成功的IHC实验取决于高质量抗体选择和合遇的实验浓度。每一种抗体都要根据实际的实验情况进行优化。即使是同一反应体系，针对不同的抗体适合的稀释浓度也是不同的。实验者可以以说明书上推荐的稀释倍数作为参考。
SNAPi.d.⑧2.0IHC加速器带来的主要改进·直观的设计，将封闭、洗涤、抗体孵育及标记等步骤结合起来· 不需要使用石蜡笔·抗体可以收集后继续使用
·切片操作的时间大幅减少，洗涤步骤耗时大幅减少，可同时操作多达24涨切片， Sigma抗体上海授权代理商。青浦区鉴定抗体抗体代理价格
这是为了避免或尽量减少冻融循环。抗体溶液不可反复冻融，因为这可以导致抗体。
聚集，从而引起活性丧失。因此，贮存溶液应在保存前先进行分装。未稀释抗体应在保存于-20℃之前分装，以尽量减少可使抗体变性的反复冻融循环。集中保存抗体可预防或尽量减少降解。可在抗体溶液中加入终浓度为50%的冷冻保护剂，如甘油，以预防冻融造成的损失。请勿将含甘油的抗体保存于-80℃。通常不对酶结合抗体进行冷冻，以免损失酶活性及其结合能力。 鉴定抗体抗体哪家好益启生物提供专业的多种正规科研抗体。
叠氮化钠可通过某些偶联方法干扰多种生物实验。因此，进行此类实验时比较好使用离心透析过滤法、透析法或凝胶过滤法除去叠氮化钠，或使用无叠氮化物的抗体。注意：叠氮化钠有毒。对于所有实验室试剂，处理注意事项均请查阅“材料安全性数据表”（MSDS）。抗体为相对稳定的蛋白，能够抵抗较广范围的温和变性条件。当按照生产商的建议条件正确保存时，抗体可保持稳定达数年。
大多数情况下，抗体保存在-20℃时可不损失其结合能力。
比较好避免在无霜冰箱中保存抗体。
信号弱
信号高
本底较高
准确度较低（一偶然误差）
计算的教据过高或过任《一系统误差，数据与"标准数据"的偏差）
可能的原因： 实验试剂使用错误实验试剂损坏
所用实验试剂稀释度错误仪器的过滤器选择错误（波长）前育时间过短，温度过低
试剂温度不正确
在较高浓度时，叠氮化钠、燕基乙身或DTT可能干扰过氧化物恃活性。所用实验试剂稀释度错误醇育时间过长，温度过高
洗洛不足洗得污染
试剂或小瓶/试管受到以前实验的污染
所用实验试剂（抗体和等结合物）稀释度错误 正规科研抗体品牌零售代理商家。
对于探索性研究，Western blotting仍是优先平台，是用于评估新抗体和其它蛋白检测分析
法（如ELISA、基于微珠的分析法、流式细胞术和免疫组织化学）的标准。新技术的开发**减少Western blotting过程需要的时间（例如默克密理博的 SNAP i.d.® 2.0系统，目录编
号SNAP2MM），提高了WB实验的效率。
Western blotting的基本程序涉及下述关键步骤
样本制备
凝胶电泳
转膜
封闭非特异性结合
加入抗体
检测
Western Blot 实验流程图
Troubleshooting
问题 可能的原因 处理方法
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无信号 在检测之前，转印膜在贮藏过程中发
生蛋白降解
二抗选择错误
曝光时间太短
抗原上样量不足
抗原可能被破坏
检测系统
一抗的亲和力较低
化学发光底物已丧失活性。
已从膜上剥离抗体并再次杂交。
处理方法 使用新转的膜进行实验。
检查是否使用适当的二抗。
增加曝光时间。
在凝胶上载入更多的抗原，或在载入之前使用超滤管浓缩样品，
或使用免疫沉淀，以增加凝胶中的目标蛋白量。
检查确保电泳处理未破坏抗原性。
增加（和优化）一抗的浓度和培养时间、温度。 青浦区鉴定抗体抗体代理价格
上海益启生物科技有限公司致力于化工，以科技创新实现***管理的追求。益启生物作为 从事生物科技（除生物试剂）领域内的技术开发、技术咨询、技术服务、技术转让；室内外装潢；建筑工程设计与施工；展览展示服务；计算机及配件、化工原料及产品（除危险化学品、监控化学品、民用物品、易制毒化学品）实验室设备、服装服饰及辅料、仪器仪表、电子数码产品、普通劳防用品、文体用品的销售。的企业之一，为客户提供良好的试剂，耗材，科研试剂，仪器设备。益启生物不断开拓创新，追求出色，以技术为先导，以产品为平台，以应用为重点，以服务为保证，不断为客户创造更高价值，提供更优服务。益启生物始终关注化工市场，以敏锐的市场洞察力，实现与客户的成长共赢。
