外泌体用于细胞学或动物实验前的无菌处理 已经经过上述方法制备的外泌体在进行细胞或动物实验之前还需进行一步除菌过滤,这个时候考虑到得率,应该采用离心法处理,以减少过滤时的外泌体样品损失。 超滤方法纯化具体操作步骤举例 Amicon® Ultra-15 超滤管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip®真空抽滤对样品进行澄清[目录号SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜] 用PBS平衡Amicon® Ultra-15 超滤管(目录号UFC901024,10 kDa MWCO) ,4000g离心 X 10 min。 从超滤管内管及收集管吸走PBS。向超滤管加入15 mL 样品。4000g 离心30 min 浓缩。倒空收集管。加入14 mL PBS 进行缓冲液置换,温柔吸打样品数次。4000g离心 30 min。从浓缩管吸回处理好的样品。(30X 浓缩) 注意 : 所有 Amicon® Ultra 超滤管 (0.5, 2, 4 和 15 mL) 与此操作流程兼容 *上海超滤浓缩管代理销售哪家比较好?青浦区默克超滤浓缩管联系电话
默克密理博 Amicon® Ultra 离心式超滤管因其完美的设计 一经推出即成为生物样品操作的行业头牌产品。不论是蛋白、 核酸、***或颗粒物,抑或低浓度样品或宝贵的活性样品, Amicon® Ultra 都能兼顾高回收率和操作的方便性及标准 化,并满足下游各种应用的要求,使研究者处理样品时倍感轻 松。 Amicon® Ultra 超滤管的独特优点: 有效浓缩同时保证比较高的蛋白回收率 合理的死体积设计 •避免样品离干而降低回收率 •便于估计和控制样品浓缩倍数 •重复性好,便于样品数据相互比较松江区浓缩管联系方式超滤浓缩管应用领域你知道吗。
特别推荐应用(提供实验报告作为参考) Microcon®超滤管: Microcon®PCR 级超滤管: • 法医鉴定分析的DNA样品制备 • 生物大分子样品浓缩、脱盐及缓冲液置换 • 体外合成mRNA的纯化 • 以人mRNA或总RNA制备荧光DNA探针 • 游离标记物的去除 • 纳克级核酸的定量回收及大片段DNA完整性研究 • 替代乙醇沉淀,离心法高效浓缩基因组DNA 应用指南 典型应用 肽及生长因子浓缩 蛋白浓缩与脱盐 电泳等操作前的蛋白样品浓缩 HPLC前去除蛋白 组织培养抽提物和细胞裂解液中大分子成分的纯化 生物样本浓缩(抗原,抗体,酶等) 从含有SDS(或无SDS)的缓冲液中浓缩gDNA 核酸浓缩与脱盐(单链或双链核酸) 去除标记核苷酸 去除标记氨基酸 从扩增的DNA产物中去除引物 克隆前去除连接序列(linker)
高浓度样品浓缩 Centriprep®超滤管 Centriprep®超滤管是一次性使用的离心管,可以用于2-15mL生物样品的纯化、浓缩、脱盐等过滤应用。这种离心超滤管流速很快,设计紧凑,螺旋盖使用起来非常方便,过滤收集管内置低吸附的Ultracel®再生纤维素膜,装有气密盖。 优点与应用 特有的反向流操作模式,较大的死体积 采用Ultracel®膜,用于浓缩和纯化富含颗粒物 的高浓度样品,样品回收率>90% 配合标准的50mL离心管吊篮式转子使用 从发酵培养基、细胞培养基、细胞裂解液中分 离低分子量溶质根据您的具体需求选择不同的 超滤浓缩管设计。
Amicon® Ultra 4 mL 超滤管 -离心速度快而保持很高的回收率 4 种不同蛋白在不同截留分子量的 Amicon® Ultra 4mL 超滤管中浓缩(3kDa 细胞色素 C, 10kDa 细胞色素 C,30kDa BSA,100kDa IgG), 测定在离心一定时间后的回收率。数据显 示所有样品在离心 15 分钟左右回收率均 >95%。 为了方便初次使用者选择**合适的超 滤管产品,默克密理博生命科学部网 站上提供选择指引,您需要按照提 示进行选择,**终会选出一款产品。 为每次实验选择**合适的, 您也能快速成为超滤高手!你知道上海超滤浓缩管代理销售哪家比较好吗?金山区超滤浓缩管联系人
Millipore超滤浓缩管用于蛋白超滤、浓缩、除盐!青浦区默克超滤浓缩管联系电话
将装有样品的Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管接在Amicon®Pro上样池的下端。 3. Amicon®Pro上样池内加入预先准备好的1.5 mL含有染料的反应混合液。 4. 4,000×g离心15 min。 5. 优化选做:将样品在室温下多孵育30 min。 6. 上样池中加入1.5 mL PBS± NaN3。 7. 4,000×g离心15 min换液同时浓缩。 8. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管1,000×g离心回收标记好的抗体。 特点与优点: 特别的反转离心回收设计,滞留体积很小,样品损失少, 样品回收率通常>90% 浓缩倍数达到50-200倍 Ultracel®再生纤维素膜和聚丙烯外壳将吸附降至比较低 特别设计的死体积防止离干,保证样品回收率和活性 青浦区默克超滤浓缩管联系电话