浓度:当需要截留的样品浓度很低时,通量通常不受浓度影响。操作过 程中,随着溶质浓度的升高,增加的粘滞性和极化将导致通量降低。 温度:粗体,作为获得压力、浓度一样的词条通常增加操作时的温度可 以提高超滤效率。每增加 1℃蛋白扩散率增加 3-3.5%,同时溶液粘度降低。 实践中一般是以样品和设备能耐受的比较高温度来操作。 pH:改换溶液和 / 或 pH 常常改变分子结构,蛋白尤其如此。在蛋白的 pI 值蛋白会沉淀,产生堵塞和得率损失。 污垢:溶液中除了目的分子造成的浓差极化,还有其它小颗粒和分子会 在膜上富集和沉淀,逐渐堆积在膜孔上或膜孔结构中,形成结晶和沉淀。超滤浓缩管的系列有很多。闵行区Merck离心浓缩管联系方式
用超滤对分子进行分级 通过选定截留分子量的超滤操作能精确地将混在大分子中的小分子去 除的想法常常不切实际。事实上,膜的规格描述是基于截留而非通过 的性质。一项实验中,采用 100k NMWL 滤膜,大于 100kDa 的分子截 留率 >90%,但这时比膜孔径小的分子并不是完全自由地通过滤膜, 75kDa 的分子截留率为 83%,30kDa 的分子也有 32% 被截留。混合的 溶液中的各 种成分通过膜并不像单一成分的溶液那么简单和容易。实 践中,如果要分离两种大分子,它们之间的分子量差异应该达到 10 倍 以上,或至少膜的 NMWL 规格在两种蛋白之间,则可达到比较理想的 分离。如果蛋白溶液较为稀释,低压下操作也有助于达到更好的效果。长宁区Millipore超滤浓缩管哪家优惠益启生物公司主营超滤浓缩管销售。
大体积样品浓缩 Centricon® Plus-70离心浓缩装置 用于15-70mL生物溶液的快速浓缩等操作。70mL的样品在25分钟内浓缩至350μL;死体积设计确保样品不会被离干而损失。依起始材料不同、起始体积不同,样品可被浓缩50-200倍。低吸附竖向再生纤维素超滤膜及双超滤柱设计,加快处理速度;反转离心操作进一步使宝贵的浓缩样品回收率得以提高。这个产品替代传统的透析、冻干、沉淀或搅拌式浓缩等技术和方法,是非常方便的工具。 特别推荐的应用: 色谱洗脱产物的浓缩和脱盐 单克隆抗体浓缩 培养上清中蛋白和***的浓缩 组织匀浆液和细胞裂解液澄清
外泌体的精制磁珠法富集精制外泌体:300μg样品(相当于300μg总蛋白)用含有5μg anti-CD63抗体的溶液稀释,与protein A/G磁珠共孵育1hr,漂洗后用0.2M glycine洗脱。如果要先将抗体偶联在磁珠上(以避免抗体洗脱下来对外泌体的干扰),请参考默克磁珠操作说明书。(Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3))。推荐使用试剂目录号信息:cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。 默克已经建立了基于“微滤+超滤”的外泌体制备操作标准,相较于需要昂贵的设备及繁琐操作的超速密度梯度离心,用实验室常见的工具解决外泌体制备的高大上问题,真是惠而不费,不亦乐乎?超滤浓缩管和其他的空压机有什么区别呢?
对于慢***推荐Amicon® Ultra 100kDa; 对于腺***推荐Amicon® Ultra 50kDa。具体的操作步骤可以参考***浓缩纯化试剂盒FTLV00003和FTAV00003的产品使用说明书。另提供AAV(腺相关***)的制备方法供参考。 去污剂因其独特的性质,当浓度大于临界微团浓度(Critical Micelle Concentration, CMC)时,去污剂分子会聚集形成微团而改变分子构象,这有可能会影响去污剂的去除效果。 Amicon® Ultra超滤膜含有微量甘油。如果此成分干扰分析,可用缓冲液或Milli-Q®水预清洗。如果干扰仍然存在,用0.1 N NaOH清洗,然后用缓冲液或Milli-Q®水再次清洗后甩干。你知道上海超滤浓缩管代理销售哪家比较好吗?上海离心浓缩管代理价格
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***的化学兼容性 •膜与管壁采用特别的热封工艺,避免使用胶水 带来的化学溶出对样品的污染 •Ultracel® 超滤膜和聚丙烯管材性能稳定,化学 兼容性好 •pH3-10 适用 特别推荐应用(提供实验报告作为参考) Amicon® Ultra 离心超滤管: • 生物大分子样品浓缩、脱盐及缓冲液置换 • 尿液中蛋白质的浓缩 • 游离标记物的去除 • 抗体的快速浓缩 • 血清多肽生物标志物的纯化 • 双向电泳蛋白样品制备 • 样品去垢剂的去除 操作更安心 •设计精巧、紧凑,一体化结构确保不会发生渗漏,即 使是极为珍贵的样品也能非常放心地操作 •性能稳定,数据平行性、重现性好,适合精细操作和 高通量操作闵行区Merck离心浓缩管联系方式