浓缩管基本参数
  • 产地
  • 美国
  • 品牌
  • Merck millipore
  • 型号
  • UFC901096
  • 是否定制
浓缩管企业商机

浓度:当需要截留的样品浓度很低时,通量通常不受浓度影响。操作过

程中,随着溶质浓度的升高,增加的粘滞性和极化将导致通量降低。

温度:粗体,作为获得压力、浓度一样的词条通常增加操作时的温度可

以提高超滤效率。每增加 1℃蛋白扩散率增加 3-3.5%,同时溶液粘度降低。

实践中一般是以样品和设备能耐受的比较高温度来操作。

pH:改换溶液和 / 或 pH 常常改变分子结构,蛋白尤其如此。在蛋白的 pI

值蛋白会沉淀,产生堵塞和得率损失。

污垢:溶液中除了目的分子造成的浓差极化,还有其它小颗粒和分子会

在膜上富集和沉淀,逐渐堆积在膜孔上或膜孔结构中,形成结晶和沉淀。 对于不同的需求我们选择不同的 超滤浓缩管系列。上海默克4ml超滤浓缩管哪家好

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超滤(UF)常用于分离溶液中极其微小的颗粒和不溶分子。虽然分离效果受到包括化学性质、电荷等多种因素影响,这种方法主要还是以分子大小为**基本的考虑。超滤膜截留1-1000kDa(MW)的分子,盐和水等小分子会透过,因此在大分子样品处理中得到了应用。胶状或微粒状物质也能够被截留。UF膜既可以用于透过样品也用于保留样品的纯化。样品***小于膜孔径,则经过膜处理可以达到除热源、澄清和与大分子污染物的分离的效果。如果目的分子远远大于膜孔径,膜处理则可以将小分子污染物去除而目的分子被浓缩。超滤方法相比沉淀法对于样品更温和,没有发生容易导致生物大分子失活的相变,而且在浓缩的同时可以完成对溶质的除盐。超滤的应用不限于蛋白样品的操作,也常用于核酸样品制备,包括分子克隆和质粒纯化。DNA和RNA样品起始浓度低至5ng/mL也可以被高效地在数分钟内被浓缩,回收率达到99%以上。超滤浓缩管销售上海 超滤浓缩管代理销售推荐益启生物公司。

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截留

截留有时也称为排阻。水合程度、离子和空间位置效应会导致分子量相近

的分子表现非常不同的截留状态。许多生物大分子在不同的 pH 或离子强

度改变的情况下倾向于聚集或改变构象,因此其有效大小可能比 “天然”

分子大恨多,从而导致排阻增加。比如,有些蛋白质在某些缓冲液条件下

会发生多聚化,而另一些则发生解聚(如血红素蛋白)成亚基。这使选择

合适截留分子量的膜变得复杂。以默克密理博的经验,我们通常推荐选择

为目的分子大小一半的膜作为尝试的优先,再根据实际情况加以调整。

如果能确保用同样的超滤管对其它蛋白成功操作的话,那么有可能是这个目的蛋白的原因。有时蛋白会因其本身的一些特性(构象差异)而影响浓缩效果,建议选用上一分子量级别的超滤管(如原本选用30k,此时可以选择10k)。

2)如果目的样本也不在滤过液中,那么:

a)蛋白样本起始浓度是否大于25ug/mL? b)用来确定样本浓度的方法是什么?是否可信?

c)目的蛋白是不是沉淀了?如果是的,具体解决方法请参考上面的关于蛋白沉淀问题的解释。 超滤浓缩管的优点有很多。

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特别推荐应用(提供实验报告作为参考)

Microcon®超滤管:

Microcon®PCR 级超滤管:

• 法医鉴定分析的DNA样品制备

• 生物大分子样品浓缩、脱盐及缓冲液置换

• 体外合成mRNA的纯化

• 以人mRNA或总RNA制备荧光DNA探针

• 游离标记物的去除

• 纳克级核酸的定量回收及大片段DNA完整性研究

• 替代乙醇沉淀,离心法高效浓缩基因组DNA

应用指南

典型应用

肽及生长因子浓缩

蛋白浓缩与脱盐

电泳等操作前的蛋白样品浓缩

HPLC前去除蛋白

组织培养抽提物和细胞裂解液中大分子成分的纯化

生物样本浓缩(抗原,抗体,酶等)

从含有SDS(或无SDS)的缓冲液中浓缩gDNA

核酸浓缩与脱盐(单链或双链核酸)

去除标记核苷酸

去除标记氨基酸

从扩增的DNA产物中去除引物

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脱盐/缓冲液置换并浓缩

5次低速离心,总耗时~35分钟

1. 在上样池中加入0.5 mL TBS-T预湿Amicon® Pro。1,000×g离心1 min。

2. 优化选做:加入1.5 mL用于置换的缓冲液,1,000×g离心1 min。

3. 上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管(有5种截留分子量规格可选)。

4. 加入1.5 mL样品,4,000×g离心15 min进行浓缩。

5. 加入1.5 mL需要置换的缓冲液,4,000×g离心15 min,换液的同时进行浓缩。

6. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管,1,000×g离心回收处理好的蛋白。

* 进行较大体积操作时,可以适当延长离心时间,也可参考Amicon® Pro完整操作说明书

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