。随加、随搅拌，使混合液呈紫色。
静置一夜后，用滤纸过滤。滤纸上的沉淀物，在室内风干或放在干燥箱内,充分干燥后研磨成粉末，即成瑞氏染料。
配方二、甲基紫染液
取甲基紫0.5克，加到100毫升生理盐水中，溶解后加入冰醋酸0.02毫升。 重庆HE染色方法Ziehl-Neelsen抗酸杆菌染色法：抗酸杆菌红色，背景灰蓝色。
显示胶原纤维、网状纤维和弹力纤维的三联染色法的染色步骤：
(1)中性甲醛液固定组织，石蜡切片，常规脱蜡至水。
(2)高锰酸钾硫酸液氧化3min后，自来水浸洗后，用2%草酸漂白2min.
(3)5%硫酸铁铵1min.
(4)Gomori氨性银改良液染1min.
(5)蒸馏水洗2次，用15%甲醛液还原1min.
(6)蒸馏水洗2次，氯化金30s，蒸馏水洗1次。
(7)70%乙醇浸一次，再浸入维多利亚蓝液中染30min-1h.
(8)95%乙醇分化1min左右。
(9)浸入蒸馏水中1min后，用丽春红S染色液染色2min.
(10)直接用无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。
3.结果
胶原纤维呈红色，网状纤维呈黑色，弹力纤维呈绿色，肌肉和红细胞呈淡黄色。
4.注意事项
氨性银液滴染时，要用干净吸管，防止银液污染而发生沉淀。氨性银液作用后的切片不能倾倒，应将蒸馏水冲洗切片上的银液，这样就不会使银液表面的银挥发.
颗粒而沉积在组织上。
HE染色原理（1）易于被碱性或酸性染料着色的性质称为嗜碱性（basophilia）和嗜酸性（acidophilia）；而对碱性染料和酸性染料亲和力都比较弱的现象称为中性（neutrophilia）。
构成组织内蛋白质的氨基酸的种类很多，它们有不同的等电点。在普通染色法中，染色液的酸碱度为ph6左右，细胞内的酸性物质如细胞核的染色质、腺细胞和神经细胞内的粗面内质网及透明软骨基质等均被碱性染料染色，这些物质称为嗜碱性。而细胞质中的其它蛋白质如红细胞中的血红蛋白、嗜酸粒细胞的颗粒及胶原纤维和肌纤维等被酸性染料染色，这些物质称为嗜酸型。如果改变染色液的酸碱度，ph值升高时，则原来被酸性染料染色的物质可变为嗜碱性；ph值降低时，原来被碱性染料染色的物质则可变为嗜酸性。所以说染色液的ph值可以影响染色的反应。三氯醋酸三氯化铁法：将胆色素和其他物质染色；胆色素绿色，其他呈复染的红色和黄色。
网状纤维染色的应用：（1）*与肉瘤的鉴别：在网状纤维染色下可清楚显示出肉瘤每一个细胞周围有网状纤维围绕，或似为团状或巢状的瘤组织，但团巢内仍有破碎的网状纤维，*显示为明显巢或索状，巢内无网状纤维。
（2）骨基质与浓缩的分泌物、血浆或水肿液的鉴别：骨基质内有网状纤维，而后者无。
（3）炎症细胞与*细胞的鉴别：在支气管活检中有时挤压较重，一些深染的细胞挤压成团，难以判断是受挤压的炎症细胞。这种病例染网状纤维有利于鉴别，炎症细胞不成巢，小细胞*可有巢状或索状结构。 罗丹明染色法：铜沉积物-砖红色，核-蓝色，胆汁-绿色。广东双色染色试剂
甲基紫染色法：将淀粉样物，细胞核双重染色；淀粉样物红色或紫红色。细胞核蓝色。福建单色染色步骤
常规HE染色步骤:
A.二甲苯（Ⅰ）15min
B.二甲苯（Ⅱ）15min
C.二甲苯：无水乙醇=1:12min
D.100%乙醇（Ⅰ）5min
E.100%乙醇（Ⅱ）5min
F.80%乙醇5min
G.蒸馏水5min
H.苏木**染色5min
I.水洗10min或流水冲洗5min
J.1%盐酸乙醇30s
K.水洗30s
L.蒸馏水过洗5s
M.0.5%伊红液染色1-3min
N.蒸馏水稍洗30s
O.80%乙醇稍洗30s
P.95%乙醇（Ⅰ）1min
Q.95%乙醇（Ⅱ）1min
R.无水乙醇（Ⅰ）3min
S.无水乙醇（Ⅱ）3min
T.二甲苯（Ⅰ）3min
U.二甲苯（Ⅱ）3min
V.中性树胶封固 福建单色染色步骤
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